x @ -FAgo過濾器（或等效過濾器）建議在保溫瓶和真空源之間使用,，例如o保護真空源免受污染?！駥⒄婵掌窟B接到真空源的真空管●前肢●封閉劑,，例如脫脂/低脂干奶（0.5％以下），酪蛋白,，牛血清白蛋白（BSA）或其他市售的封閉劑,，例如blok * -CH緩沖液（請參閱表5）抗體（單克隆和/或多克隆）,，檢測試劑●洗滌緩沖液：Tris或磷酸鹽緩沖鹽溶液,，pH 7.4，補充了Tween @ 20表面活性劑（TBST）或PBST）●轉移蛋白的印跡吸筆座尺寸比較大印跡尺寸（厘米）多印跡4.5 x8.4小型的7.5 x 8.48.5 x 13.5,。 一般準則●如果蛋白質已經(jīng)轉移到已經(jīng)干燥的PVDF膜上,，請用100％重新潤濕印跡甲醇，然后在組裝前用蒸餾水沖洗,。如果蛋白質已轉移至硝酸纖維素膜干燥后,，用蒸餾水重新益啟生物提供專業(yè)的細胞計數(shù)器。長寧區(qū)MerckAmicon攪拌式過濾器Merck儀器報價

項卡（圖8）創(chuàng)建和啟動自定義協(xié)議。要手動控制流量,，使用“手動模式”標簽選擇所需的井,，壓力，和溫度（如果使用加熱歧管）,。有關自動化協(xié)議或每次融合的手冊,，請參閱CellASICO《ONIX2微流體系統(tǒng)用戶指南》。注意：對于需要快速交換溶液的實驗,，請執(zhí)行以下操作可以應用以下技術：高壓（55.2kPa[8psi）下的流量對于初始過渡,，然后將流量減小到標準壓力長期暴露于6.9-13.8kPa（1-2psi）。 軟件操作下圖顯示了使用ellAsICEONX2軟件進行實驗的兩種模式,，請參閱CllASICEONIX2MicrofuidieSystem用戶有關軟件功能的詳細信息的指南,。圖7.手動模式降低了ONIX2系統(tǒng)的迭代操作?？梢允謩釉O置操作參數(shù),，此模式a5o提供了選項運行簡短的自動印版設置序列，這些序列奉賢區(qū)Merck細胞計數(shù)器Merck儀器銷售上海益啟生物的聯(lián)系電話,。

有關詳細信息,，請參見表2?！癫唤ㄗh在SNAP i.d. @ 2.0系統(tǒng)中剝離印跡,。印跡已被剝離可以從阻塞步驟開始在SNAP i.d.o 2.0系統(tǒng)中對遵循標準協(xié)議的系統(tǒng)進行重新探測?！袢绻恍枰獎冸x（例如,，如果使用其他二抗進行檢測），則可以重新檢測印跡快速清洗后,，立即在SNAP i.d.9 2.0系統(tǒng)中使用,。 優(yōu)化準則抗體已經(jīng)開發(fā)了優(yōu)化指南，以使用戶能夠轉換所用抗體的濃度將標準免疫檢測測定法濃縮至適用于SNAP i.d. @ 2.0系統(tǒng)的濃度,。大多數(shù)用戶會能夠使用相同量的抗體,，但與標準品相比，體積更小,，濃度更高免疫檢測,。但是，當使用擴展抗體方案（第12頁）時,，可以使用相同的方法通常用于標準免疫檢測的一抗的濃度,，體積和時間，其次是較高濃度的二抗,，持續(xù)時間較短,。表1.如何根據(jù)SNAP i.d.9

預先裝有特定于印版的默認設置,。這些設置順序可以編輯如果需要圖8.協(xié)議編輯器模式允許創(chuàng)建和編輯實驗協(xié)議。協(xié)議由一系列環(huán)境組成控制和/或每個融合步驟,?？梢愿鶕?jù)需要添加和更改步驟。準備好協(xié)議后,，可以使用“運行”選項卡來執(zhí)行它,。在下面概述的培養(yǎng)方案示例中，通過將壓力（27.6kPa[4ps]持續(xù)15秒）固定到孔組中,，將ells從8孔加載6和8通過以345kPa（5psi）的流速流動4和5孔5分鐘,，將未捕獲的細胞從腔室中沖洗掉。接下來的孔被灌注從孔1提取30分鐘的基線洗滌液或生長液,。將Cls從孔2暴露于誘導劑1小時,，然后將誘導劑用H2O沖洗掉。從1孔中洗滌或生長溶液30分鐘,。在第3孔中對第二個誘導劑重復上述??兩個步驟,。CAX2-MXT20歧管,，使用setpaintof37吧,。 規(guī)格產(chǎn)品訂購信息，續(xù)培上海益啟生物細胞跨膜電阻儀訂購方便,。

白的免疫檢測：SNAP i.d.“ 2.0系統(tǒng)與SNAP 1.d.系統(tǒng)（首先代）與標準免疫檢測一種,。 SNAPi.d。 2.0蛋白質檢測b,?？煺盏鞍踪|檢測。標準系統(tǒng)Midi印跡系統(tǒng)首先代,，單孔免疫檢測對照,，茴香霉素處理和PDGF處理的3T3小鼠成纖維細胞裂解液（10-0.63 ug）被轉移到Immobilon9-P膜上。印跡被阻止含0.5％的非脂肪干mik（NFDM）,，并在加筋的鹽水中制備含0. 1％Tweene 20表面活性劑（TBST）,，并用主要抗B-Tubulin探測（MAB3408）和次級HRP偶聯(lián)的山羊螞蟻（AP1 24P）在上述條件。將印跡暴露于X射線膠片一分鐘,。圖2. erbB2的免疫檢測：SNAP i.d.9 2.0系統(tǒng)與SNAP i.d.系統(tǒng)（首先代）與標準免疫檢測s,。 S上海益啟細胞跨膜電阻儀訂購方便。奉賢區(qū)Merck細胞計數(shù)器Merck儀器銷售

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盤,，請在步驟5之后插入托盤。有關詳細信息,，請參閱“抗體恢復”部分,。 6.在整個表面上涂適量的一抗吸墨紙架的數(shù)量（對于MultiBlot為2.5毫升,，對于迷你吸墨紙為5毫升，或10 mL用于Midi印跡）,。7.在室溫下孵育10分鐘,。解決方案將是吸收到污點固定器中，表面可能會變干,。重要提示：請勿在吸塵器清潔后再使用真空吸塵器,。孵育10分鐘。8.向下壓框架并施加真空,。等待5-8秒,，直到框架完全是空的。9.在連續(xù)運行真空的情況下,，添加30 mL洗滌緩沖液（MultiBlot為15毫升）,。重復洗滌步驟3次以上（總共4次洗滌）。當框架完全為空時,，將TURN真空關閉,。10.在印跡架的表面上涂適量的二抗（對于多印跡，為2.5 mL,，5毫升用于迷你印跡,，或10毫升用于Midi印跡）。在室溫下孵育10分鐘,，然后長寧區(qū)MerckAmicon攪拌式過濾器Merck儀器報價