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上海螢火蟲(chóng)熒光素酶D-熒光素鉀鹽溶液怎么保存

來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2022-07-06

    酸化后消失,,中和或堿化后又出現(xiàn),,微溶于乙醇;比較大吸收波長(zhǎng)(水),。中文名稱:熒光素鈉中文別名:熒光黃鈉,;熒光橙紅鈉;熒光素二鈉英文名FLUORESCEINSODIUM等級(jí):BS物性數(shù)據(jù)編輯播報(bào)1.性狀:未確定2.密度(g/cm3,25/4℃):.相對(duì)蒸汽密度(g/cm3,空氣=1):未確定4.熔點(diǎn)(oC):3205.沸點(diǎn)(oC,常壓):未確定6.沸點(diǎn)(oC,8kPa):未確定7.折射率:未確定8.閃點(diǎn)(oC):未確定9.比旋光度(o):未確定10.自燃點(diǎn)或引燃溫度(oC):未確定11.蒸氣壓(kPa,25oC):未確定12.飽和蒸氣壓(kPa,60oC):未確定13.燃燒熱(KJ/mol):未確定14.臨界溫度(oC):未確定15.臨界壓力(KPa):未確定16.油水(辛醇/水)分配系數(shù)的對(duì)數(shù)值:未確定17.上限(%,V/V):未確定18.下限(%,V/V):未確定19.溶解性:溶于水及乙醇,,帶有強(qiáng)的綠色熒光,,水溶性好。D-熒光素鉀鹽運(yùn)輸條件是4℃冰袋運(yùn)輸,。上海螢火蟲(chóng)熒光素酶D-熒光素鉀鹽溶液怎么保存

    tetrametrylrhodarnineisothiocyante,,TRITC)是一種紫紅色粉末,較穩(wěn)定,,是羅達(dá)明(rhodamine)的衍生物,。更大吸收光譜550urn,更大發(fā)射光譜620urn呈橙紅色熒光,,與FITC發(fā)射的黃綠色熒光對(duì)比鮮明,,常用于雙標(biāo)記染色。按照抗原抗體反應(yīng)的結(jié)合步聚,,免疫熒光法可分為以下三種,。1.直接法用熒光素標(biāo)記的特異性抗體直接與相應(yīng)的抗原結(jié)合,以檢查出相應(yīng)的抗原成分,。2.間接法先用特異性抗體與相應(yīng)的抗原結(jié)合,,洗去未結(jié)合的抗體,,再用熒光素標(biāo)記的抗特異性抗體(間接熒光抗體)與特異性抗體相結(jié)合,形成抗原一特異性抗體一間接熒光抗體的復(fù)合物,。在此復(fù)合物上帶有比直接法更多的熒光抗體,,所以,此法較直接法靈敏,。3.補(bǔ)體法用特異性的抗體和補(bǔ)體的混合液與標(biāo)本上的抗原反應(yīng),,補(bǔ)體就結(jié)合在抗原抗體復(fù)合物上,再用抗補(bǔ)體的熒光抗體與之相結(jié)合,,就形成了抗原一抗體一補(bǔ)體一抗補(bǔ)體熒光抗體的復(fù)合物,。熒光顯微鏡下所見(jiàn)到的發(fā)出熒光的部分即是抗原所在的部位。補(bǔ)體法具有敏感性強(qiáng)的優(yōu)勢(shì),,同時(shí)適用于各種不同種屬來(lái)源的特異性抗體的標(biāo)記顯示,,在各種不同種屬動(dòng)物抗體的檢測(cè)上為更常用的技術(shù)方法熒光素酶(英文名稱:Luciferase)是自然界中能夠產(chǎn)生生物熒光的酶的統(tǒng)稱。揚(yáng)州熒光素酶D-熒光素鉀鹽使用說(shuō)明D-熒光素鉀鹽測(cè)試怎么樣,?

    但是上一次底物的殘留曲線可以知道,,可以控制對(duì)下一次觀察結(jié)果的影響。儲(chǔ)存與運(yùn)輸一般放在-20℃的冰箱即可,,半年以上不使用放在-80℃的冰箱,,溶解配制后放在4℃冰箱,短期運(yùn)輸放在4℃環(huán)境,。建議現(xiàn)用現(xiàn)配,,D熒光素鉀鹽在液體中容易降解。應(yīng)用領(lǐng)域腫大的瘤,,干細(xì)胞,,藥物開(kāi)發(fā),基因治的好,,轉(zhuǎn)基因小鼠,,免疫學(xué)等等。英文名字firefly.中文名稱熒光素酶,,重組熒光素貨號(hào)AAT-12500規(guī)格¥1430/1mL背景資料:熒光素酶是來(lái)自北美螢火蟲(chóng)(Photinuspyralis)中熒光素酶基因的克隆和重組表達(dá),,它為實(shí)驗(yàn)研究或者用生物熒光試劑制備試劑盒檢測(cè)ATP或者熒光素底物提供了可信度和可靠性。這種重組酶可以克服由天然資源純化獲得熒光素酶時(shí)受季節(jié)和地方區(qū)域變化的影響,。熒光素酶可以催化luciferin氧化成oxyluciferin,,在luciferin氧化的過(guò)程中,會(huì)發(fā)出生物熒光(bioluminescence),,可通過(guò)熒光測(cè)定儀設(shè)備測(cè)定luciferin氧化過(guò)程中釋放的生物熒光,,常應(yīng)用于啟動(dòng)子轉(zhuǎn)錄活性調(diào)控及miRNA靶基因驗(yàn)證等方向研究。產(chǎn)品形式提供的熒光素酶*重組熒光素*產(chǎn)品為溶液形式,。作者:思存鏈接:zhuanlan./p/來(lái)源:知乎著作權(quán)歸作者所有,。商業(yè)轉(zhuǎn)載請(qǐng)聯(lián)系作者獲得授權(quán),非商業(yè)轉(zhuǎn)載請(qǐng)注明出處,。

    luciferin)的分子結(jié)構(gòu)如右圖所示:,,在氧氣、ATP存在的條件下和熒光素酶發(fā)生反應(yīng),,生成氧化熒光素(oxyluciferin),,分子結(jié)構(gòu)如右圖所示,并產(chǎn)生長(zhǎng)發(fā)生光現(xiàn)象,。但是該底物熒光素以前大多依賴進(jìn)口,,產(chǎn)品價(jià)格昂貴。而且由于該產(chǎn)品容易降解,、受潮影響使用效果,。所以,需要國(guó)產(chǎn)化的方式生產(chǎn),,一方面可以降低成本,,一方面可以增強(qiáng)使用效果。作者:科遠(yuǎn)迪鏈接:zhuanlan./p/來(lái)源:知乎著作權(quán)歸作者所有,。商業(yè)轉(zhuǎn)載請(qǐng)聯(lián)系作者獲得授權(quán),,非商業(yè)轉(zhuǎn)載請(qǐng)注明出處。D-luciferin,,potassiumsalt熒光素產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)發(fā)光原理哺乳動(dòng)物生物發(fā)光,,一般是將Fireflyluciferase基因(由554個(gè)氨基酸構(gòu)成,約50KD)即熒光素酶基因整合到預(yù)期觀察的細(xì)胞染色體DNA上以表達(dá)熒光素酶,,培養(yǎng)出能穩(wěn)定表達(dá)熒光素酶的細(xì)胞株,,當(dāng)細(xì)胞分裂、轉(zhuǎn)移,、分化時(shí),熒光素酶也會(huì)得到持續(xù)穩(wěn)定的表達(dá),。基因,、細(xì)胞和活題動(dòng)物都可被熒光素酶基因標(biāo)記,。將標(biāo)記好的細(xì)胞接種到實(shí)驗(yàn)動(dòng)物體內(nèi)后,當(dāng)外源(腹腔或靜脈注射)給予其底物熒光素(D-luciferin,,potassiumsalt,,以下均簡(jiǎn)稱熒光素),即可在幾分鐘內(nèi)產(chǎn)生長(zhǎng)發(fā)生光現(xiàn)象,。所發(fā)的光波長(zhǎng)在540-600nm,。這種酶在ATP,氧存在的條件下,,催化熒光素的氧化反應(yīng)才可以發(fā)光,。D-熒光素有時(shí)候也叫游離酸,。

    螢火蟲(chóng)熒光素酶(Luciferase)是一種常用的信號(hào)分子,可以用來(lái)標(biāo)記腫瘤細(xì)胞.一.細(xì)胞方法將帶有熒光素luc轉(zhuǎn)酶報(bào)告基因的真核表達(dá)重組質(zhì)粒pRc/CMV2-7,,利用G418篩選,,獲得穩(wěn)染人乳腺哎細(xì)胞株MCF-7-luc,并在穩(wěn)定表達(dá)熒光素酶基因的細(xì)胞克隆MCF-7體外評(píng)價(jià)其發(fā)光能力,。通過(guò)建立裸鼠移植瘤模型,,利用活題生物發(fā)光成像系統(tǒng)檢測(cè)腫大的瘤生長(zhǎng)及轉(zhuǎn)移情況,為下一步監(jiān)測(cè)裸鼠移植瘤對(duì)藥物作用的變化情從而為分析藥物對(duì)腫大的瘤的治的好效果提供理想的狀況.G418篩選濃度的確定:37℃細(xì)胞培養(yǎng)箱中常培養(yǎng),G418按0,、200,、400、600,、800,、1000μg/ml設(shè)置6個(gè)濃度梯度。在細(xì)胞接種24h后,,加入6孔板中,,每個(gè)濃度設(shè)2個(gè)孔在10~14d內(nèi)全部死亡。每天觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,,死亡更低的G418濃度,,即為篩選質(zhì)粒轉(zhuǎn)染克隆MCF-7細(xì)胞的濃度。1)細(xì)胞轉(zhuǎn)染取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的MCF-7細(xì)胞,,將細(xì)胞接種于6孔板內(nèi)待細(xì)胞融合度達(dá)到80%~90%孔培養(yǎng)板中,,TM即可轉(zhuǎn)染。按照Lipofectamine2000試劑盒操作指南進(jìn)行轉(zhuǎn)染,。在250μl無(wú)血清,、無(wú)雙抗的DMEM培培養(yǎng)基中加入luc質(zhì)粒8μg/ml的pRc/CMV2-在250μl無(wú)血清、無(wú)雙抗的DMEM培養(yǎng)基中加入10μlLipofectamineTM2000,,室溫培育5min,。將上述2種稀釋液混勻。D-熒光素鉀鹽測(cè)試比較好的公司有哪幾個(gè),?上海螢火蟲(chóng)熒光素酶D-熒光素鉀鹽溶液怎么保存

D-熒光素鉀鹽檢測(cè)是個(gè)人合作嗎,?上海螢火蟲(chóng)熒光素酶D-熒光素鉀鹽溶液怎么保存

    SodiumSalt/D熒光素鈉鹽分子式:NaC11H7N2O3S2·H2O分子量:g/mol純度:高級(jí)純()應(yīng)用:1)體外化學(xué)發(fā)光分析(invitro);2)***成像實(shí)驗(yàn)(invivo),;3)高靈敏度ATP分析,;步驟:Protocol1:InVitroBioluminescentAssays/體外生物發(fā)光檢測(cè)1)用mL蒸餾水溶解gD-熒光素鈉鹽,配制成100mM的儲(chǔ)存液(200×,,濃度30mg/ml),。混勻后立即使用或分裝后-20℃凍存,。2)用組織培養(yǎng)基1∶200稀釋儲(chǔ)存液,,配置工作液(終濃度150μg/mL),。3)去除培養(yǎng)細(xì)胞的培養(yǎng)基。4)待圖像分析前,,向細(xì)胞內(nèi)添加1×熒光素工作液,,然后進(jìn)行圖像分析。Protocol2:Invivoanalysis/***成像分析1)用無(wú)菌的PBS(w/oMg2+,、Ca2+)配制D-熒光素鈉鹽工作液(15mg/mL),,。一旦使用,,保持冰冷且避光。D-熒光素(D-Luciferin)是熒光素酶(Luciferase)的常用底物,,普遍應(yīng)用于整個(gè)生物技術(shù)領(lǐng)域,,尤其是體內(nèi)***成像技術(shù)。其作用機(jī)制是在ATP和熒光素酶的作用下,,熒光素(底物)能夠被氧化發(fā)光(見(jiàn)下圖),。當(dāng)熒光素過(guò)量時(shí),產(chǎn)生的光量子數(shù)與熒光素酶的濃度呈正相關(guān)性,。將攜帶熒光素酶編碼基因(Luc)的質(zhì)粒轉(zhuǎn)染入細(xì)胞后,,導(dǎo)入研究動(dòng)物如大、小鼠體內(nèi),,之后注入熒光素,,通過(guò)生物發(fā)光成像技術(shù)(BLI)來(lái)檢測(cè)光強(qiáng)度變化。上海螢火蟲(chóng)熒光素酶D-熒光素鉀鹽溶液怎么保存