胎牛血清有必要做熱滅活嗎?實(shí)驗(yàn)證明,經(jīng)過正確處理的熱滅活胎牛血清,,對于大多數(shù)的細(xì)胞而言都是不需要的,。經(jīng)此處理過的血清對細(xì)胞的生長只有微小的促進(jìn),或完全沒有任何作用,,甚至可能因?yàn)楦邷靥幚碛绊懥搜宓馁|(zhì)量,,從而造成細(xì)胞生長速率的降低。經(jīng)過熱處理的血清,,沉淀物的形成會明顯的增多,,這些沉淀物在倒置顯微鏡下觀察,像是“小黑點(diǎn)”,,常常會讓研究者誤以為是血清遭受污染,,而把血清放在37℃環(huán)境中,又會使此類沉淀物增加得更多,,這常常會使研究者誤認(rèn)為是微生物的分裂擴(kuò)增,。因此我們建議客戶,若非必須,,可以不需要做熱處理這一步,。如此一來,不但節(jié)省客戶寶貴的時間,,更確保血清的質(zhì)量,。胎牛血清的無菌檢驗(yàn):陰性,;支原體檢驗(yàn): 陰性;細(xì)菌內(nèi)有毒的 ≤5(EU/ml),。鹽城細(xì)胞培養(yǎng)用胎牛血清多少錢
胎牛血清與其它牛血清有何區(qū)別,?胎牛血清(FoetalBovineSerum,簡稱FBS):胎牛血清是指懷孕3-8個月的母牛被屠宰后,,發(fā)育未完全的胎牛心臟密閉穿刺采的血后,,通過一系列工藝處理獲得。此時胎牛血中含有特殊的生長發(fā)育因子,,一旦胚胎發(fā)育完全這些因子會自動消失,。新生牛血清(NewbornCalfSerum,簡稱NBCS):出生14小時內(nèi)未進(jìn)食的新生牛,,通常采用頸動脈采集血液分離得到的血清,。小牛血清(CalfSerum):出生后3天至6月齡小牛動脈采的血分離血清。成年牛血清(AdultBovineSerum,,簡稱ABS)指的是屠宰時收集全血后分離得到血清,。金華進(jìn)口血清胎牛血清提供對維持細(xì)胞指數(shù)生長的,基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒有或量很少的營養(yǎng)物,,以及主要的低分子營養(yǎng)物,。
胎牛血清:胎牛血清是由胎牛血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復(fù)雜的混合物,含有各種血漿蛋白,、多肽,、脂肪、碳水化合物,、生長因子,、無機(jī)物等,其組成成份大部分已知,,但還有一部分尚不清楚,,這些物質(zhì)對促進(jìn)細(xì)胞生長或抑制生長活性是達(dá)到生理平衡的,。其中不含細(xì)胞,、纖維蛋白和凝血因子。胎牛血清在細(xì)胞培養(yǎng)方面通常優(yōu)于其他類型的血清,。由于胎牛從未接觸過外界,,與新生牛和小牛血清相比,抗體含量明顯降低,,故抗體與培養(yǎng)細(xì)胞發(fā)生交叉反應(yīng)的風(fēng)險也較低,,是理想的細(xì)胞生長補(bǔ)充劑。所有胎牛血清均在當(dāng)?shù)孬F醫(yī)部門的監(jiān)督下從注冊的出口屠場采集,,符合國際動物協(xié)會要求,。
胎牛血清融化方法:只要2.5個小時,,溫和有效地加快了水融化的速度,另一方面,,融化過程中可以間斷輕輕搖擺瓶子,,讓蛋白在瓶中混勻。此方法不但節(jié)約了時間,,而且較大限度減少了血清沉淀出現(xiàn)的幾率,。血清融化過程中,,蛋白質(zhì)會比水先融化,。冰塊底部亮亮的細(xì)絲就是融化中的蛋白,血清在培養(yǎng)細(xì)胞中,,比較重要的是利用它的活性的因子,,因此,融化過程中較大限度地保留因子的活性,,就變得非常重要,。回憶一下,,細(xì)胞復(fù)蘇時,,要保持細(xì)胞的活性,我們是要遵循“快融”原則還是“慢融”原則呢,?快融,!血清同樣如此!三步法需要兩個半小時,,4℃過夜需要大約10個小時(冰箱一般設(shè)2-8℃,,所以各實(shí)驗(yàn)室融化時間會稍有出入)。血清的保存應(yīng)該注意:需要長期保存的血清必須儲存于-20℃-70℃低溫冰箱中,。
胎牛血清:胎牛血清(FBS),,胎牛血清是一種性狀、外觀淺黃色澄清,、無溶血,、無異物稍粘稠液體。胎牛血清應(yīng)取自剖腹產(chǎn)的胎牛,;新牛血清取自出生24小時之內(nèi)的新生牛,;小牛血清取自出生10-30天的小牛。1,、性狀、外觀淺黃色澄清,、無溶血,、無異物稍粘稠液體,。2、蛋白質(zhì)含量3.5%~5.0%(w/v),。3、血紅蛋白含量≤0.02%(w/v),。4、無菌檢驗(yàn)陰性,。5,、支原體檢驗(yàn)陰性,。6,、細(xì)菌內(nèi)的毒性≤5(EU/ml)。7,、牛腹瀉病毒陰性。8,、大腸桿菌噬菌體陰性,。9、支持細(xì)胞增殖(Sp2/0-Ag14)生長曲線(接種濃度)較大增殖濃度≥2.5×106個/ml,,細(xì)胞倍增時間≤15h克隆率≥85%,。胎牛血清在水浴過程中,胎牛血清的液面要完全浸在水中,。常州標(biāo)準(zhǔn)胎牛血清價格
我們常會看到胎牛血清的標(biāo)注上有對產(chǎn)品滅活也有沒有滅活的,。鹽城細(xì)胞培養(yǎng)用胎牛血清多少錢
胎牛血清:在細(xì)胞培養(yǎng)過程,質(zhì)量粗糙的FBS可能會導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)生長速度緩慢,、不貼壁,、容易老化等現(xiàn)象,從而導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)受阻,。經(jīng)過質(zhì)量驗(yàn)證的FBS,,則可以十分確定這款FBS對哪些細(xì)胞具有良好的培養(yǎng)效果,進(jìn)而判斷其能否把自己的細(xì)胞養(yǎng)好,。對于質(zhì)量好的FBS,,通常采用血清敏感性細(xì)胞(如干細(xì)胞)來進(jìn)行培養(yǎng)驗(yàn)證,若培養(yǎng)效果良好,,則其他常規(guī)細(xì)胞系的培養(yǎng)就更不在話下。FBS作為其他行業(yè)的副產(chǎn)品,,其生產(chǎn)在本質(zhì)上會受到天氣,、食物供應(yīng),、經(jīng)濟(jì)條件和牛群規(guī)模等各種因素的影響,,導(dǎo)致血清的供應(yīng)可能出現(xiàn)貨源,、價格及批次間的不穩(wěn)定性,從而造成實(shí)驗(yàn)的不順甚至實(shí)驗(yàn)失敗,。在過去,,國內(nèi)外已有多個實(shí)驗(yàn)室出現(xiàn)過因血清批間差異大而導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)結(jié)果無法重復(fù)的情況,浪費(fèi)了巨大的時間和金錢成本,。鹽城細(xì)胞培養(yǎng)用胎牛血清多少錢
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