什么樣本可以做二代測(cè)序,？①

1、血液樣本

全血：這是最常見的樣本類型之一。血液中含有白細(xì)胞，其細(xì)胞核內(nèi)有完整的基因組DNA,。通過提取白細(xì)胞中的DNA，可以進(jìn)行全基因組測(cè)序,、全外顯子組測(cè)序等,。例如，在遺傳病的基因診斷中,，抽取患者的全血,，提取DNA后，對(duì)與疾病相關(guān)的基因或整個(gè)外顯子組進(jìn)行測(cè)序,，以尋找致病突變,。

血漿/血清：其中含有游離的DNA（cfDNA）和RNA（cfRNA）。在**患者中,，腫瘤細(xì)胞會(huì)釋放其DNA片段進(jìn)入血液循環(huán),，這些cfDNA被稱為循環(huán)**DNA（ctDNA）。通過對(duì)血漿中的ctDNA進(jìn)行測(cè)序,，可以實(shí)現(xiàn)**的早期篩查,、***過程中的動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)等。例如,，對(duì)于肺*患者,，檢測(cè)血漿中的ctDNA來追蹤**的基因突變情況，為靶向***提供依據(jù),。 二代測(cè)序廣泛應(yīng)用于個(gè)性化醫(yī)學(xué),。吉林二代測(cè)序原理

二代測(cè)序技術(shù)在不同人群中的準(zhǔn)確性有何差異③

孕婦及胎兒

優(yōu)勢(shì)：無創(chuàng)產(chǎn)前篩查（NIPT）是二代測(cè)序技術(shù)用于孕期胎兒常見染色體非整倍體篩查的應(yīng)用，對(duì)于唐氏綜合征,、18-三體綜合征,、13-三體綜合征等染色體異常疾病的檢測(cè)準(zhǔn)確率分別能達(dá)到95%、85%,、75%以上,，明顯高于傳統(tǒng)血清學(xué)篩查。

局限性：孕婦外周血中胎兒游離DNA來源于胎盤滋養(yǎng)細(xì)胞,，可能與胎兒實(shí)際情況不一致,，導(dǎo)致假陽性。母親若合并免疫疾病,、凝血功能障礙等,，會(huì)使外周血中游離DNA含量過高,，掩蓋胎兒來源的游離DNA，造成假陰性510. 河南哪里有二代測(cè)序公司二代測(cè)序的優(yōu)勢(shì)是高準(zhǔn)確性,。

一代,、二代、三代測(cè)序的技術(shù)原理和技術(shù)特點(diǎn)分別是什么,？

技術(shù)原理：

一代—雙脫氧終止法

二代—橋式PCR+4色熒光可逆終止+激光掃描成像

三代—PacBio SMRT測(cè)序技術(shù)

技術(shù)特點(diǎn)：

一代—只能檢測(cè)序列一致的PCR產(chǎn)物,；讀長(zhǎng)可以較長(zhǎng)，比如Sanger可以達(dá)到幾百bp,；通量低,，一次只能檢測(cè)少量的序列；成本低,；

二代—可以并行測(cè)序,；需要放大信號(hào)才能檢測(cè)；通量大,，可以產(chǎn)生上G的reads,；讀長(zhǎng)較短，一-般是固定的,，比如50,、100、150,、250等,；成本較高

三代：可以并行測(cè)序；不需要放大信號(hào),，對(duì)單個(gè)分子進(jìn)行測(cè)序,；通量大，比如SequelII平臺(tái),，一張芯片可以有800萬個(gè)ZMW,；讀長(zhǎng)較長(zhǎng)；測(cè)序精確度較差,；成本高,；

二代測(cè)序的建庫步驟③

三、末端修復(fù)和加A尾（以DNA文庫為例）

末端修復(fù)：經(jīng)過片段化后的DNA末端可能是不平齊的,，有5'-突出端或3'-突出端,。末端修復(fù)反應(yīng)可以利用T4DNA聚合酶、Klenow片段等酶,，將這些末端補(bǔ)平，使其成為平末端,。T4DNA聚合酶具有5'→3'聚合酶活性和3'→5'外切酶活性,，在合適的反應(yīng)緩沖液和dNTP（脫氧核糖核苷三磷酸）存在下,，可以將突出的末端補(bǔ)平。

加A尾：在末端修復(fù)后的平末端DNA分子的3'-末端加上一個(gè)A堿基,。這一步是為了后續(xù)連接帶有T-突出端的接頭做準(zhǔn)備,，一般使用Klenow片段（3'→5'外切酶活性缺失）在dATP存在下進(jìn)行加A反應(yīng)，這樣可以使DNA片段能夠高效地與帶有T-突出端的測(cè)序接頭連接,。 二代測(cè)序的工作原理是什么,？

二代測(cè)序技術(shù)的一些***研究進(jìn)展①

疾病診斷與***領(lǐng)域 ：消化系統(tǒng)**標(biāo)志物檢測(cè)：2024 年的**共識(shí)指出，二代測(cè)序（NGS）技術(shù)可同時(shí)檢測(cè)消化系統(tǒng)**中的多種標(biāo)志物,，如錯(cuò)配修復(fù)基因變異,、微衛(wèi)星不穩(wěn)定性（MSI）狀態(tài)、**突變負(fù)荷（TMB）等,，為**的精細(xì)***提供了更***,、準(zhǔn)確的信息。例如,，MSI-H 的實(shí)體瘤患者可使用帕博利珠單抗進(jìn)行***,，而 NGS 技術(shù)能更好地檢測(cè) MSI 狀態(tài)及相關(guān)耐藥機(jī)制。

**液體活檢：通過檢測(cè)血液中的循環(huán)** DNA（ctDNA）等標(biāo)志物,，實(shí)現(xiàn)對(duì)**的早期篩查,、診斷和***監(jiān)測(cè)。NGS 技術(shù)能夠更敏感地檢測(cè)到 ctDNA 中的基因突變和變異,，為**的無創(chuàng)診斷提供了有力支持,。

二代測(cè)序產(chǎn)出的數(shù)據(jù)量有多少？黑龍江二代測(cè)序流程

二代測(cè)序使用的是哪種設(shè)備,？吉林二代測(cè)序原理

二代測(cè)序——蛋白質(zhì)甲基化

概念及位置：蛋白質(zhì)甲基化是指在蛋白質(zhì)的氨基酸殘基上添加甲基基團(tuán),。常見的甲基化修飾位點(diǎn)包括精氨酸（Arg）和賴氨酸（Lys）殘基。

作用

1,、調(diào)節(jié)蛋白質(zhì) - 蛋白質(zhì)相互作用：例如,，組蛋白（染色體的組成成分）的甲基化可以改變?nèi)旧|(zhì)的結(jié)構(gòu)和功能，影響基因的可及性,。當(dāng)組蛋白 H3 的賴氨酸殘基（如 H3K4,、H3K9 等）發(fā)生甲基化時(shí)，會(huì)招募不同的蛋白質(zhì)復(fù)合物,，從而***或抑制基因轉(zhuǎn)錄,。2、調(diào)節(jié)酶的活性：某些酶的活性可以通過蛋白質(zhì)甲基化來調(diào)節(jié),。甲基化可能改變酶的活性中心的結(jié)構(gòu)或者影響其與底物的結(jié)合能力,。

檢測(cè)方法：質(zhì)譜分析：這是一種***用于檢測(cè)蛋白質(zhì)甲基化的方法。它能夠精確地確定蛋白質(zhì)分子的質(zhì)量,，通過比較甲基化和未甲基化蛋白質(zhì)的質(zhì)譜圖,，可以鑒定甲基化位點(diǎn)和修飾程度,。 吉林二代測(cè)序原理

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