可用熒光素酶檢測系統(tǒng)靈敏方便地測定熒光素酶基因的表達。熒光素酶報告基因有許多優(yōu)點:①非放射性,;②比CAT及其他報告基因速度快,;③比CAT靈敏100倍;④熒光素酶在哺乳細胞中的半衰期為3小時,,在植物中的半衰期為3.5小時,。由于半衰期短,故啟動子的改變會即時導(dǎo)致熒光素酶活性的改變,,而熒光素酶不會積累,。相反,CAT在哺乳細胞中的半衰期為50小時,。熒光素酶濃度在10—16mol/L(10pS/L)到10-8mol/L(1mg/L)范圍內(nèi),,熒光信號強度與酶濃度成正比。在理想條件下,,可檢測到l0-20mol/L的熒光素酶,。檢測步驟:1.用生物信息學(xué)方法分析并預(yù)測啟動子區(qū)可能的轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合位點。2.設(shè)計引物用PCR法從基因組DNA中克隆所需的靶啟動子片段,,將此片段插入到熒光素酶報告基因質(zhì)粒(pGL3-basic)中,。3.篩選陽性克隆,測序,。擴增克隆并提純質(zhì)粒備用,。4.?dāng)U增轉(zhuǎn)錄因子質(zhì)粒,提純備用,。同時準(zhǔn)備相應(yīng)的空載質(zhì)粒對照,,提純備用。5.培養(yǎng)293(或其它目的細胞),,并接種于24孔板中,,生長10-24小時(80%匯合度)。6.將報告基因質(zhì)粒與轉(zhuǎn)錄因子表達質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染細胞,。7.提取蛋白并用于熒光素酶檢測,。8.加入底物,測定熒光素酶的活性,。9.計算相對熒光強度,,并與空載對照比較,。D-熒光素鹽也算是鈉鹽和鉀鹽。熒光增白劑ob-3
產(chǎn)品描述D-熒光素(D-Luciferin)是熒光素酶(Luciferase)的常用底物,,普遍應(yīng)用于整個生物技術(shù)領(lǐng)域,,特別是體內(nèi)***成像技術(shù)。其作用機制是在ATP和熒光素酶的作用下,,熒光素底物能夠被氧化發(fā)光,。當(dāng)熒光素過量時,產(chǎn)生的光量子數(shù)與熒光素酶的濃度呈正相關(guān)性(見下圖),。將攜帶熒光素酶編碼基因(Luc)的慢病毒轉(zhuǎn)染入細胞后構(gòu)建穩(wěn)定表達細胞株,,構(gòu)建原位**模型,之后注入熒光素底物,,通過IVIS系統(tǒng)來檢測光強度變化,,從而實時監(jiān)測疾病發(fā)展?fàn)顟B(tài)或進行藥物藥效評價等。也可以利用ATP對此反應(yīng)體系的影響,,根據(jù)生物發(fā)光強度的變化來指示能量或生命體征,。注:在抗**藥物藥效評價試驗中,由于生物自發(fā)光檢測需要根據(jù)熒光素表達標(biāo)定**大小,,受**生長所發(fā)生的**內(nèi)部壞死影響,,生物自發(fā)光并不能很***的評價**生長,在抗**藥效評價有較高要求的實驗中,,建議使用小動物核磁成像系統(tǒng)檢測**生長,。D-熒光素也常用于體外研究,包括熒光素酶和ATP水平分析,;報告基因分析,;高通量測序和各種污染檢測。目前有三種產(chǎn)品形式:D-熒光素(游離酸),,D-熒光素鹽(鈉鹽和鉀鹽),。主要差別在于溶解特性:前者的水溶性以及緩沖體系的溶解性都較弱,除非溶于弱堿如低濃度NaOH和KOH溶液,??扇苡诩状己虳MSO。 熒光素-6-異硫氰酸酯D-熒光素鉀鹽如何選擇合作公司,?
2)按10μL/g體重的濃度向每支小鼠注射相應(yīng)量的15mg/mL熒光素溶液,;3)腹腔注射10-15min后進行成像分析。(對每只動物模型做熒光素動力學(xué)研究以確定峰值信號獲取時間)Firefly,freeacid/D-螢火蟲熒光素分子式:C11H8N2O3S2分子量:g/mol外觀:白色至淺黃色粉末溶解:,,形成近乎無色至淺黃色的清夜保存:-15°C避光應(yīng)用:1)活細胞,、組織或生物體內(nèi)luc標(biāo)記基因和熒光素酶-融合基因體內(nèi)/體外表達的成像分析;2)***用于報告基因分析,免疫分析和ATP熒光衛(wèi)生監(jiān)測分析D-熒光素也常用于體外研究,,包括熒光素酶和ATP水平分析,;報告基因分析;高通量測序和各種污染檢測,。目前有三種產(chǎn)品形式:D-熒光素(游離酸),,D-熒光素鹽(鈉鹽和鉀鹽)。主要差別在于溶解特性:前者的水溶性以及緩沖體系的溶解性都較弱,,除非溶于弱堿如低濃度NaOH和KOH溶液,,可溶于甲醇和DMSO;后者易溶于水或緩沖液中,,使用方便,溶劑d0926aa8-0148-40da-80fa-f65性,,特別適合體內(nèi)實驗,。配成溶液后的這三種產(chǎn)品,在絕大多數(shù)的應(yīng)用上都沒有實質(zhì)性的差別,。相關(guān)列表魯米諾/3-氨基苯二甲酰肼/發(fā)光氨異魯米諾/4-氨基鄰苯二甲酰肼吖啶酯DMAE-NHS吖啶酰肼NSP-SA-ADH吖啶酯ME-DMAE-NHS哌嗪-N,N'-二,。
請穿實驗服并戴一次性手套操作。8)本產(chǎn)品只作科研用途,!D-熒光素鉀鹽是熒光素酶的水溶性底物,,存在于多種發(fā)光生物體中。在ATP和熒光素酶的催化作用下,,D-熒光素鉀被氧化,,產(chǎn)生藍綠色的光(560nm),當(dāng)?shù)孜镞^量時,,產(chǎn)生的Chemicalbook光量子數(shù)與熒光素酶的濃度呈正相關(guān),。編碼熒光素酶的Luc基因是植物、哺乳動物細胞的常用報告基因,。由于沒有背景干擾,,因此可以很容易地檢測出低至。用途D-熒光素鉀鹽是一類在生物體中發(fā)現(xiàn)的能引起生物發(fā)光的雜環(huán)化合物,,如螢火蟲,。在ATP存在下,螢光素酶將其氧化脫羧后會發(fā)光,?;瘜W(xué)研究中可用于熒光素酶的基板。生物活性D-Luciferin是螢火蟲熒光素酶的底物,。體外研究D-luciferinisthenaturalsubstrateoftheenzymeluciferase(Luc),μM.體內(nèi)研究Bioluminescenceimaging(BLI)usingthefireflyluciferase(Fluc)(5,10,15,and20min)μLofD-luciferin(intraperitoneallyorintravenously)stocksolutionpergramofbodyweight:normally~200μLfora20gmouseforastandard150mg/(eitherPotassiumorSodiumSalt)atroomtemperatureanddissolveindPBS,。南京地區(qū)有哪些做D-熒光素鉀鹽測試的公司。
短期保存:4℃干燥避光長期保存:-20℃干燥避光母液保存:-20℃避光有效期長期保存:有效期一年工作液:先用現(xiàn)配使用方法1.體外生物發(fā)光檢測1)用無菌蒸餾水溶解D-熒光素鉀鹽,配制成30mg/mL的儲存液(100-200×),,混勻,。立即使用,或分裝于-20℃避光保存,,避免反復(fù)凍融,。2)用預(yù)熱好的組織培養(yǎng)基將儲存液稀釋至mg/mL的工作液濃度。3)去除細胞培養(yǎng)基,。作者:思存鏈接:zhuanlan./p/來源:知乎著作權(quán)歸作者所有,。商業(yè)轉(zhuǎn)載請聯(lián)系作者獲得授權(quán),非商業(yè)轉(zhuǎn)載請注明出處,。高斯熒光素酶近年來,,其他熒光素酶(例如高斯熒光素酶)的使用有所增加,因為這些報告基因較小,,并且不需要ATP的存在,。高斯熒光素酶是一種20kD的蛋白質(zhì),可通過氧氣催化腔腸素氧化,,產(chǎn)生光,。來自于海洋足類高斯氏菌的生物發(fā)光酶在表達后可有效地從哺乳動物細胞中分泌出來。Amplite?高斯熒光素酶報告基因檢測試劑盒(#AAT-12530)使用專有的發(fā)光配方來定量細胞培養(yǎng)基中的熒光素酶活性,。當(dāng)該試劑與高斯熒光素酶相互作用時,,產(chǎn)sheng發(fā)光產(chǎn)物,該發(fā)光產(chǎn)物提供強發(fā)光,。Amplite高斯熒光素酶報告基因測定試劑盒特點:提供了與HTS液體處理儀器兼容的所有基本組件它們具有高靈敏度,。做D-熒光素鉀鹽測試找哪家公司?thermo 熒光二抗
做D-熒光素鉀鹽測試哪個公司好,?熒光增白劑ob-3
隨著綜合國力的強盛,,中國貿(mào)易行業(yè)繁榮發(fā)展,不但成為國民經(jīng)濟戰(zhàn)略性支柱產(chǎn)業(yè),,也成為了滿足我們對美好生活向往的幸福產(chǎn)業(yè)和詩與遠方,。新時代里,一系列地區(qū)重大戰(zhàn)略的推動為貿(mào)易行發(fā)展開辟了新路徑,。商務(wù)服務(wù)的發(fā)展在一定程度上可以解決企業(yè)發(fā)展痛點,,能夠創(chuàng)造出良好的創(chuàng)業(yè)土壤,讓企業(yè)專注于重點主營業(yè)務(wù),,剝離繁瑣的事務(wù)運轉(zhuǎn),。商務(wù)服務(wù)也屬于共享經(jīng)濟的范疇,可以使企業(yè)共享資源和服務(wù),,降低成本,。以會展平臺聚合行業(yè)優(yōu)異人才,,實現(xiàn)服務(wù)資源的對接融合,規(guī)范商務(wù)服務(wù)市場,,統(tǒng)一社會對商務(wù)服務(wù)行業(yè)的認知,,沖破現(xiàn)有行業(yè)邊界,重新定義商務(wù)服務(wù)行業(yè)格局,。古人云“讀萬卷書,,行萬里路”,美麗的風(fēng)景和精彩的人生都是在路上,。貿(mào)易的不斷發(fā)展,,才能讓人更好地感知世界、認識自己,。擁抱多彩的人類文明,、多元的民族智慧、瑰麗的自然景觀,,人生的閱歷和視野則遼闊寬廣,。熒光增白劑ob-3