操作過(guò)程要小心,帶口罩,、手套避免環(huán)境中RNA酶污染樣品,。RNA在水溶液中OD值可能在,但這并不表示RNA不純,,需電泳檢測(cè),。使用時(shí)一定要根據(jù)自己的實(shí)驗(yàn)需要購(gòu)買(mǎi)特定使用提取試劑盒,如果不是特定使用試劑盒,,或許能提出RNA,,但不能確保其質(zhì)量以及完整性,會(huì)影響RT-PCR,、Northernblot,、Dotblot、RealtimeRTPCR,、芯片分析,、polyA篩選、體外翻譯,、RNase保護(hù)分析,、分子克隆等后續(xù)實(shí)驗(yàn)的結(jié)果,。當(dāng)前提取效果好的是RNA提取試劑盒,但其售價(jià)較高,,單次實(shí)驗(yàn)費(fèi)用花費(fèi)太大,,對(duì)精度要求不高的實(shí)驗(yàn)沒(méi)有必要購(gòu)買(mǎi),當(dāng)然還有其它的進(jìn)口試劑盒,,但是均存在價(jià)格高,、訂貨周期長(zhǎng)的問(wèn)題(如果碰上國(guó)內(nèi)無(wú)貨的時(shí)候,要從國(guó)外發(fā)貨,,會(huì)等很長(zhǎng)一段時(shí)間),。普通的提取實(shí)驗(yàn)用國(guó)產(chǎn)的試劑盒就足以,價(jià)格不高,,基本上各地均有現(xiàn)貨,,如天根(國(guó)內(nèi)生產(chǎn)的試劑盒中銷(xiāo)售面比較廣的一種)等,其價(jià)格比進(jìn)口試劑盒要便宜許多,,且效果還不錯(cuò),,性?xún)r(jià)比還可以。RNA試劑盒替代方法編輯當(dāng)然,,就RNA的提取而言,,不一定試劑盒的提取效果就非常好,其實(shí)采用一些經(jīng)典的RNA提取方法,,效果也很不錯(cuò),,如:TRIZOL、EDTA等,,只是試劑盒使用方便,,經(jīng)典的方法操作復(fù)雜一些。詞條標(biāo)簽:科技產(chǎn)品,。RNA如何選擇合作公司,?上海哪家做RNA公司
2)在30-50%細(xì)胞匯合度時(shí)進(jìn)行轉(zhuǎn)染,通?;虺聊治鲋辽?4-72h進(jìn)行,。低密度轉(zhuǎn)染細(xì)胞可使細(xì)胞轉(zhuǎn)染和分析間隔更長(zhǎng),從而使由于細(xì)胞過(guò)度生長(zhǎng)造成的細(xì)胞活性過(guò)度損壞降到更低,。根據(jù)靶基因的特性,,高密度轉(zhuǎn)染的細(xì)胞可能更加適合條件的優(yōu)惠。3)不要在轉(zhuǎn)染時(shí)的培養(yǎng)基中加入***,,因?yàn)檫@將會(huì)將降低細(xì)胞轉(zhuǎn)染的效率和導(dǎo)致細(xì)胞死亡,。4)為了獲得更好的結(jié)果,可以使用invitrogen的Opti-MEM低血清培養(yǎng)基在形成復(fù)合物前稀釋lipofectamineTM2000和siRNA??梢允褂脽晒鈽?biāo)記的siRNA幫助優(yōu)化細(xì)胞系的轉(zhuǎn)染條件,。一旦確定了用來(lái)轉(zhuǎn)染的更佳條件,可以在每一次實(shí)驗(yàn)都包括熒光標(biāo)記siRNA,作為轉(zhuǎn)染效率的指示劑,。本產(chǎn)品只供科研使用,。請(qǐng)勿用于醫(yī)藥、臨床***,、食品及化妝品等用途2.轉(zhuǎn)染步驟以lipofectamineTM2000轉(zhuǎn)染siRNA于24孔板,,轉(zhuǎn)染濃度為50nM為例,其他規(guī)格容器轉(zhuǎn)染見(jiàn)表2,。1)接種細(xì)胞:貼壁細(xì)胞:轉(zhuǎn)染前24h,在400ul無(wú)***培養(yǎng)基中接種個(gè)細(xì)胞,,轉(zhuǎn)染時(shí)細(xì)胞融合度為30-50%。(注:鋪板時(shí)要將細(xì)胞消化完全混勻,,避免細(xì)胞堆積生長(zhǎng),。)懸浮細(xì)胞:轉(zhuǎn)染前24h,在400ul無(wú)***培養(yǎng)基中接種個(gè)細(xì)胞,轉(zhuǎn)染時(shí)細(xì)胞數(shù)量4-8X105/孔,。2)轉(zhuǎn)染步驟:A.用50ulOpti-MEM稀釋siRNA(轉(zhuǎn)染細(xì)胞的終濃度為50nM),。淮安siRNA實(shí)驗(yàn)?zāi)暇┯昊ㄅ_(tái)區(qū)RNA哪家便宜,?
100)無(wú)內(nèi)不利的因素宏量質(zhì)粒提取試劑盒:從200-500ml菌中提取D6228-00Endo-freePlasmidMegaKit(2)D6228-01Endo-freePlasmidMegaKit(5)D6228-02Endo-freePlasmidMegaKit(20)無(wú)內(nèi)不利的因素超大量質(zhì)粒提取試劑盒:從1000-2500ml菌中提取10mg無(wú)內(nèi)毒質(zhì)粒質(zhì)粒D6234-01Endo-freePlasmidGigaKit(2)D6234-02Endo-freePlasmidGigaKit(5)D6234-03Endo-freePlasmidGigaKit(20)BAC/PAC大型質(zhì)粒提取試劑盒:從1-5ml培養(yǎng)過(guò)夜的菌液中提取30ugBAC/PAC/P1等大片段質(zhì)粒D2156-00BAC/PACDNAKit(5)D2156-01BAC/PACDNAKit(50)D2156-02BAC/PACDNAKit(200)BAC/PAC大型質(zhì)粒小提/大提試劑盒D2154-00BAC/PACDNAMaxiKit(2)D2154-01BAC/PACDNAMaxiKit(5)D2154-02BAC/PACDNAMaxiKit(**1056-01EZ-96BAC/PACDNAKit(4x96)D1056-02EZ-96BAC/PACDNAKit(20x96)D1055-01FastfilterBAC/PACDNAKit(4x96)D1055-02FastfilterBAC/PACDNAKit(20x96)D2157-01Endo-freeBAC/PACDNAKit(50)D2157-02Endo-freeBAC/PACDNAKit(200)M-13單鏈DNA純化試劑盒:從1-5ml的噬菌體培養(yǎng)液中提取單鏈?zhǔn)删wDNAD6900-01M13DNAKit(50)D6900-02M13DNAKit(200)D1900-01M13DNAKit,。
5)D3373-01MolluscDNAKit(50)D3373-02MolluscDNAKit(200)昆蟲(chóng)組織DNA小量提取試劑盒:D0926-00InsectDNAKit(5)D0926-01InsectDNAKit(50)D0926-02InsectDNAKit(200)酵母DNA小量提取試劑盒:D3370-00YeastDNAKit(5)D3370-01YeastDNAKit(50)D3370-02YeastDNAKit(200)細(xì)菌DNA提取試劑盒:從3ml細(xì)菌培養(yǎng)物中提高純度的基因組DNAD3350-00BacterialDNAKit(5)D3350-01BacterialDNAKit(50)D3350-02BacterialDNAKit(200)糞便DNA小量提取試劑盒:從各種動(dòng)物的糞便樣品中提取高純度的基因DNAD4015-00StoolDNAKit(5)D4015-01StoolDNAKit(50)D4015-02StoolDNAKit(200)土壤DNA小量提取試劑盒:從土壤樣品中提取基因組DNAD5625-00SoilDNAKit(5)D5625-01SoilDNAKit(50)D5625-02SoilDNAKit(200)水樣DNA提取試劑盒:D5525-00WaterDNAKit(5)D5525-01WaterDNAKit(50)D5525-02WaterDNAKit(200)植物DNA小量提取試劑盒:從小于100mg新鮮(300mg干燥)植物組織中提取高純度的基因組DNAD3485-00PlantDNAKit(5)D3485-01PlantDNAKit(50)D3485-02PlantDNAKit(200)植物DNA中量提取試劑盒:從小于新鮮(500mg干燥)/干燥。南京RNA測(cè)試公司有哪幾家,。
總RNA抽提試劑盒系裂總RNA小量提取試劑盒:從5×106真核細(xì)胞或30mg組織中提取100ug總RNAR6834-00TotalRNAKitI(5)135R6834-01TotalRNAKitI(50)900R6834-02TotalRNAKitI(200)3500總RNA中量提取試劑盒:從1×108個(gè)細(xì)胞/200mg組織中提取1mg總RNAR6664-00TotalRNAKitMidiKit(2)261R6664-01TotalRNAKitMidiKit(10)675R6664-02TotalRNAKitMidiKit(25)1620總RNA大量提取試劑盒:從5×108個(gè)細(xì)胞/1g組織中提取5mg總RNAR6693-01TotalRNAKitMaxiKit(5)675R6693-02TotalRNAKitMaxiKit(20)2520微量RNA提取試劑盒:從微量細(xì)胞或組織中提取總RNAR6831-00MicroEluteTotalRNAKit(5)144R6831-01MicroEluteTotalRNAKit(50)1350R6831-02MicroEluteTotalRNAKit(200)4770HP總RNA抽提試劑盒:從小于5×106真核培養(yǎng)細(xì)胞或小于30mg軟組織中提取高達(dá)100ug總RNAR6812-00HPTotalRNAKit(5)150R6812-01HPTotalRNAKit(50)1200R6812-02HPTotalRNAKit(200)3800組織RNA提取試劑盒:從小于20mg富含纖維的組織(肌肉,、心臟、皮膚等)樣品中提取總RNAR6688-00TissueRNAKit(5)175R6688-01TissueRNAKit(50)1440R6688-02TissueRNAKit,。南京翌科生物科技有限公司RNA測(cè)試價(jià)格?;窗瞞icroRNA
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翌科生物siRNA產(chǎn)品使用說(shuō)明常規(guī)化學(xué)合成siRNA為21~23nt的雙鏈的小分子RNA,產(chǎn)品為凍干粉形式的即用型試劑,。運(yùn)輸保存:產(chǎn)品以?xún)龈煞鄣男问匠剡\(yùn)輸,,收到產(chǎn)品后,請(qǐng)于-20℃~-80℃保存,,凍干粉可以穩(wěn)定保存2年,。使用前瞬時(shí)離心,用RNase-freeH2O或滅菌ddH2O配制成20ul儲(chǔ)存液,,分裝保存,,避免反復(fù)凍融(不超過(guò)5次)。使用須知:1)siRNA呈輕干膜狀附在管壁上,打開(kāi)管子請(qǐng)先離心,,溶解時(shí)請(qǐng)加足量RNase-freeH2O或滅菌ddH2O后蓋上管蓋,,震蕩溶解。2)避免外界因素(包括酶,,極端PH或者溫度條件等)導(dǎo)致產(chǎn)品降解,,所有操作請(qǐng)嚴(yán)格遵循RNA操作規(guī)則。實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,,產(chǎn)品更好干冰上放置,,使用完畢后請(qǐng)于-20℃~-80℃保存。細(xì)胞實(shí)驗(yàn)方法為了降低細(xì)胞密度,,試劑使用量,,轉(zhuǎn)染效率等因素導(dǎo)致的空間差異,保證實(shí)驗(yàn)的可靠性和可重復(fù)性建議:1)轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)中每個(gè)轉(zhuǎn)染樣品至少設(shè)置3個(gè)復(fù)孔,;2)接種細(xì)胞量盡量保持一致,,細(xì)胞在空中呈平均分布。1.轉(zhuǎn)染濃度1)為獲得更佳基因阻斷效果,,每種細(xì)胞系轉(zhuǎn)染siRNA的量需要經(jīng)過(guò)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,。如果您是***次轉(zhuǎn)染細(xì)胞,推薦使用幾個(gè)lipofectamineTM2000的濃度,。并在20-100nM范圍內(nèi)改變siRNA的濃度,,以確定更佳的阻斷效果。高濃度的siRNA可能具有細(xì)胞系依賴(lài)性,。上海哪家做RNA公司