5）對于檢測靈敏度要求特別高的實驗,，建議使用新鮮配制的本產(chǎn)品。6）在進行D-熒光素鉀鹽的溶解時,，應使用無鈣鎂離子的DPBS,，因鈣鎂離子可能會抑制熒光素酶的活性，此外鎂離子可能會對熒光素的氧化造成影響,，從而影響檢測,。7）為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作,。8）本產(chǎn)品只作科研用途,！熒光素酶(Luciferase)是自然界中能夠催化熒光素產(chǎn)生生物發(fā)光的酶的統(tǒng)稱，其中更有代表性的是來自螢火蟲體內(nèi)(Fire?y)和海腎(Renilla)體內(nèi)的兩類螢光素酶,，分別命名為F-Luciferase和R-Luciferase,，同時近年來研究得較多的來源于高斯氏菌的高斯熒光素酶（Gaussluciferase）,。熒光素酶可以催化luciferin氧化成oxyluciferin，在luciferin氧化的過程中,，會發(fā)出生物熒光(bioluminescence),，可通過熒光測定儀設備測定luciferin氧化過程中釋放的生物熒光，常應用于啟動子轉(zhuǎn)錄活性調(diào)控及miRNA靶基因驗證等方向研究,。螢火蟲螢光素酶更通用和更常見的報告基因是北美螢火蟲photinuspyralis的熒光素酶,，該蛋白質(zhì)不需要翻譯后修飾即可獲得酶活性。高濃度（體內(nèi)）甚至沒有毒性,，可用于原核和真核細胞,。運輸和保存運輸條件：4℃冰袋運輸。D-熒光素鉀鹽使用濃度怎么樣,？連云港熒光素酶D-熒光素鉀鹽活題成像

    短期保存：4℃干燥避光長期保存：-20℃干燥避光母液保存：-20℃避光有效期長期保存：有效期一年工作液：先用現(xiàn)配使用方法1.體外生物發(fā)光檢測1）用無菌蒸餾水溶解D-熒光素鉀鹽,，配制成30mg/mL的儲存液(100-200×)，混勻,。立即使用,，或分裝于-20℃避光保存，避免反復凍融,。2）用預熱好的組織培養(yǎng)基將儲存液稀釋至mg/mL的工作液濃度,。3）去除細胞培養(yǎng)基。作者：思存鏈接：zhuanlan./p/來源：知乎著作權歸作者所有,。商業(yè)轉(zhuǎn)載請聯(lián)系作者獲得授權,，非商業(yè)轉(zhuǎn)載請注明出處。高斯熒光素酶近年來,，其他熒光素酶（例如高斯熒光素酶）的使用有所增加,，因為這些報告基因較小，并且不需要ATP的存在,。高斯熒光素酶是一種20kD的蛋白質(zhì),，可通過氧氣催化腔腸素氧化，產(chǎn)生光,。來自于海洋足類高斯氏菌的生物發(fā)光酶在表達后可有效地從哺乳動物細胞中分泌出來,。Amplite?高斯熒光素酶報告基因檢測試劑盒（#AAT-12530）使用專有的發(fā)光配方來定量細胞培養(yǎng)基中的熒光素酶活性。當該試劑與高斯熒光素酶相互作用時,，產(chǎn)sheng發(fā)光產(chǎn)物,，該發(fā)光產(chǎn)物提供強發(fā)光。Amplite高斯熒光素酶報告基因測定試劑盒特點：提供了與HTS液體處理儀器兼容的所有基本組件它們具有高靈敏度,。宿遷熒光素酶編碼基因D-熒光素鉀鹽使用說明D-熒光素鉀鹽的使用說明,。

    或分裝于-20℃避光保存，避免反復凍融。2）用預熱好的組織培養(yǎng)基將儲存液稀釋至mg/mL的工作液濃度,。3）去除細胞培養(yǎng)基,。4）待圖像分析前，向細胞內(nèi)添加熒光素工作液,，37℃孵育5-10min,，然后進行圖像分析。2.***成像分析1）用無菌的DPBS(w/oMg2+,、Ca2+)配制15mg/mL的熒光素的儲存液,，混勻。2）用μm濾膜過濾除菌,。立即使用,，或分裝于-20℃避光保存，避免反復凍融,。3）腹腔注射（.）,，按照150mg/kg的熒光素/體重濃度進行注射。4）注射入體內(nèi)10-15min（待光信號達到更強穩(wěn)定平臺期）后進行成像分析,。注：建議對每只動物模型都需要建立熒光素酶動力學曲線,，從而確定更高信號檢測時間和信號平臺期。注意事項1）本品（fireflyluciferin）和甲蟲熒光素（beetleluciferin）只只是不同公司在命名上的差異,都是指化合物(S)-2-(6-Hydroxy-2-benzothiazolyl)-2-thiazoline-4-carboxylicacid,。2）注射方式,、動物類型以及體重等都會影響信號的發(fā)射，因此建議每次實驗都要做熒光素酶動力學曲線,，確定更佳信號平臺期和更佳的檢測時間,。3）如果要進行ATP的檢測，盡量避免外源ATP的污染,，如操作時戴手套并使用ATP-free的實驗耗材,，在進行熒光素的溶解時應使用ATP-free無菌水。

    常見的熒光素酶有兩種,，分別是螢火蟲熒光素酶（fireflyluciferase,，編碼基因是luc）和海腎熒光素酶（Renillaluciferase，編碼基因是Rluc）,，前者的底物是D-Luciferin，后者的底物是Coelenterazine,。它們共同的作用原理是在ATP和熒光素酶的催化作用下,，底物被氧化發(fā)光（不同底物光的顏色和波長不同），當?shù)孜镞^量時,，產(chǎn)生的光量子數(shù)與熒光素酶的濃度呈正相關性,。***成像技術（opticalinvivoimaging）目前主要采用生物發(fā)光（bioluminescence）與熒光（fluorescence）兩種技術，生物發(fā)光法是基于熒光素酶能催化底物（D-Luciferin或Coelenterazine）化學發(fā)光的原理,，將體外能穩(wěn)定表達熒光素酶的細胞株植入動物體內(nèi),，與后期注射入體內(nèi)的底物發(fā)生反應,，利用光學系統(tǒng)檢測光強度，間接反映出細胞數(shù)量的變化或細胞的定位,。這項技術已被廣泛應用于多個領域常用的有**或疾病動物模型的建立,，并可用于病毒學研究、siRNA研究,、干細胞研究,、蛋白質(zhì)相互作用研究等。以下主要介紹D-Luciferin（D熒光素）的分類：D-Luciferin：有三種,，分別是D-Luciferin,SodiumSalt/D熒光素鈉鹽,、D-Luciferin,PotassiumSalt/D-熒光素鉀鹽和D-LuciferinFirefly,freeacid/D-螢火蟲熒光素。做D-熒光素鉀鹽測試工作液是先用現(xiàn)配,。

    酸化后消失,，中和或堿化后又出現(xiàn)，微溶于乙醇,；比較大吸收波長（水）,。中文名稱：熒光素鈉中文別名：熒光黃鈉；熒光橙紅鈉,；熒光素二鈉英文名FLUORESCEINSODIUM等級：BS物性數(shù)據(jù)編輯播報1.性狀：未確定2.密度（g/cm3,25/4℃）：.相對蒸汽密度（g/cm3,空氣=1）：未確定4.熔點（oC）：3205.沸點（oC,常壓）：未確定6.沸點（oC,8kPa）：未確定7.折射率：未確定8.閃點（oC）：未確定9.比旋光度（o）：未確定10.自燃點或引燃溫度（oC）：未確定11.蒸氣壓（kPa,25oC）：未確定12.飽和蒸氣壓（kPa,60oC）：未確定13.燃燒熱（KJ/mol）：未確定14.臨界溫度（oC）：未確定15.臨界壓力（KPa）：未確定16.油水（辛醇/水）分配系數(shù)的對數(shù)值：未確定17.上限（%,V/V）：未確定18.下限（%,V/V）：未確定19.溶解性：溶于水及乙醇,，帶有強的綠色熒光，水溶性好,。熒光素酶作用下的D-熒光素鉀鹽,。宿遷熒光素酶編碼基因D-熒光素鉀鹽使用說明

D-熒光素鉀鹽短期保存條件是4℃干燥避光。連云港熒光素酶D-熒光素鉀鹽活題成像

    從而實時監(jiān)測疾病發(fā)展狀態(tài)或藥物的***功效等,。也可以利用ATP對此反應體系的影響,，根據(jù)生物發(fā)光強度的變化來指示能量或生命體征。,PotassiumSalt/D-熒光素鉀鹽分子式：NaC11H7N2O3S2·H2O分子量：g/mol純度：高級純（）應用：1）活細胞,、組織或生物體內(nèi)luc標記基因和熒光素酶-融合基因體內(nèi)/體外表達的成像分析,；2）***用于報告基因分析，免疫分析和ATP熒光衛(wèi)生監(jiān)測分析,；Protocol1：InVitroBioluminescentAssays/體外生物發(fā)光檢測1）配制成100mM的儲存液（200×,，濃度30mg/ml）?；靹蚝罅⒓词褂没蚍盅b后-20℃凍存,。2）用預熱好的組織培養(yǎng)基1∶200稀釋儲存液，配制工作液(終濃度150μg/mL),。3）去除培養(yǎng)細胞的培養(yǎng)基直至無殘留,。4）圖像分析前立即向細胞內(nèi)添加1×熒光素工作液，然后進行圖像分析（或者細胞放在37℃短時間孵育后檢測可增強信號）。D-熒光素鉀鹽注：螢光素,、螢光素酶,、螢火蟲螢光素酶、螢光素鉀鹽,、螢光素鉀鹽鹽也經(jīng)常被稱作熒光素,、熒光素酶、螢火蟲熒光素酶,、熒光素鉀鹽,、熒光素鈉鹽。Protocol2：Invivoanalysisinmice/小鼠***成像分析1）用無菌的DPBS（w/oMg2+,、Ca2+）配制D-熒光素鉀鹽溶液(15mg/mL),，。一旦使用,，保持冰冷且避光,。連云港熒光素酶D-熒光素鉀鹽活題成像