后者能夠易溶于水或緩沖液中，使用方便,，溶劑無毒性,，特別適合體內(nèi)實驗。配成溶液后的這三種產(chǎn)品,，在絕大多數(shù)的應(yīng)用上都沒有實質(zhì)性的差別,。產(chǎn)品性質(zhì)運輸和保存運輸條件：4℃冰袋運輸；短期保存：4℃干燥避光長期保存：-20℃干燥避光母液保存：-20℃避光有效期長期保存：有效期一年工作液：先用現(xiàn)配使用方法1.體外生物發(fā)光檢測1）用無菌蒸餾水溶解D-熒光素鉀鹽,，配制成30mg/mL的儲存液(100-200×),，混勻。立即使用,，或分裝于-20℃避光保存,，避免反復(fù)凍融。2）用預(yù)熱好的組織培養(yǎng)基將儲存液稀釋至mg/mL的工作液濃度,。3）去除細胞培養(yǎng)基,。4）待圖像分析前，向細胞內(nèi)添加熒光素工作液,，37℃孵育5-10min,，然后進行圖像分析。2.***成像分析1）用無菌的DPBS(w/oMg2+,、Ca2+)配制15mg/mL的熒光素的儲存液,，混勻。2）用μm濾膜過濾除菌,。立即使用,，或分裝于-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融,。3）腹腔注射（.）,，按照150mg/kg的熒光素/體重濃度進行注射，以小鼠為例,，每只小鼠體重假定20g,，每只小鼠用量3mg；4）注射入體內(nèi)10-15min（待光信號達到更強穩(wěn)定平臺期）后進行成像分析,。注：建議對每只動物模型都需要建立熒光素酶動力學(xué)曲線,，從而確定更高信號檢測時間和信號平臺期,。 南京地區(qū)有哪些做D-熒光素鉀鹽測試的公司。熒光二抗?jié)舛?/p>
SodiumSalt/D熒光素鈉鹽分子式：NaC11H7N2O3S2·H2O分子量：g/mol純度：高級純（）應(yīng)用：1）體外化學(xué)發(fā)光分析（invitro）,；2）***成像實驗（invivo）,；3）高靈敏度ATP分析；步驟：Protocol1：InVitroBioluminescentAssays/體外生物發(fā)光檢測1）用mL蒸餾水溶解gD-熒光素鈉鹽,，配制成100mM的儲存液（200×,，濃度30mg/ml）?；靹蚝罅⒓词褂没蚍盅b后-20℃凍存,。2）用組織培養(yǎng)基1∶200稀釋儲存液，配置工作液(終濃度150μg/mL),。3）去除培養(yǎng)細胞的培養(yǎng)基,。4）待圖像分析前，向細胞內(nèi)添加1×熒光素工作液,，然后進行圖像分析,。Protocol2：Invivoanalysis/***成像分析1）用無菌的PBS（w/oMg2+、Ca2+）配制D-熒光素鈉鹽工作液(15mg/mL),，,。一旦使用，保持冰冷且避光,。D-熒光素（D-Luciferin）是熒光素酶（Luciferase）的常用底物,，普遍應(yīng)用于整個生物技術(shù)領(lǐng)域，尤其是體內(nèi)***成像技術(shù),。其作用機制是在ATP和熒光素酶的作用下,，熒光素（底物）能夠被氧化發(fā)光（見下圖）。當(dāng)熒光素過量時,，產(chǎn)生的光量子數(shù)與熒光素酶的濃度呈正相關(guān)性,。將攜帶熒光素酶編碼基因（Luc）的質(zhì)粒轉(zhuǎn)染入細胞后，導(dǎo)入研究動物如大,、小鼠體內(nèi),，之后注入熒光素，通過生物發(fā)光成像技術(shù)（BLI）來檢測光強度變化,。熒光二抗?jié)舛茸鯠-熒光素鉀鹽的哪家便宜,。
因此只有在活細胞內(nèi)才會產(chǎn)生長發(fā)生光現(xiàn)象，并且發(fā)光光強度與標記細胞的數(shù)目線性相關(guān),。結(jié)構(gòu)與性能熒光素在氧氣,、ATP存在的條件下和熒光素酶發(fā)生反應(yīng)，生成氧化熒光素(oxyluciferin)，并產(chǎn)生長發(fā)生光現(xiàn)象,。熒光素是腹腔注射或尾部靜脈注射進入小鼠體內(nèi)的,，約一分鐘就可以擴散到小鼠全身。熒光素的半衰期約三個小時,，只有活細胞才能夠持續(xù)表達熒光素酶。(1)熒光素不會影響動物的正常生理功能,。(2)熒光素是280道爾頓的小分子,，水溶性和脂溶性都非常好，很容易穿透細胞膜和血腦屏障,。(3)熒光素在體內(nèi)擴散速度快,，可通過腹腔注射或尾部靜脈注射進入動物體內(nèi)。腹腔注射擴散較慢,，持續(xù)發(fā)光長,。熒光素腹腔注射老鼠后約1min后表達熒光素酶的細胞開始發(fā)光，10min后強度達到穩(wěn)定的更高點,，在更高點持續(xù)約20~30min后開始衰減,，約3h后熒光素排除，發(fā)光全部消失,，更佳檢測時間是在注射后15~35min之間,；若進行熒光素靜脈注射，擴散快,，但發(fā)光持續(xù)時間很短,。科研人員根據(jù)大量的實驗總結(jié)出熒光素的合適的用量是150mg/kg,，即體重20克的小鼠需要3毫克的熒光素,。(4)觀察時間的間隔沒有更短限制，只要觀察的條件控制一致就可以,。雖然底物在動物體內(nèi)有一定的代謝過程,。
熒光素酶(Luciferase)是自然界中能夠催化熒光素產(chǎn)生生物發(fā)光的酶的統(tǒng)稱，其中**有7a70d2e3-5dda-4f49-84be-c6的是來自螢火蟲體內(nèi)(Fire?y)和海腎(Renilla)體內(nèi)的兩類螢光素酶,，分別命名為F-Luciferase和R-Luciferase,，同時近年來研究得較多的來源于高斯氏菌的高斯熒光素酶（Gaussluciferase）。熒光素酶可以催化luciferin氧化成oxyluciferin,，在luciferin氧化的過程中,，會發(fā)出生物熒光(bioluminescence)，可通過熒光測定儀設(shè)備測定luciferin氧化過程中釋放的生物熒光,，常應(yīng)用于啟動子轉(zhuǎn)錄活性調(diào)控及miRNA靶基因驗證等方向研究,。螢火蟲螢光素酶**通用和**常見的報告基因是北美螢火蟲photinuspyralis的熒光素酶，該蛋白質(zhì)不需要翻譯后修飾即可獲得酶活性。高濃度（體內(nèi)）甚至沒有毒性,，可用于原核和真核細胞,。Amplite?螢光素酶報告基因檢測試劑盒（12518）使用無DTT**配方來定量活細胞和細胞提取物中的螢光素酶活性。該測定基于螢火蟲熒光素酶,，螢火蟲熒光素酶是一種單體的61kD酶,，可催化熒光素的兩步氧化，在560nm處產(chǎn)生光,。Amplite?螢光素酶報告基因檢測試劑盒特點：具有優(yōu)化的“混合讀取”測定規(guī)程,，可與HTS液體處理儀器兼容具有高靈敏度。D-熒光素鉀鹽找南京翌科生物科技有限公司怎么樣,？
重組為一個明亮的螢光素酶,。這些亞基的親和力可以和SmBiT肽一樣低，從而可以進行蛋白質(zhì)相互作用的測定,；也可以和HiBiT一樣高,，從而允許自我組裝。[1]2017HiBiT?技術(shù)基于NanoBiT?系統(tǒng)的研究,，我們將與LgBiT具有極強親和作用的,。HiBiT作為一種易于檢測且具有高靈敏度的蛋白質(zhì)標簽，具有多種功能,，例如當(dāng)與基于CRIPSR的標簽一起使用時,，可以創(chuàng)建內(nèi)源性報告基因模型。[1]2020Lumit?技術(shù)隨著NanoBiT?技術(shù)的發(fā)展,，人們認識到可以利用該系統(tǒng)通過結(jié)合免疫測定的組分檢測多種分析物,。由此產(chǎn)生的平臺（現(xiàn)稱為“Lumit”）提供了具有高靈敏度的簡化免疫檢測法。熒光素酶（英文名稱：Luciferase）是自然界中能夠產(chǎn)生生物熒光的酶的統(tǒng)稱,，其中更有代表性的是一種學(xué)名為Photinuspyrali'的螢火蟲體內(nèi)的熒光素酶,。在相應(yīng)化學(xué)反應(yīng)中，熒光的產(chǎn)生是來自于螢光素的氧化,，有些情況下反應(yīng)體系中也包括三磷酸腺苷（ATP）,。沒有熒光素酶的情況下，螢光素與氧氣反應(yīng)的速率非常慢,，而鈣離子的存在常?？梢赃M一步加速反應(yīng)（與肌肉收縮的情況相似）。熒光生成反應(yīng)通常分為以下兩步：螢光素+ATP→螢光素化腺苷酸,。D-熒光素鉀鹽測試需要哪些必備條件,？淮安專業(yè)做D-熒光素鉀鹽
南京翌科生物科技有限公司的D-熒光素鉀鹽測試怎么樣？熒光二抗?jié)舛?/p>
普遍應(yīng)用于整個生物技術(shù)領(lǐng)域,，尤其是體內(nèi)活ti成像技術(shù),。其作用機制是在ATP和熒光素酶的作用下,，熒光素（底物）能夠被氧化發(fā)光。當(dāng)熒光素過量時,，產(chǎn)生的光量子數(shù)與熒光素酶的濃度呈正相關(guān)性,。螢光素酶（英文名稱：Luciferase）是自然界中能夠產(chǎn)生生物熒光的酶的統(tǒng)稱，其中更有代表性的是一種學(xué)名為Photinuspyrali'的螢火蟲體內(nèi)的螢光素酶,，螢火蟲發(fā)光的腹部或海洋的藍色發(fā)光波浪將大自然中生物發(fā)光奇跡呈現(xiàn)于世,。在生物化學(xué)和分子生物學(xué)的早期，這一現(xiàn)象被認為是發(fā)展生物分析的有力平臺,。1991年,，Promega發(fā)布了di一代螢光素酶分析產(chǎn)品，并啟動了基于螢光素酶的進一步創(chuàng)新計劃,，通過持續(xù)致力于研究和創(chuàng)新生物發(fā)光系統(tǒng)建立了各種不同的分析技術(shù)Promega螢光素酶技術(shù)發(fā)光史里程碑AGlo-ingHistoryofInnovationandDiscovery1990年12月，Promega初次提出螢火蟲螢光素酶(Luc)作為一種新興報告基因技術(shù)的應(yīng)用可能性,。當(dāng)時的人們認為,，螢火蟲螢光素酶具備的生物發(fā)光特性、極高的靈敏度和快速簡單的檢測流程等特點,，可能會對分子生物學(xué)家的研究產(chǎn)生重要的影響,。幾個月后，di一代螢火蟲螢光素酶報告基因載體和檢測試劑在Promega誕生,，使這項新技術(shù)正式并更范圍廣地為全球研究人員服務(wù),。熒光二抗?jié)舛?/p>