注意事項1）本品（fireflyluciferin）和甲蟲熒光素（beetleluciferin）,、螢光素鉀鹽只是不同別名,，以CAS號115144-35-9為準,。2）注射方式,、動物類型以及體重等都會影響信號的發(fā)射,，因此建議每次實驗都要做熒光素酶動力學曲線,，確定更佳信號平臺期和更佳的檢測時間,。3）如果要進行ATP的檢測,，盡量避免外源ATP的污染,，如操作時戴手套并使用ATP-free的實驗耗材,，在進行熒光素的溶解時應使用ATP-free無菌水,。4）為避免反復凍融，本產(chǎn)品配制成溶液后建議適當分裝后-20℃或-80℃保存,。為防止氧化,，如有條件，可以對儲存液充氮氣或氬氣后保存,。5）對于檢測靈敏度要求特別高的實驗,，建議使用新鮮配制的本產(chǎn)品。6）在進行D-熒光素鉀鹽的溶解時,，應使用無鈣鎂離子的DPBS,，因鈣鎂離子可能會抑制熒光素酶的活性，此外鎂離子可能會對熒光素的氧化造成影響,，從而影響檢測,。7）為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作,。8）本產(chǎn)品只作科研用途,！南京翌科生物科技有限公司的D-熒光素鉀鹽測試怎么樣？d熒光素鉀鹽

    常見的熒光素酶有兩種,，分別是螢火蟲熒光素酶（fireflyluciferase,，編碼基因是luc）和海腎熒光素酶（Renillaluciferase，編碼基因是Rluc）,，前者的底物是D-Luciferin,，后者的底物是Coelenterazine。它們共同的作用原理是在ATP和熒光素酶的催化作用下,，底物被氧化發(fā)光（不同底物光的顏色和波長不同）,，當?shù)孜镞^量時，產(chǎn)生的光量子數(shù)與熒光素酶的濃度呈正相關性,。***成像技術（opticalinvivoimaging）目前主要采用生物發(fā)光（bioluminescence）與熒光（fluorescence）兩種技術,，生物發(fā)光法是基于熒光素酶能催化底物（D-Luciferin或Coelenterazine）化學發(fā)光的原理，將體外能穩(wěn)定表達熒光素酶的細胞株植入動物體內(nèi),，與后期注射入體內(nèi)的底物發(fā)生反應,，利用光學系統(tǒng)檢測光強度,，間接反映出細胞數(shù)量的變化或細胞的定位,。這項技術已被廣泛應用于多個領域常用的有**或疾病動物模型的建立，并可用于病毒學研究,、siRNA研究,、干細胞研究、蛋白質(zhì)相互作用研究等,。以下主要介紹D-Luciferin（D熒光素）的分類：D-Luciferin：有三種,，分別是D-Luciferin,SodiumSalt/D熒光素鈉鹽,、D-Luciferin,PotassiumSalt/D-熒光素鉀鹽和D-LuciferinFirefly,freeacid/D-螢火蟲熒光素。異硫氰酸熒光素激發(fā)波長D-熒光素鉀鹽使用的注意事項,。

    通過開發(fā)新的方法來改變螢火蟲螢光素酶檢測的信號動力學,，例如Bright-Glo?、Steady-Glo?和Dual-Glo?允許使用微孔板進行檢測,。而“加樣-讀數(shù)”的形式簡化了樣品處理,，并實現(xiàn)了在非常高通量的應用中使用報告基因檢測。[1]隨著UltraGlo?螢光素酶的發(fā)展,，現(xiàn)在已經(jīng)實現(xiàn)了“加樣-讀數(shù)”的ATP檢測方法,。ATP是細胞健康的重要指標，這使得CellTiter-Glo?能有效測定細胞活力,，尤其是在高通量應用中,。該檢測原理還促進了其它ATP檢測平臺的誕生，尤其是用于研究ATP酶（如激酶）的Kinase-Glo?（2004年）和ADP-Glo?（2009年）酶檢測系統(tǒng),。[1]2003Caspase-Glo?3/7檢測除了可以利用螢火蟲螢光素酶反應測定樣品中螢光素酶或ATP的含量外,，還可以檢測底物（luciferin）濃度的變化。通過將luciferin與可被不同酶類識別并產(chǎn)生反應的保護基團偶聯(lián),，能對這些酶進行靈敏的“加樣-讀數(shù)”檢測,，如半胱天冬酶（caspase）和其它蛋白酶。[1]2007One-Glo?螢光素酶檢測系統(tǒng)隨著對螢火蟲螢光素酶化學反應的進一步了解以及Promega生物學家和化學家團隊的建立,，一種改進的luciferin面世,，能更好地用于典型的報告基因檢測應用。這種新的底物——fluoroluciferin,。

    重組為一個明亮的螢光素酶,。這些亞基的親和力可以和SmBiT肽一樣低，從而可以進行蛋白質(zhì)相互作用的測定,；也可以和HiBiT一樣高,，從而允許自我組裝。[1]2017HiBiT?技術基于NanoBiT?系統(tǒng)的研究,，我們將與LgBiT具有極強親和作用的,。HiBiT作為一種易于檢測且具有高靈敏度的蛋白質(zhì)標簽，具有多種功能,，例如當與基于CRIPSR的標簽一起使用時,，可以創(chuàng)建內(nèi)源性報告基因模型。[1]2020Lumit?技術隨著NanoBiT?技術的發(fā)展,，人們認識到可以利用該系統(tǒng)通過結(jié)合免疫測定的組分檢測多種分析物,。由此產(chǎn)生的平臺（現(xiàn)稱為“Lumit”）提供了具有高靈敏度的簡化免疫檢測法。熒光素酶（英文名稱：Luciferase）是自然界中能夠產(chǎn)生生物熒光的酶的統(tǒng)稱,，其中更有代表性的是一種學名為Photinuspyrali'的螢火蟲體內(nèi)的熒光素酶,。在相應化學反應中,，熒光的產(chǎn)生是來自于螢光素的氧化，有些情況下反應體系中也包括三磷酸腺苷（ATP）,。沒有熒光素酶的情況下,，螢光素與氧氣反應的速率非常慢，而鈣離子的存在常?？梢赃M一步加速反應（與肌肉收縮的情況相似）,。熒光生成反應通常分為以下兩步：螢光素+ATP→螢光素化腺苷酸。D-熒光素鉀鹽合作需要交押金嗎,？

    并實現(xiàn)了在非常高通量的應用中使用報告基因檢測,。[1]隨著UltraGlo?螢光素酶的發(fā)展，現(xiàn)在已經(jīng)實現(xiàn)了“加樣-讀數(shù)”的ATP檢測方法,。ATP是細胞健康的重要指標,，這使得CellTiter-Glo?能有效測定細胞活力，尤其是在高通量應用中,。該檢測原理還促進了其它ATP檢測平臺的誕生,，尤其是用于研究ATP酶（如激酶）的Kinase-Glo?（2004年）和ADP-Glo?（2009年）酶檢測系統(tǒng)。[1]2003Caspase-Glo?3/7檢測除了可以利用螢火蟲螢光素酶反應測定樣品中螢光素酶或ATP的含量外,，還可以檢測底物（luciferin）濃度的變化,。通過將luciferin與可被不同酶類識別并產(chǎn)生反應的保護基團偶聯(lián)，能對這些酶進行靈敏的“加樣-讀數(shù)”檢測,，如半胱天冬酶（caspase）和其它蛋白酶,。[1]2007One-Glo?螢光素酶檢測系統(tǒng)隨著對螢火蟲螢光素酶化學反應的進一步了解以及Promega生物學家和化學家團隊的建立，一種改進的luciferin面世,，能更好地用于典型的報告基因檢測應用,。這種新的底物——fluoroluciferin，是新型底物開發(fā)的一個早期實例,。[1]2012NanoLuc?螢光素酶基于定向進化和新型底物開發(fā)方面的經(jīng)驗,，研究人員從蝦的螢光素酶改造設計出一種新型螢光素酶報告基因，即NanoLuc?螢光素酶,。做D-熒光素鉀鹽測試工作液是先用現(xiàn)配,。連云港螢火蟲熒光素酶D-熒光素鉀鹽使用說明

D-熒光素鉀鹽使用濃度怎么樣？d熒光素鉀鹽

    而發(fā)出不同顏色的熒光,。螢火蟲有2000多種,，而叩甲總科（包括螢火蟲、叩頭蟲和相關昆蟲）則有更多,，因此它們的熒光素酶對于分子系統(tǒng)學研究很有用,。目前研究得更透徹的熒光素酶是來自Photinini族螢火蟲中的北美螢火蟲（Photinuspyralis）。熒光素酶報告基因（Luc）是指以熒光素(luciferin)為底物來檢測螢火蟲熒光素酶(fireflyluciferase)活性的一種報告系統(tǒng),。熒光素酶可以催化luciferin氧化oxyluciferin,，在luciferin氧化的過程中，會發(fā)出生物熒光(bioluminescence),。熒光素酶是能夠催化不同底物氧化發(fā)光的一類酶,，哺乳細胞無內(nèi)源性熒光素酶。更常用的熒光素酶有細菌熒光素酶,、螢火蟲熒光素酶和Renilla熒光素酶,。細菌熒光素酶對熱敏感，因此在哺乳細胞的應用中受到限制,。螢火蟲熒光素酶靈敏度高,，檢測線性范圍寬達7～8個數(shù)量級，是更常用于哺乳細胞的報道基因,，用熒光比色計即可檢測酶活性,，因而適用于高通量篩選。隨著具有膜通透性和光裂解作用的螢火蟲熒光素酶的應用,，無需裂解細胞即可檢測酶活性,。Renilla熒光素酶催化腸腔（coelenterazine）氧化，產(chǎn)物可透過生物膜,，可能是更適用于活細胞的報告分子,。將熒光素酶報告基因載體轉(zhuǎn)染到細胞中。d熒光素鉀鹽