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抗體可變區(qū)和恒定區(qū):可變區(qū) 重鏈和輕鏈的V區(qū)分別稱為VH和VL,。VH和VL中各含有3個氨基酸組成和排列順序高度可變的區(qū)域,,稱為高變區(qū)(hypervariable region,,HVR)或互補決定區(qū)(complementarity determining region,CDR),, 包括HVR1(CDR1),、HVR2(CDR2)和HVR3(CDR3),其中,,HVR3(CDR3)變化程度更高,。VH的3個高變區(qū)分別位于29~31、49~58和95~102位氨基酸,,而VL的3個高變區(qū)分別位于28~35,、49~56和91~98位氨基酸。VH和VL的3個CDR共同組成Ig的抗原結(jié)合部位(antigen-binding site),決定抗體的特異性,,是抗體識別及結(jié)合抗原的部位,。在V區(qū)中,CDR之外區(qū)域的氨基酸組成和排列順序相對保守,,稱為骨架區(qū)(framework region,,F(xiàn)R)。VH或VL各有四個骨架區(qū),,分別用FR1,、FR2、FR3和FR4表示,??贵w的生產(chǎn)通常需要利用動物模型或體外細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)。浙江異嗜性抗體研發(fā)團隊
抗原上那部分可以引起機體產(chǎn)生抗體的分子結(jié)構(gòu),,叫做抗原決定簇,。一個抗原上可以有好幾個不同的抗原決定簇,因而使機體產(chǎn)生好幾種不同的抗體,,然后產(chǎn)生出抗體是漿細(xì)胞,。只針對一個抗原決定簇起作用的漿細(xì)胞群就是一個純系,純系的英文為Clone,,音譯就是克隆,。由一種克隆產(chǎn)生的特異性抗體叫做單克隆抗體。單克隆抗體能目標(biāo)明確地與單一的特異抗原決定簇結(jié)合,,就象導(dǎo)彈精確地命中目標(biāo)一樣,。另一方面,即使是同一種抗原決定簇,,在機體內(nèi)也可以由好幾種克隆來產(chǎn)生抗體,,形成好幾種單克隆抗體混雜物,稱為多克隆抗體,。杭州自身抗體試劑抗體(antibody)是指機體由于抗原的刺激而產(chǎn)生的具有保護作用的蛋白質(zhì),。
抗體特性和功能:IgE。IgE是正常人血清中含量很少的Ig,,血清濃度極低,,約為5×10-5mg/ml。IgE主要由黏膜下淋巴組織中的漿細(xì)胞分泌,。其重要特征為糖含量較高,。IgE為親細(xì)胞抗體,其CH2和CH3結(jié)構(gòu)域可與肥大細(xì)胞和嗜堿性粒細(xì)胞上的IgE高親和力Fc受體結(jié)合,,引起I型超敏反應(yīng),。此外,,IgE與機體的抗寄生蟲免疫相關(guān)??贵w獨特的生物學(xué)活性使其在疾病的診斷,、免疫防治及基礎(chǔ)研究中發(fā)揮作重要作用。早在19世紀(jì)后期,,人們就開始使用特異性抗原免疫動物制備相應(yīng)的抗血清,。
多克隆抗體佐劑應(yīng)用:1.佐劑的類型 實踐中常應(yīng)用的佐劑有氫氧化鋁膠、明礬,、弗氏佐劑,、脂質(zhì)體和石蠟油等。也有采用結(jié)合桿菌等分枝桿菌,、白喉桿菌以及細(xì)小棒狀桿菌等,。⑴ 弗氏不完全佐劑(incomplete Freund's adjuvant,IFA)羊毛脂 1 份;石蠟油 5 份,;混合,,高壓滅菌后保存。用時加熱融化,,冷卻至 50℃左右,,加抗原進行乳化處理,。⑵ 弗氏完全佐劑(complete Freund's adjuvant,CFA),;弗氏不完全佐劑 10ml;卡介苗 10mg~200mg 卡介苗可 100℃10min 滅活處理,。初次免疫時,,建議用弗氏完全佐劑,以刺激機體產(chǎn)生較強的免疫反應(yīng),。再次免疫時,,一般不用完全佐劑,而采用弗氏不完全佐劑,。但在研究分枝桿菌及相關(guān)抗原時,,一般不用弗氏完全佐劑,以免卡介苗的干擾,??贵w是一類能與抗原特異性結(jié)合的免疫球蛋白。
抗體可變區(qū)和恒定區(qū):通過分析不同Ig重鏈和輕鏈的氨基酸序列發(fā)現(xiàn),,重鏈和輕鏈靠近N端的約110個氨基酸序列變化很大,,其他部分氨基酸序列相對恒定。因此,,將Ig輕鏈和重鏈中靠近N端氨基酸序列變化較大的區(qū)域稱為可變區(qū)(variable region,,V),,分別占重鏈和輕鏈的1/4和1/2;將靠近C端的氨基酸序列相對穩(wěn)定的區(qū)域,,稱為恒定區(qū)(constant region,,C),分別占重鏈和輕鏈的3/4和1/2,。恒定區(qū) 重鏈和輕鏈的C區(qū)分別稱為CH和CL,。不同型(κ或λ)Ig的CL長度基本一致,但是不同類Ig的CH長度不同,,例如IgG,、IgA和IgD包括CH1、CH2和CH3,,而IgM和IgE則包括CH1,、CH2、CH3和CH4,??贵w的半衰期較長,可以在體內(nèi)持續(xù)發(fā)揮作用,,保持免疫防御的持久性,。合肥自身抗體補給公司
按抗原反應(yīng)的凝集狀態(tài)分為完全抗體IgM和不完全抗體IgG等??贵w在醫(yī)療實踐中應(yīng)用甚為普遍,。浙江異嗜性抗體研發(fā)團隊
隨后,經(jīng)1968年和1972年的世界衛(wèi)生組織和國際免疫學(xué)會聯(lián)合會討論決定,,將具有抗體活性或化學(xué)結(jié)構(gòu)與抗體相似的球蛋白統(tǒng)一命名為免疫球蛋白(immunoglobulin,,Ig)。Ig可分為分泌型Ig(secreted Ig,,SIg)和膜型Ig(membrane Ig,,mIg)。SIg主要存在于血液和組織液中,,行使抗體的各種功能,;mIg主要構(gòu)成B細(xì)胞膜表面的抗原受體?;窘Y(jié)構(gòu):經(jīng)x線晶體衍射結(jié)構(gòu)分析發(fā)現(xiàn),,Ig由四條多肽鏈組成,各肽鏈之間由數(shù)量不等的鏈間二硫鍵連接,。Ig可形成“Y”字型結(jié)構(gòu),,稱為Ig單體,是構(gòu)成抗體的基本單位,。浙江異嗜性抗體研發(fā)團隊