D-熒光素鉀鹽是一種化學(xué)品,。中文別名:(S)-4,5-二氫-2-(6-羥基苯并噻唑-2-基)噻唑-4-甲酸鉀鹽英文別名:(S)-4,5-Dihydro-2-(6-hydroxybenzothiazol-2-yl)thiazole-4-carboxylicacidpotassiumsalt產(chǎn)品描述D-熒光素（D-Luciferin）是熒光素酶（Luciferase）的常用底物,，普遍應(yīng)用于整個(gè)生物技術(shù)領(lǐng)域，特別是體內(nèi)活題成像技術(shù),。其作用機(jī)制是在ATP和熒光素酶的作用下,，熒光素底物能夠被氧化發(fā)光,。當(dāng)熒光素過量時(shí)，產(chǎn)生的光量子數(shù)與熒光素酶的濃度呈正相關(guān)性（見下圖）,。將攜帶熒光素酶編碼基因（Luc）的慢病毒轉(zhuǎn)染入細(xì)胞后構(gòu)建穩(wěn)定表達(dá)細(xì)胞株,，構(gòu)建原位腫大的瘤模型，之后注入熒光素底物,，通過IVIS系統(tǒng)來檢測光強(qiáng)度變化,，從而實(shí)時(shí)監(jiān)測疾病發(fā)展?fàn)顟B(tài)或進(jìn)行藥物藥效評(píng)價(jià)等。也可以利用ATP對(duì)此反應(yīng)體系的影響,，根據(jù)生物發(fā)光強(qiáng)度的變化來指示能量或生命體征,。注：在抗腫大的瘤藥物藥效評(píng)價(jià)試驗(yàn)中，由于生物自發(fā)光檢測需要根據(jù)熒光素表達(dá)標(biāo)定腫大的瘤大小,，受腫大的瘤生長所發(fā)生的腫大的瘤內(nèi)部壞死影響,，生物自發(fā)光并不能很覆蓋面廣的評(píng)價(jià)腫大的瘤生長,，在抗腫大的瘤藥效評(píng)價(jià)有較高要求的實(shí)驗(yàn)中，建議使用小動(dòng)物核磁成像系統(tǒng)檢測腫大的瘤生長,。D-熒光素也常用于體外研究,。D-熒光素鉀鹽的發(fā)射波長是多少？氨基熒光素

    Q：熒光素酶作為報(bào)告基因相比于熒光蛋白有哪些優(yōu)勢(shì),？Luciferase的靈敏度相比于GFP提高10-100倍以上,，同時(shí)具有更寬的動(dòng)態(tài)范圍，便于數(shù)值分析比較,，不需要熒光顯微鏡,，而且在***實(shí)驗(yàn)中其熒光穿透性高于EGFP等熒光蛋白，同時(shí)由于沒有內(nèi)源活性,、其本底信號(hào)很低,。而GFP等熒光蛋白相比于熒光素酶的優(yōu)勢(shì)在于可以進(jìn)行失蹤定位，并且其觀測不需裂解細(xì)胞,，方便進(jìn)行適時(shí)觀察,。Q：海腎熒光素酶和螢火蟲熒光素酶相比，相對(duì)活性如何,？在氧,、鎂和ATP的存在下，螢火蟲熒光素酶作用于甲蟲熒光素,，而來源于海洋腔腸（Renillareniformis)的熒光素酶在氧的存在下作用于海腎熒光素,。雙報(bào)告基因技術(shù)（Dual-reporterassays）,結(jié)合了螢火蟲熒光素酶測試和海腎熒光素酶測試。Q：雙熒光素酶報(bào)告基因?qū)嶒?yàn)轉(zhuǎn)染效率很低而且復(fù)孔重復(fù)不出來是什么原因,？轉(zhuǎn)染效率低的話可以從三個(gè)方面改善,，首先要確保細(xì)胞狀態(tài)是好的，通常我們選出處于分裂期的細(xì)胞,，另外陽性對(duì)照您可以選擇過表達(dá)的熒光蛋白質(zhì)粒,，還有就是DNA的質(zhì)量尤為重要，更好是先酶切驗(yàn)證,。這個(gè)實(shí)驗(yàn)檢測結(jié)果很靈敏,，有一定差異是正常的，通常只要確保它在一個(gè)數(shù)量級(jí)之內(nèi)即可,。如果差異超出這個(gè)范圍可以從兩方面改善,，一是記住保持樣本的均一性。南通D-熒光素鉀鹽活題成像原理D-熒光素鉀鹽的激發(fā)波長是多長,？

    SodiumSalt/D熒光素鈉鹽分子式：NaC11H7N2O3S2·H2O分子量：g/mol純度：高級(jí)純（）應(yīng)用：1）體外化學(xué)發(fā)光分析（invitro）,；2）***成像實(shí)驗(yàn)（invivo）；3）高靈敏度ATP分析,；步驟：Protocol1：InVitroBioluminescentAssays/體外生物發(fā)光檢測1）用mL蒸餾水溶解gD-熒光素鈉鹽,，配制成100mM的儲(chǔ)存液（200×,，濃度30mg/ml）?；靹蚝罅⒓词褂没蚍盅b后-20℃凍存,。2）用組織培養(yǎng)基1∶200稀釋儲(chǔ)存液，配置工作液(終濃度150μg/mL),。3）去除培養(yǎng)細(xì)胞的培養(yǎng)基,。4）待圖像分析前，向細(xì)胞內(nèi)添加1×熒光素工作液,，然后進(jìn)行圖像分析,。Protocol2：Invivoanalysis/***成像分析1）用無菌的PBS（w/oMg2+、Ca2+）配制D-熒光素鈉鹽工作液(15mg/mL),，,。一旦使用，保持冰冷且避光,。D-熒光素（D-Luciferin）是熒光素酶（Luciferase）的常用底物,，普遍應(yīng)用于整個(gè)生物技術(shù)領(lǐng)域，尤其是體內(nèi)***成像技術(shù),。其作用機(jī)制是在ATP和熒光素酶的作用下,，熒光素（底物）能夠被氧化發(fā)光（見下圖）,。當(dāng)熒光素過量時(shí)，產(chǎn)生的光量子數(shù)與熒光素酶的濃度呈正相關(guān)性,。將攜帶熒光素酶編碼基因（Luc）的質(zhì)粒轉(zhuǎn)染入細(xì)胞后，導(dǎo)入研究動(dòng)物如大,、小鼠體內(nèi),，之后注入熒光素,，通過生物發(fā)光成像技術(shù)（BLI）來檢測光強(qiáng)度變化。

    4）待圖像分析前,，向細(xì)胞內(nèi)添加熒光素工作液，37℃孵育5-10min,，然后進(jìn)行圖像分析,。2.活ti成像分析1）用無菌的DPBS(w/oMg2+、Ca2+)配制15mg/mL的熒光素的儲(chǔ)存液,，混勻,。2）用μm濾膜過濾除菌,。立即使用,，或分裝于-20℃避光保存,，避免反復(fù)凍融,。3）腹腔注射（.）,，按照150mg/kg的熒光素/體重濃度進(jìn)行注射,，以小鼠為例,，每只小鼠體重假定20g,，每只小鼠用量3mg,；4）注射入體內(nèi)10-15min（待光信號(hào)達(dá)到更強(qiáng)穩(wěn)定平臺(tái)期）后進(jìn)行成像分析。注：建議對(duì)每只動(dòng)物模型都需要建立熒光素酶動(dòng)力學(xué)曲線,，從而確定更高信號(hào)檢測時(shí)間和信號(hào)平臺(tái)期,。注意事項(xiàng)1）本品（fireflyluciferin）和甲蟲熒光素（beetleluciferin）、螢光素鉀鹽只是不同別名,，以CAS號(hào)115144-35-9為準(zhǔn),。2）注射方式、動(dòng)物類型以及體重等都會(huì)影響信號(hào)的發(fā)射,，因此建議每次實(shí)驗(yàn)都要做熒光素酶動(dòng)力學(xué)曲線,，確定更佳信號(hào)平臺(tái)期和更佳的檢測時(shí)間。3）如果要進(jìn)行ATP的檢測,，盡量避免外源ATP的污染,，如操作時(shí)戴手套并使用ATP-free的實(shí)驗(yàn)耗材,，在進(jìn)行熒光素的溶解時(shí)應(yīng)使用ATP-free無菌水,。4）為避免反復(fù)凍融,，本產(chǎn)品配制成溶液后建議適當(dāng)分裝后-20℃或-80℃保存,。為防止氧化,，如有條件，可以對(duì)儲(chǔ)存液充氮?dú)饣驓鍤夂蟊４?。D-熒光素鉀鹽的使用說明。

    故根據(jù)熒光反應(yīng)的情況可以檢測樣品中的微生物含量,。APT熒光檢測儀***用于食品,、飲用水、餐飲器具等的微生物快速檢測,。1970年，科學(xué)家***次測定了螢火蟲熒光素酶的結(jié)構(gòu),；1985年,，科學(xué)家***克隆了一種螢火蟲熒光素酶基因,，并在大腸桿菌中表達(dá),，從而得到了具有活性的熒光素酶,；1986年,，科學(xué)家們測定了該種螢火蟲熒光素酶的基因序列。隨后,，各種螢火蟲熒光素酶基因相繼克隆成功,，熒光素酶的研究和應(yīng)用不斷發(fā)展。目前,，熒光素酶發(fā)光系統(tǒng)的分析技術(shù)已經(jīng)廣泛應(yīng)用到醫(yī)學(xué),、生命科學(xué)、環(huán)境科學(xué),、微生物學(xué)等許多領(lǐng)域,。以醫(yī)學(xué)領(lǐng)域?yàn)槔?*們將熒光素酶基因嵌入到*細(xì)胞中，再注入熒光素,，使*細(xì)胞發(fā)光,，通過探測熒光，就能監(jiān)測*細(xì)胞的擴(kuò)散和轉(zhuǎn)移,。同理,，用這種方法能對(duì)致病基因、***免疫機(jī)制等進(jìn)行研究,，對(duì)某些疾病進(jìn)行診斷,，監(jiān)測疫苗、藥物和治療方法的效力,。D-熒光素鹽也算是鈉鹽和鉀鹽,。宿遷熒光素酶D-熒光素鉀鹽活題成像原理

D-熒光素鉀鹽的活題成像技術(shù),。氨基熒光素

    在食品衛(wèi)生領(lǐng)域由于ATP生物發(fā)光技術(shù)無需培養(yǎng)過程，操作簡便,、靈敏度高,，數(shù)分鐘內(nèi)可得到結(jié)果,，具有其它微生物檢測方法無法比擬的優(yōu)勢(shì),，是目前檢測微生物更快的方法。熒光素是更受歡迎的多功能生物熒光底物之一,。在螢火蟲和幾種其它甲蟲中發(fā)現(xiàn)了螢火蟲熒光酶/熒光素,。通過中間體dioxetanone介導(dǎo)作用，熒光素酶氧化ATPji活的熒光素,。螢火蟲熒光素酶在ATP的輔助下氧化熒光素產(chǎn)生熒光,。這個(gè)反應(yīng)發(fā)生的幾秒內(nèi)在560nm處的化學(xué)熒光達(dá)到更高峰，當(dāng)熒光素和ATP都超量存在的條件下,，發(fā)射光與熒光素酶的活性成比例關(guān)系,。螢火蟲熒光素酶很早以前就用于與抗體結(jié)合形成偶聯(lián)物，作為免疫分析中用熒光素作為底物進(jìn)行檢測的標(biāo)簽,。與HRP和堿性磷酸酶相比,，熒光素酶不耐化學(xué)修飾。這個(gè)酶的一個(gè)特殊的優(yōu)點(diǎn)是,，除了高靈敏度外,，在哺乳動(dòng)物組織中內(nèi)源性熒光素酶的活性很低。熒光素酶另一個(gè)重要的作用是用于衛(wèi)生監(jiān)測,。熒光素酶/熒光素系統(tǒng)可用于檢測污染,，因?yàn)楫a(chǎn)生熒光所需的ATP存在于所以活ti生物中。這種類型的ATP生物熒光特性足以保證對(duì)食品表面的檢測,，無論是在加工制作工程中設(shè)備的污染還是產(chǎn)品的污染都能檢出,。D-熒光素（D-Luciferin）是熒光素酶（Luciferase）的常用底物。氨基熒光素