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常州熒光素鉀鹽D-熒光素鉀鹽發(fā)射波長

來源: 發(fā)布時間:2022-08-11

    隨后30年里,,Promega不斷在螢光素酶實驗工具領(lǐng)域推陳出新,,保持技術(shù)帶跑的人的地位,。這里提到的螢光素酶即熒光素酶。1991螢光素酶檢測系統(tǒng)(LAR)Promega公司推出的7b0a8f9c-3a4b-41a1-a7f8-3螢光素酶檢測試劑LuciferaseAssaySystem(LAR),,為靈敏,、非放射性的報告基因檢測拉開了序幕。LAR與螢火蟲螢光素酶(luc)報告基因一起,,為研究人員開始了解基因表達調(diào)控因子提供了首要的工具,。1995Dual-Luciferase?報告基因檢測系統(tǒng)(DLR)DLR是7b0a8f9c-3a4b-41a1-a7f8-3允許在單個樣本中依次檢測兩個報告基因的試劑。通過允許螢光素酶活性的內(nèi)部歸一化,,在提高報告基因檢測的可靠性方面取得了關(guān)鍵進展,。此外,pGL3報告基因載體系列具有改良后的螢火蟲螢光素酶基因,,luc+,。這個改造一種報告基因以實現(xiàn)性能改進的例子后來被進一步應(yīng)用到pGL4和luc2報告基因上,,通過生物信息學(xué)和合成方法,,實現(xiàn)了更大的改進。[1]1999ENLITEN?/UltraGlo?重組螢光素酶Promega公司在早期推出的一種重組螢火蟲螢光素酶(Enliten)基礎(chǔ)上,,改造出了一種稱為UltraGlo?的熱穩(wěn)定性螢光素酶,。UltraGlo?的開發(fā)是在各種檢測和儲藏條件下進行一步法“加樣-讀數(shù)”檢測的關(guān)鍵。此后,。D-熒光素鉀鹽的發(fā)射波長是多少,?常州熒光素鉀鹽D-熒光素鉀鹽發(fā)射波長

    就可以用高敏感度的CCD相機對動物體內(nèi)進行***觀察而不會傷害到動物本身。在螢光素酶中加入正確的螢光素底物就可以放出熒光,,而發(fā)出的光子可以被光敏感元件,,如螢光探測器或改進后的光學(xué)顯微鏡探測到。這就使得對包括***在內(nèi)的多種生命活動進程進行觀察成為可能,。例如,,螢光素酶已經(jīng)被用于商業(yè)化的次世代焦磷酸定序技術(shù),借由dNTP接上DNA鏈時水解放出的焦磷酸,,透過另外一個硫酸鹽腺甘酸轉(zhuǎn)移酶反應(yīng),,螢光素酶能將產(chǎn)物ATP與螢光素轉(zhuǎn)化為冷光,機器借此探測光線并定序,。螢光素酶也可以被用于檢測血庫中所存血液中的紅血球是否開始破裂,。法醫(yī)可以用含有螢光素酶的溶液來檢測犯罪現(xiàn)場中殘留的血跡。醫(yī)院用螢光素酶的發(fā)光來發(fā)現(xiàn)特定的疾病,。螢光素酶還可以作為“報告蛋白”被用于分子生物學(xué)研究中,,例如,用于在轉(zhuǎn)染過螢光素酶的細胞中檢測特定啟動子的轉(zhuǎn)錄情況或用于探測細胞內(nèi)的ATP的水平,;這一技術(shù)被稱為報告基因檢測法或螢光素酶檢測法(LuciferaseAssay),。螢光素酶是一個熱敏感蛋白,,因此經(jīng)常被用于研究蛋白熱變性過程中熱休克蛋白的保護能力。此外,,螢光素酶水母素的發(fā)光強度與環(huán)境中鈣離子濃度相關(guān),,因此可用于檢測生物體內(nèi)的鈣。南通熒光素酶編碼基因D-熒光素鉀鹽溶液怎么保存D-熒光素鉀鹽熒光素酶和ATP水平分析,。

    產(chǎn)品描述D-熒光素(D-Luciferin)是熒光素酶(Luciferase)的常用底物,,普遍應(yīng)用于整個生物技術(shù)領(lǐng)域,特別是體內(nèi)***成像技術(shù),。其作用機制是在ATP和熒光素酶的作用下,,熒光素底物能夠被氧化發(fā)光。當熒光素過量時,,產(chǎn)生的光量子數(shù)與熒光素酶的濃度呈正相關(guān)性(見下圖),。將攜帶熒光素酶編碼基因(Luc)的慢病毒轉(zhuǎn)染入細胞后構(gòu)建穩(wěn)定表達細胞株,構(gòu)建原位**模型,,之后注入熒光素底物,,通過IVIS系統(tǒng)來檢測光強度變化,從而實時監(jiān)測疾病發(fā)展狀態(tài)或進行藥物藥效評價等,。也可以利用ATP對此反應(yīng)體系的影響,,根據(jù)生物發(fā)光強度的變化來指示能量或生命體征。注:在抗**藥物藥效評價試驗中,,由于生物自發(fā)光檢測需要根據(jù)熒光素表達標定**大小,,受**生長所發(fā)生的**內(nèi)部壞死影響,生物自發(fā)光并不能很***的評價**生長,,在抗**藥效評價有較高要求的實驗中,,建議使用小動物核磁成像系統(tǒng)檢測**生長。D-熒光素也常用于體外研究,,包括熒光素酶和ATP水平分析,;報告基因分析;高通量測序和各種污染檢測,。目前有三種產(chǎn)品形式:D-熒光素(游離酸),,D-熒光素鹽(鈉鹽和鉀鹽)。主要差別在于溶解特性:前者的水溶性以及緩沖體系的溶解性都較弱,,除非溶于弱堿如低濃度NaOH和KOH溶液,。可溶于甲醇和DMSO,。

    請穿實驗服并戴一次性手套操作,。8)本產(chǎn)品只作科研用途!D-熒光素鉀鹽是熒光素酶的水溶性底物,,存在于多種發(fā)光生物體中,。在ATP和熒光素酶的催化作用下,,D-熒光素鉀被氧化,產(chǎn)生藍綠色的光(560nm),,當?shù)孜镞^量時,,產(chǎn)生的Chemicalbook光量子數(shù)與熒光素酶的濃度呈正相關(guān)。編碼熒光素酶的Luc基因是植物,、哺乳動物細胞的常用報告基因,。由于沒有背景干擾,因此可以很容易地檢測出低至,。用途D-熒光素鉀鹽是一類在生物體中發(fā)現(xiàn)的能引起生物發(fā)光的雜環(huán)化合物,,如螢火蟲。在ATP存在下,,螢光素酶將其氧化脫羧后會發(fā)光,。化學(xué)研究中可用于熒光素酶的基板,。生物活性D-Luciferin是螢火蟲熒光素酶的底物,。體外研究D-luciferinisthenaturalsubstrateoftheenzymeluciferase(Luc),μM.體內(nèi)研究Bioluminescenceimaging(BLI)usingthefireflyluciferase(Fluc)(5,10,15,and20min)μLofD-luciferin(intraperitoneallyorintravenously)stocksolutionpergramofbodyweight:normally~200μLfora20gmouseforastandard150mg/(eitherPotassiumorSodiumSalt)atroomtemperatureanddissolveindPBS。D-熒光素鉀鹽檢測的安全性如何保障,?

    Q:熒光素酶作為報告基因相比于熒光蛋白有哪些優(yōu)勢,?Luciferase的靈敏度相比于GFP提高10-100倍以上,,同時具有更寬的動態(tài)范圍,,便于數(shù)值分析比較,不需要熒光顯微鏡,,而且在***實驗中其熒光穿透性高于EGFP等熒光蛋白,,同時由于沒有內(nèi)源活性、其本底信號很低,。而GFP等熒光蛋白相比于熒光素酶的優(yōu)勢在于可以進行失蹤定位,,并且其觀測不需裂解細胞,方便進行適時觀察,。Q:海腎熒光素酶和螢火蟲熒光素酶相比,,相對活性如何?在氧,、鎂和ATP的存在下,,螢火蟲熒光素酶作用于甲蟲熒光素,而來源于海洋腔腸(Renillareniformis)的熒光素酶在氧的存在下作用于海腎熒光素,。雙報告基因技術(shù)(Dual-reporterassays),結(jié)合了螢火蟲熒光素酶測試和海腎熒光素酶測試,。Q:雙熒光素酶報告基因?qū)嶒炥D(zhuǎn)染效率很低而且復(fù)孔重復(fù)不出來是什么原因?轉(zhuǎn)染效率低的話可以從三個方面改善,,首先要確保細胞狀態(tài)是好的,,通常我們選出處于分裂期的細胞,,另外陽性對照您可以選擇過表達的熒光蛋白質(zhì)粒,還有就是DNA的質(zhì)量尤為重要,,更好是先酶切驗證,。這個實驗檢測結(jié)果很靈敏,有一定差異是正常的,,通常只要確保它在一個數(shù)量級之內(nèi)即可,。如果差異超出這個范圍可以從兩方面改善,一是記住保持樣本的均一性,。D-熒光素鉀鹽測試怎么樣,?熒光增白劑dt

D-熒光素鉀鹽檢測公司招代理嗎?常州熒光素鉀鹽D-熒光素鉀鹽發(fā)射波長

    熒光素酶(Luciferase)是自然界中能夠催化熒光素產(chǎn)生生物發(fā)光的酶的統(tǒng)稱,,其中**有7a70d2e3-5dda-4f49-84be-c6的是來自螢火蟲體內(nèi)(Fire?y)和海腎(Renilla)體內(nèi)的兩類螢光素酶,,分別命名為F-Luciferase和R-Luciferase,同時近年來研究得較多的來源于高斯氏菌的高斯熒光素酶(Gaussluciferase),。熒光素酶可以催化luciferin氧化成oxyluciferin,,在luciferin氧化的過程中,會發(fā)出生物熒光(bioluminescence),,可通過熒光測定儀設(shè)備測定luciferin氧化過程中釋放的生物熒光,,常應(yīng)用于啟動子轉(zhuǎn)錄活性調(diào)控及miRNA靶基因驗證等方向研究。螢火蟲螢光素酶**通用和**常見的報告基因是北美螢火蟲photinuspyralis的熒光素酶,,該蛋白質(zhì)不需要翻譯后修飾即可獲得酶活性,。高濃度(體內(nèi))甚至沒有毒性,可用于原核和真核細胞,。Amplite?螢光素酶報告基因檢測試劑盒(12518)使用無DTT**配方來定量活細胞和細胞提取物中的螢光素酶活性,。該測定基于螢火蟲熒光素酶,螢火蟲熒光素酶是一種單體的61kD酶,,可催化熒光素的兩步氧化,,在560nm處產(chǎn)生光。Amplite?螢光素酶報告基因檢測試劑盒特點:具有優(yōu)化的“混合讀取”測定規(guī)程,,可與HTS液體處理儀器兼容具有高靈敏度,。常州熒光素鉀鹽D-熒光素鉀鹽發(fā)射波長