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宿遷體外研究D-熒光素鉀鹽供應(yīng)商

來源: 發(fā)布時(shí)間:2022-06-25

    熒光素也就是FDAFDA可透過細(xì)胞膜并作為熒光素積蓄在活細(xì)胞內(nèi),。由于熒光素較BCECF或Calcein的親水性低,因此熒光素從細(xì)胞中滲漏的量也高,。FDA也可用于流式細(xì)胞儀,。熒光素的激發(fā)和發(fā)射波長分別為488nm和530nm。熒光素酶(英文名稱:Luciferase)是自然界中能夠產(chǎn)生生物熒光的酶的統(tǒng)稱,,其中更有代表性的是一種學(xué)名為Photinuspyralis的螢火蟲體內(nèi)的熒光素酶,。在相應(yīng)化學(xué)反應(yīng)中,熒光的產(chǎn)生是來自于螢光素的氧化,,有些情況下反應(yīng)體系中也包括三磷酸腺苷(ATP),。沒有熒光素酶的情況下,螢光素與氧氣反應(yīng)的速率非常慢,,而鈣離子的存在常??梢赃M(jìn)一步加速反應(yīng)(與肌肉收縮的情況相似)。[1]熒光生成反應(yīng)通常分為以下兩步:螢光素+ATP→螢光素化腺苷酸(luciferyladenylate)+PPi螢光素化腺苷酸+O2→氧熒光素+AMP+光這一反應(yīng)非常節(jié)省能量,,幾乎所有輸入反應(yīng)的能量都被轉(zhuǎn)化為光,。與之形成鮮明對比的是人類使用的白熾燈,只有越10%的能量被轉(zhuǎn)化為光,,剩余的能量都變?yōu)闊崮芏焕速M(fèi),。熒光素或熒光素酶不是特定的分子,而是對于所有能夠產(chǎn)生熒光的底物和其對應(yīng)的酶的統(tǒng)稱,,雖然它們各不相同,。不同的能夠控制發(fā)光的生物體用不同的熒光素酶來催化不同的發(fā)光反應(yīng)。D-熒光素鉀鹽測試需要滿足哪些條件,?宿遷體外研究D-熒光素鉀鹽供應(yīng)商

    海腎螢光素酶因其底物要求和光輸出方面的差異而可用于雙重報(bào)告檢測,。Amplite?海腎熒光素酶報(bào)告基因測定Amplite?Renilla螢光素酶報(bào)告基因檢測試劑盒提供了一種快速,靈敏的方法,,可以使用專有的發(fā)光配方在基于細(xì)胞的檢測中檢海腎螢光素酶的活性,,與海腎螢光素酶相互作用后,該試劑產(chǎn)生具有強(qiáng)光的產(chǎn)物,。Amplite?海腎熒光素酶報(bào)告基因檢測試劑盒特點(diǎn):該測定法與標(biāo)準(zhǔn)細(xì)胞生長培養(yǎng)基兼容該試劑盒可以測量野生型和合成hRluc基因的原始表達(dá)或基因表達(dá)每個(gè)試劑盒均包含可以方便96孔和384孔板檢測所必不可少的組分,。熒光素酶是生物體內(nèi)催化熒光素等物質(zhì)氧化發(fā)光的一類酶的總稱。自然界中,,不同的發(fā)光生物擁有不同的熒光素酶,,除了螢火蟲熒光素酶(FireflyLuciferase)之外,還有發(fā)光細(xì)菌體內(nèi)的細(xì)菌熒光素酶、發(fā)光海星的海星熒光素酶等,。目前,,人們對螢火蟲熒光素酶的研究**多、應(yīng)用***,。一則關(guān)于手機(jī)上的細(xì)菌的新聞里,,**在用ATP熒光檢測儀檢測手機(jī)表面的細(xì)菌。ATP是一種在動(dòng)物,、植物和細(xì)菌等活細(xì)胞中都存在的能量物質(zhì),,由前述的反應(yīng)式可知,ATP與熒光素,、熒光素酶反應(yīng)發(fā)出熒光,。檢測樣品中的微生物越多,ATP就越多,,熒光反應(yīng)的光亮就越大,。淮安ATPD-熒光素鉀鹽活題成像D-熒光素鉀鹽檢測公司招代理嗎,?

    請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作,。8)本產(chǎn)品只作科研用途!D-熒光素鉀鹽是熒光素酶的水溶性底物,,存在于多種發(fā)光生物體中,。在ATP和熒光素酶的催化作用下,D-熒光素鉀被氧化,,產(chǎn)生藍(lán)綠色的光(560nm),,當(dāng)?shù)孜镞^量時(shí),產(chǎn)生的Chemicalbook光量子數(shù)與熒光素酶的濃度呈正相關(guān),。編碼熒光素酶的Luc基因是植物,、哺乳動(dòng)物細(xì)胞的常用報(bào)告基因。由于沒有背景干擾,,因此可以很容易地檢測出低至,。用途D-熒光素鉀鹽是一類在生物體中發(fā)現(xiàn)的能引起生物發(fā)光的雜環(huán)化合物,如螢火蟲,。在ATP存在下,,螢光素酶將其氧化脫羧后會(huì)發(fā)光?;瘜W(xué)研究中可用于熒光素酶的基板,。生物活性D-Luciferin是螢火蟲熒光素酶的底物。體外研究D-luciferinisthenaturalsubstrateoftheenzymeluciferase(Luc),μM.體內(nèi)研究Bioluminescenceimaging(BLI)usingthefireflyluciferase(Fluc)(5,10,15,and20min)μLofD-luciferin(intraperitoneallyorintravenously)stocksolutionpergramofbodyweight:normally~200μLfora20gmouseforastandard150mg/(eitherPotassiumorSodiumSalt)atroomtemperatureanddissolveindPBS,。

    是新型底物開發(fā)的一個(gè)早期實(shí)例,。[1]2012NanoLuc?螢光素酶基于定向進(jìn)化和新型底物開發(fā)方面的經(jīng)驗(yàn),研究人員從蝦的螢光素酶改造設(shè)計(jì)出一種新型螢光素酶報(bào)告基因,即NanoLuc?螢光素酶,。這是一種小分子(19kDa)單體酶,,具有獨(dú)特的底物,其靈敏度比已具備高靈敏度的螢火蟲或海腎螢光素酶系統(tǒng)高約100倍,。這種新型的報(bào)告基因有著范圍廣的應(yīng)用前景,,為進(jìn)一步的技術(shù)開發(fā)奠定了基礎(chǔ)。[1]2015NanoBRET?技術(shù)NanoLuc?的小體積和非常明亮的光輸出是作為蛋白質(zhì)標(biāo)簽的理想特征,。這些特征還很適合作為生物發(fā)光共振能量轉(zhuǎn)移(BRET)的供體,。一項(xiàng)針對各種能量受體熒光基團(tuán)的深入研究發(fā)現(xiàn),,紅色光譜中的可選擇性有助于消除與BRET測定相關(guān)的一些挑戰(zhàn),。可將這些熒光基團(tuán)添加到蛋白質(zhì)配基等分子中以測量靶蛋白的結(jié)合,,或與HaloTag?配基耦聯(lián)以進(jìn)行活細(xì)胞中蛋白質(zhì):蛋白質(zhì)相互作用的檢測,。[1]2016NanoBiT?技術(shù)隨著NanoLuc?的誕生,Promega的科學(xué)家努力將該報(bào)告基因改造為多亞基系統(tǒng),,即“NanoLuc?BinaryTechnology”或NanoBiT?,。該系統(tǒng)由兩部分組成:11個(gè)氨基酸的小標(biāo)簽和一個(gè)更大,更精細(xì)的NanoLuc?亞基,,LgBiT,。這兩部分結(jié)構(gòu)互補(bǔ)結(jié)合。做D-熒光素鉀鹽測試工作液是先用現(xiàn)配,。

    普遍應(yīng)用于整個(gè)生物技術(shù)領(lǐng)域,,尤其是體內(nèi)活ti成像技術(shù)。其作用機(jī)制是在ATP和熒光素酶的作用下,,熒光素(底物)能夠被氧化發(fā)光,。當(dāng)熒光素過量時(shí),產(chǎn)生的光量子數(shù)與熒光素酶的濃度呈正相關(guān)性,。螢光素酶(英文名稱:Luciferase)是自然界中能夠產(chǎn)生生物熒光的酶的統(tǒng)稱,,其中更有代表性的是一種學(xué)名為Photinuspyrali'的螢火蟲體內(nèi)的螢光素酶,螢火蟲發(fā)光的腹部或海洋的藍(lán)色發(fā)光波浪將大自然中生物發(fā)光奇跡呈現(xiàn)于世,。在生物化學(xué)和分子生物學(xué)的早期,,這一現(xiàn)象被認(rèn)為是發(fā)展生物分析的有力平臺。1991年,,Promega發(fā)布了di一代螢光素酶分析產(chǎn)品,,并啟動(dòng)了基于螢光素酶的進(jìn)一步創(chuàng)新計(jì)劃,通過持續(xù)致力于研究和創(chuàng)新生物發(fā)光系統(tǒng)建立了各種不同的分析技術(shù)Promega螢光素酶技術(shù)發(fā)光史里程碑AGlo-ingHistoryofInnovationandDiscovery1990年12月,,Promega初次提出螢火蟲螢光素酶(Luc)作為一種新興報(bào)告基因技術(shù)的應(yīng)用可能性,。當(dāng)時(shí)的人們認(rèn)為,螢火蟲螢光素酶具備的生物發(fā)光特性、極高的靈敏度和快速簡單的檢測流程等特點(diǎn),,可能會(huì)對分子生物學(xué)家的研究產(chǎn)生重要的影響,。幾個(gè)月后,di一代螢火蟲螢光素酶報(bào)告基因載體和檢測試劑在Promega誕生,,使這項(xiàng)新技術(shù)正式并更范圍廣地為全球研究人員服務(wù),。D-熒光素鉀鹽一般都是使用什么技術(shù)。揚(yáng)州熒光素酶D-熒光素鉀鹽生物公司

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    就可以用高敏感度的CCD相機(jī)對動(dòng)物體內(nèi)進(jìn)行***觀察而不會(huì)傷害到動(dòng)物本身,。在螢光素酶中加入正確的螢光素底物就可以放出熒光,而發(fā)出的光子可以被光敏感元件,,如螢光探測器或改進(jìn)后的光學(xué)顯微鏡探測到,。這就使得對包括***在內(nèi)的多種生命活動(dòng)進(jìn)程進(jìn)行觀察成為可能。例如,,螢光素酶已經(jīng)被用于商業(yè)化的次世代焦磷酸定序技術(shù),,借由dNTP接上DNA鏈時(shí)水解放出的焦磷酸,透過另外一個(gè)硫酸鹽腺甘酸轉(zhuǎn)移酶反應(yīng),,螢光素酶能將產(chǎn)物ATP與螢光素轉(zhuǎn)化為冷光,,機(jī)器借此探測光線并定序。螢光素酶也可以被用于檢測血庫中所存血液中的紅血球是否開始破裂,。法醫(yī)可以用含有螢光素酶的溶液來檢測犯罪現(xiàn)場中殘留的血跡,。醫(yī)院用螢光素酶的發(fā)光來發(fā)現(xiàn)特定的疾病。螢光素酶還可以作為“報(bào)告蛋白”被用于分子生物學(xué)研究中,,例如,,用于在轉(zhuǎn)染過螢光素酶的細(xì)胞中檢測特定啟動(dòng)子的轉(zhuǎn)錄情況或用于探測細(xì)胞內(nèi)的ATP的水平;這一技術(shù)被稱為報(bào)告基因檢測法或螢光素酶檢測法(LuciferaseAssay),。螢光素酶是一個(gè)熱敏感蛋白,,因此經(jīng)常被用于研究蛋白熱變性過程中熱休克蛋白的保護(hù)能力。此外,,螢光素酶水母素的發(fā)光強(qiáng)度與環(huán)境中鈣離子濃度相關(guān),,因此可用于檢測生物體內(nèi)的鈣。宿遷體外研究D-熒光素鉀鹽供應(yīng)商