而是對于所有能夠產(chǎn)生螢光的底物和其對應(yīng)的酶的統(tǒng)稱,,雖然它們各不相同,。不同的能夠控制發(fā)光的生物體用不同的螢光素酶來催化不同的發(fā)光反應(yīng)。**為人所知的發(fā)光生物是螢火蟲,,而其所采用不同的螢光素酶與其他發(fā)光生物如熒光菇(發(fā)光類臍菇,,Omphalotusolearius)或許多海洋生物都不相同。在螢火蟲中,發(fā)光反應(yīng)所需的氧氣是從被稱為腹部氣管(abdominaltrachea)的管道中輸入,。一些生物,,如叩頭蟲,含有多種不同的螢光素酶,,能夠催化同一螢光素底物,,而發(fā)出不同顏色的螢光。螢火蟲有2000多種,,而叩甲總科(包括螢火蟲,、叩頭蟲和相關(guān)昆蟲)則有更多,因此它們的螢光素酶對于分子系統(tǒng)學(xué)研究很有用,。如今研究得**透徹的螢光素酶是來自Photinini族螢火蟲中的北美螢火蟲(Photinuspyralis),。[1]螢光素酶可以在實驗室中用基因工程的方法生成,并被用于多種不同的實驗,。螢光素酶的基因可以被合成并插入到生物體中或轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,。研究者利用基因工程已經(jīng)使得小鼠、家蠶,、馬鈴薯等一些生物可以合成螢光素酶,。間接體外成像是一種強大的研究手段,可以對整個動物體中的細(xì)胞群落進行分析:將不同類型的細(xì)胞(骨髓干細(xì)胞,、T細(xì)胞等)標(biāo)記上(即表達)螢光素酶,。做D-熒光素鉀鹽測試價格是多少。常州D-熒光素鉀鹽試劑
4)待圖像分析前,,向細(xì)胞內(nèi)添加熒光素工作液,,37℃孵育5-10min,然后進行圖像分析,。2.活ti成像分析1)用無菌的DPBS(w/oMg2+,、Ca2+)配制15mg/mL的熒光素的儲存液,混勻,。2)用μm濾膜過濾除菌,。立即使用,或分裝于-20℃避光保存,,避免反復(fù)凍融,。3)腹腔注射(.),按照150mg/kg的熒光素/體重濃度進行注射,,以小鼠為例,,每只小鼠體重假定20g,每只小鼠用量3mg,;4)注射入體內(nèi)10-15min(待光信號達到更強穩(wěn)定平臺期)后進行成像分析,。注:建議對每只動物模型都需要建立熒光素酶動力學(xué)曲線,,從而確定更高信號檢測時間和信號平臺期。注意事項1)本品(fireflyluciferin)和甲蟲熒光素(beetleluciferin),、螢光素鉀鹽只是不同別名,,以CAS號115144-35-9為準(zhǔn)。2)注射方式,、動物類型以及體重等都會影響信號的發(fā)射,,因此建議每次實驗都要做熒光素酶動力學(xué)曲線,確定更佳信號平臺期和更佳的檢測時間,。3)如果要進行ATP的檢測,盡量避免外源ATP的污染,,如操作時戴手套并使用ATP-free的實驗耗材,,在進行熒光素的溶解時應(yīng)使用ATP-free無菌水。4)為避免反復(fù)凍融,,本產(chǎn)品配制成溶液后建議適當(dāng)分裝后-20℃或-80℃保存,。為防止氧化,如有條件,,可以對儲存液充氮氣或氬氣后保存,。蘇州熒光素酶D-熒光素鉀鹽溶液怎么保存南京靠譜的D-熒光素鉀鹽測試公司。
LAR)Promega公司推出的第一種螢光素酶檢測試劑LuciferaseAssaySystem(LAR),,為靈敏,、非放射性的報告基因檢測拉開了序幕。LAR與螢火蟲螢光素酶(luc)報告基因一起,,為研究人員開始了解基因表達調(diào)控因子提供了首要的工具,。[1]1995Dual-Luciferase?報告基因檢測系統(tǒng)(DLR)DLR是第一種允許在單個樣本中依次檢測兩個報告基因的試劑。通過允許螢光素酶活性的內(nèi)部歸一化,,在提高報告基因檢測的可靠性方面取得了關(guān)鍵進展,。此外,pGL3報告基因載體系列具有改良后的螢火蟲螢光素酶基因,,luc+,。這個改造一種報告基因以實現(xiàn)性能改進的例子后來被進一步應(yīng)用到pGL4和luc2報告基因上,通過生物信息學(xué)和合成方法,,實現(xiàn)了更大的改進,。[1]1999ENLITEN?/UltraGlo?重組螢光素酶Promega公司在早期推出的一種重組螢火蟲螢光素酶(Enliten)基礎(chǔ)上,改造出了一種稱為UltraGlo?的熱穩(wěn)定性螢光素酶,。UltraGlo?的開發(fā)是在各種檢測和儲藏條件下進行一步法“加樣-讀數(shù)”檢測的關(guān)鍵,。此后,通過開發(fā)新的方法來改變螢火蟲螢光素酶檢測的信號動力學(xué),,例如Bright-Glo?,、Steady-Glo?和Dual-Glo?允許使用微孔板進行檢測,。而“加樣-讀數(shù)”的形式簡化了樣品處理。
故根據(jù)熒光反應(yīng)的情況可以檢測樣品中的微生物含量,。APT熒光檢測儀***用于食品,、飲用水、餐飲器具等的微生物快速檢測,。1970年,,科學(xué)家***次測定了螢火蟲熒光素酶的結(jié)構(gòu);1985年,,科學(xué)家***克隆了一種螢火蟲熒光素酶基因,,并在大腸桿菌中表達,從而得到了具有活性的熒光素酶,;1986年,,科學(xué)家們測定了該種螢火蟲熒光素酶的基因序列。隨后,,各種螢火蟲熒光素酶基因相繼克隆成功,,熒光素酶的研究和應(yīng)用不斷發(fā)展。目前,,熒光素酶發(fā)光系統(tǒng)的分析技術(shù)已經(jīng)廣泛應(yīng)用到醫(yī)學(xué),、生命科學(xué)、環(huán)境科學(xué),、微生物學(xué)等許多領(lǐng)域,。以醫(yī)學(xué)領(lǐng)域為例,**們將熒光素酶基因嵌入到*細(xì)胞中,,再注入熒光素,,使*細(xì)胞發(fā)光,通過探測熒光,,就能監(jiān)測*細(xì)胞的擴散和轉(zhuǎn)移,。同理,用這種方法能對致病基因,、***免疫機制等進行研究,,對某些疾病進行診斷,監(jiān)測疫苗,、藥物和治療方法的效力,。D-熒光素鉀鹽母液保存條件是-20℃避光。
5)對于檢測靈敏度要求特別高的實驗,,建議使用新鮮配制的本產(chǎn)品,。6)在進行D-熒光素鉀鹽的溶解時,應(yīng)使用無鈣鎂離子的DPBS,,因鈣鎂離子可能會抑制熒光素酶的活性,,此外鎂離子可能會對熒光素的氧化造成影響,,從而影響檢測。7)為了您的安全和健康,,請穿實驗服并戴一次性手套操作,。8)本產(chǎn)品只作科研用途!熒光素酶(Luciferase)是自然界中能夠催化熒光素產(chǎn)生生物發(fā)光的酶的統(tǒng)稱,,其中更有代表性的是來自螢火蟲體內(nèi)(Fire?y)和海腎(Renilla)體內(nèi)的兩類螢光素酶,,分別命名為F-Luciferase和R-Luciferase,同時近年來研究得較多的來源于高斯氏菌的高斯熒光素酶(Gaussluciferase),。熒光素酶可以催化luciferin氧化成oxyluciferin,,在luciferin氧化的過程中,會發(fā)出生物熒光(bioluminescence),,可通過熒光測定儀設(shè)備測定luciferin氧化過程中釋放的生物熒光,,常應(yīng)用于啟動子轉(zhuǎn)錄活性調(diào)控及miRNA靶基因驗證等方向研究。螢火蟲螢光素酶更通用和更常見的報告基因是北美螢火蟲photinuspyralis的熒光素酶,,該蛋白質(zhì)不需要翻譯后修飾即可獲得酶活性。高濃度(體內(nèi))甚至沒有毒性,,可用于原核和真核細(xì)胞,。運輸和保存運輸條件:4℃冰袋運輸。做D-熒光素鉀鹽的哪家便宜,。鹽城熒光素酶D-熒光素鉀鹽保質(zhì)期
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可以以方便的96孔和384孔微量滴定板形式進行半衰期為一小時的“輝光型”信號在大量檢測板之間提供一致的信號與標(biāo)準(zhǔn)細(xì)胞生長培養(yǎng)基兼容海腎熒光素酶海腎螢光素酶是一種從海桑(Renillareniformis)分離的36kDa蛋白。與螢火蟲熒光素酶相比,,海腎熒光素酶的底物和輔因子要求不同,。海腎熒光素酶在氧氣存在下使用腔腸素,產(chǎn)生480nm的藍光,。與螢火蟲螢光素酶類似,,海腎螢光素酶因其底物要求和光輸出方面的差異而可用于雙重報告檢測。Amplite?海腎熒光素酶報告基因測定Amplite?Renilla螢光素酶報告基因檢測試劑盒(#AAT-12535)提供了一種快速,,靈敏的方法,,可以使用專有的發(fā)光配方在基于細(xì)胞的檢測中檢海腎螢光素酶的活性,與海腎螢光素酶相互作用后,,該試劑產(chǎn)生具有強光的產(chǎn)物,。Amplite?海腎熒光素酶報告基因檢測試劑盒特點:該測定法與標(biāo)準(zhǔn)細(xì)胞生長培養(yǎng)基兼容該試劑盒可以測量野生型和合成hRluc基因的原始表達或基因表達每個試劑盒均包含可以方便96孔和384孔板檢測所必不可少的組分各類螢光素酶底物,輔因子和物理特性:近幾十年來,,腺苷三磷酸(ATP)生物發(fā)光技術(shù)得到了很大的發(fā)展,,已經(jīng)在細(xì)胞增殖、細(xì)胞毒性和生物量計數(shù)等方面廣泛應(yīng)用,。常州D-熒光素鉀鹽試劑