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多克隆抗體免疫動(dòng)物:免疫劑量與注射途徑有關(guān),,一般而言,,靜脈注射劑量大于皮下注射,而皮下注射又比掌內(nèi)和跖內(nèi)皮下注射劑量大,,也可采用淋巴結(jié)內(nèi)注射法。加佐劑比不加佐劑的注射劑量要小,,對(duì)家兔而言,,采用弗氏完全佐劑,則需注射 0.5mg~1mg/kg./次,,如采用弗氏不完全佐劑則注射劑量應(yīng)大10 倍以上,。如要制備高度特異性的抗血清,可選用低劑量抗原短程免疫法。如需要獲得高效價(jià)的抗血清,宜采用大劑量長(zhǎng)程免疫法,。免疫周期長(zhǎng)者,,可少量多次。免疫周期短者,,應(yīng)大量少次,。 兩次注射的間隔時(shí)間應(yīng)長(zhǎng)短適宜,太短起不到再次反應(yīng)的效果太長(zhǎng)則失去了前一次激發(fā)的敏感作用。一般間隔時(shí)間應(yīng)為 5~7 天,,加佐劑者應(yīng)為 2 周左右,。 注射的 Ig 純度高,則一般不易引起過(guò)敏反應(yīng),,如注射血清,,即使是少量,在再次免疫時(shí),,極易引起過(guò)敏反應(yīng),,所以一定要采取措施??贵w也參與到反應(yīng)中,,在過(guò)敏性疾病中發(fā)揮重要作用。安徽自身抗體供應(yīng)商
多克隆抗體免疫動(dòng)物:抗原的免疫劑量是依照給予動(dòng)物的種類,、免疫周期以及所要求的抗體特性等不同而不同,。劑量過(guò)低,不能引起足夠強(qiáng)的免疫刺激,,免疫劑量過(guò)多,,有可能引起免疫耐受。在一定的范圍內(nèi),,抗體的效價(jià)是隨注射劑量的增加而增高,。蛋白質(zhì)抗原的免疫劑量比多糖類抗原寬。一般而言,,小鼠的初次免疫劑量為 50μg~400μg/次,, 大鼠為100μg~1 000μg/次, 兔為 200μg~1 000μg/2次,。加強(qiáng)劑量為初次劑量的 1/5~2/5,。免疫劑量與注射途徑有關(guān),一般而言,,靜脈注射劑量大于皮下注射,,而皮下注射又比掌內(nèi)和跖內(nèi)皮下注射劑量大,也可采用淋巴結(jié)內(nèi)注射法,。四川IgE抗體價(jià)格抗體調(diào)理在自身免疫性疾病等領(lǐng)域顯示出了巨大的潛力,。
抗體可變區(qū)和恒定區(qū):通過(guò)分析不同Ig重鏈和輕鏈的氨基酸序列發(fā)現(xiàn),,重鏈和輕鏈靠近N端的約110個(gè)氨基酸序列變化很大,其他部分氨基酸序列相對(duì)恒定,。因此,,將Ig輕鏈和重鏈中靠近N端氨基酸序列變化較大的區(qū)域稱為可變區(qū)(variable region,V),,分別占重鏈和輕鏈的1/4和1/2,;將靠近C端的氨基酸序列相對(duì)穩(wěn)定的區(qū)域,稱為恒定區(qū)(constant region,,C),,分別占重鏈和輕鏈的3/4和1/2。恒定區(qū) 重鏈和輕鏈的C區(qū)分別稱為CH和CL,。不同型(κ或λ)Ig的CL長(zhǎng)度基本一致,,但是不同類Ig的CH長(zhǎng)度不同,例如IgG,、IgA和IgD包括CH1,、CH2和CH3,而IgM和IgE則包括CH1,、CH2,、CH3和CH4。
抗體特性和功能:IgM占血清Ig總量的5%~10%,,血清濃度約為1mg/ml,。單體IgM以膜結(jié)合型表達(dá)于B細(xì)胞表面,,構(gòu)成B細(xì)胞抗原受體,,只表達(dá)mlgM是未成熟B細(xì)胞的標(biāo)志。分泌型IgM為五聚體,,是分子量很大的Ig,,沉降系數(shù)為19S,稱為巨球蛋白(macroglobulin),,一般不能通過(guò)血管壁,,主要存在于血液中。五聚體IgM含有10個(gè)Fab段,,具有很強(qiáng)的抗原結(jié)合能力,;含有5個(gè)Fc段,比IgG更易啟動(dòng)補(bǔ)體,。天然血型抗體為IgM,,血型不匹配的輸血,可導(dǎo)致嚴(yán)重的溶血反應(yīng),。IgM是個(gè)體發(fā)育過(guò)程中很早合成和分泌的抗體,,在胚胎發(fā)育晚期的胎兒即能產(chǎn)生IgM,,故臍帶血lgM升高提示胎兒有宮內(nèi)傳染(如風(fēng)疹病毒或巨細(xì)胞病毒等傳染)。IgM也是初次體液免疫應(yīng)答中很早出現(xiàn)的抗體,,是機(jī)體抗傳染免疫的“先頭”,;血清中IgM升高,提示新近發(fā)生傳染,,可用于傳染的早期診斷,。中和抗體是一種能夠中和病毒入侵的抗體,對(duì)病毒傳染具有重要意義,。
抗體水解片段:在一定條件下,,Ig分子肽鏈的某些部分易被蛋白酶水解為不同片段。木瓜蛋白酶(papain)和胃蛋白酶(pepsin)是很常用的兩種Ig蛋白水解酶,,并可籍此研究Ig的結(jié)構(gòu)和功能,,分離和純化特定的12多肽片段??贵w的功能與其結(jié)構(gòu)密切相關(guān),。同一抗體的V區(qū)和C區(qū)的氨基酸組成和順序的不同,決定了其功能上的差異,。不同抗體的V區(qū)和C區(qū)在結(jié)構(gòu)變化上具有一定的規(guī)律,,又使得其在功能上存在共性。V區(qū)和C區(qū)的組成和結(jié)構(gòu),,決定了抗體的生物學(xué)功能,。特定的抗體可以用于診斷某些疾病,如用于檢測(cè)乙肝病毒傳染的抗體,。安徽自身抗體供應(yīng)商
抗體也可以通過(guò)血液透析,、免疫球蛋白輸注等方式進(jìn)行passively transfer。安徽自身抗體供應(yīng)商
多克隆抗體主要從動(dòng)物免疫血清,、恢復(fù)期患者血清或免疫接種人群的血清中獲得,。多克隆抗體的優(yōu)勢(shì)是:作用全方面,具有中和抗原,、免疫調(diào)理,、補(bǔ)體依賴的細(xì)胞毒作用(CDC)、ADCC等重要作用,,而且來(lái)源普遍,、制備簡(jiǎn)單。其缺點(diǎn)是:特異性不高,、易發(fā)生交叉反應(yīng),,不易大量制備,因而限制了其應(yīng)用的范圍,。單克隆抗體解決多克隆抗體特異性不高的理想方法是制備識(shí)別單一表位特異性的抗體,。如果能獲得只針對(duì)單一表位的漿細(xì)胞克隆,,并使其在體外擴(kuò)增分泌抗體,就有可能獲得單一表位特異性的抗體,。然而,,漿細(xì)胞在體外的壽命較短,難以培養(yǎng),。為克服這一缺點(diǎn),,Kohler和Milstein將可產(chǎn)生特異性抗體但短壽的B細(xì)胞與不產(chǎn)生抗體但長(zhǎng)壽的骨髓瘤細(xì)胞融合,獲得了可以產(chǎn)生單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞,,從而建立了單克隆抗體制備技術(shù),。安徽自身抗體供應(yīng)商