自含式壓力蒸汽滅菌生物指示劑關(guān)鍵性能之培養(yǎng)基和菌種 培養(yǎng)基性能包含無菌性能和恢復(fù)生長性能兩方面,，無菌性能不合格可能產(chǎn)生假陽性,，而培養(yǎng)基恢復(fù)生長性能不合格可能導(dǎo)致假陰性，影響滅菌驗證結(jié)果判斷,。無菌性能要求生物指示劑內(nèi)含的培養(yǎng)基培養(yǎng)后仍呈陰性,；恢復(fù)生長性能要求生物指示劑內(nèi)含恢復(fù)培養(yǎng)基經(jīng)過滅菌后接種不大于100cfu的嗜熱脂肪地芽孢桿菌,，置于55℃～60℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)48h，應(yīng)呈陽性結(jié)果,。 國內(nèi)外法規(guī)均指出,，嗜熱脂肪地芽孢桿菌（Geobacillus stearothermophilus）可以用來監(jiān)測壓力蒸汽滅菌效果,。該菌種營養(yǎng)細(xì)胞呈長桿狀、圓端,，多數(shù)為單個,、少數(shù)成對或鏈狀排列，細(xì)胞壁為革蘭陽性結(jié)構(gòu),，芽孢呈橢圓或柱狀,，芽孢無致病性、對壓力蒸汽的抗力非常強,。泰林生物指示劑的芽孢濃度范圍廣,，適應(yīng)不同滅菌條件。生物指示劑耐受性

過氧化氫滅菌生物指示劑的芽孢計數(shù)方法 過氧化氫滅菌生物指示劑芽孢計數(shù)—操作方法?隨機抽取需檢驗批次生物指示劑 4片（支）與相關(guān)物品一并放入安全柜中,，用酒精棉擦拭外表面,，通風(fēng)15min以上，后續(xù)操作如下：特別提醒：不可將指示劑進行紫外照射,，否則會造成計數(shù)結(jié)果偏低?。?！ 01芽孢洗脫 在生物安全柜中,，取出生物指示劑載體,，分別放置于無菌試管中,，向試管中加入 10 mL無菌純化水，于渦旋混勻儀上震蕩2min,，轉(zhuǎn)移至超聲波清洗機中,，設(shè)置頻率為40KHz，處理15min,，將該試管記為10-1,。 特別提醒：不要將多片載體放置到一個容器中進行洗脫，載體相互堆疊可能影響洗脫效果,，造成計數(shù)結(jié)果偏低,。醫(yī)療生物指示劑FDA要求泰林生物指示劑的D值穩(wěn)定，確保在不同滅菌條件下的一致性,。

壓力蒸汽滅菌生物指示劑芽孢計數(shù)之熱激活處理,、梯度稀釋（106濃度）和培養(yǎng)計數(shù) 將上述10-1試管放置于95℃～100℃恒溫水浴鍋中熱激活15min，熱激活結(jié)束后立即放入 0℃～4℃冰水混合浴中迅速冷卻至室溫,。 注：根據(jù)生物指示劑總芽孢數(shù)適當(dāng)調(diào)整稀釋級,，建議最終稀釋芽孢數(shù)在30~300cfu/mL。 取最終稀釋的試管,，用移液槍吸取1mL菌懸液加入90mm的一次性無菌平皿中,，注入15mL ~20mL溫度不超過45 ℃融化的胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基（TSA）,，混勻，每稀釋級至少制備2個平板,。等待平板凝固后,，倒置于恒溫培養(yǎng)箱中55℃~60℃培養(yǎng)24h~48h，記錄各平板的菌落數(shù),，并計算每片（支）生物指示劑的總芽孢數(shù),。

蒸汽滅菌生物指示劑芽孢計數(shù)方法 隨機抽取需檢驗批次生物指示劑4片（支）與相關(guān)物品一并放入生物安全柜中，用酒精棉對指示劑初級包裝進行擦拭,，通風(fēng)15min以上,，后續(xù)操作如下：注意：物料準(zhǔn)備過程中，切勿使用紫外照射生物指示劑,，可能會導(dǎo)致計數(shù)結(jié)果偏低,。 指示劑處理： 將生物指示劑轉(zhuǎn)移至生物安全柜內(nèi)，取出載體,，加入到含3~4顆4mm~6mm玻璃珠和3mL無菌水的試管中,，置于渦旋混勻儀上充分振蕩，將試管中載體打散成纖維狀后,，再加入7mL無菌水,，制成均一的菌懸液，該試管記為10-1（同步平行4片）,。 將懸液式生物指示劑（安瓿管式,，規(guī)格：1mL/支）置于渦旋混勻儀上混勻，用安瓿開啟器打開安瓿管移取0.5mL菌懸液,，置含4.5mL無菌水的試管中混勻,，該試管記為10-1。 將懸液式生物指示劑（直管式,，規(guī)格：0.3mL/支）,，用直管切割器打開置于含9.7mL無菌水的試管中，置于渦旋振蕩儀上混勻,，該試管記為10-1,。壓力蒸汽滅菌定向開發(fā)，適配脈動真空滅菌柜性能驗證,。

環(huán)氧乙烷滅菌生物指示劑芽孢計數(shù)方法之芽孢洗脫及熱激活 在生物安全柜中,，取4片（支）生物指示劑打開，取出載體,，分別放置于含有3-4顆玻璃珠（直徑6mm）的無菌試管中,，向無菌試管中加入3mL的含0.1%聚山梨酯80的無菌純化水，置于渦旋混勻儀上充分振蕩,，將試管中載體打散成纖維裝后,，再中加入7mL含0.1%聚山梨酯80的無菌純化水,，震蕩30s，制成均一的菌懸液,，將該試管記為10-1,。 將水浴鍋加熱至80℃-85℃，取上述試管,，放置于水浴鍋中熱激活10min,，熱激完成后，立即將芽孢懸液轉(zhuǎn)移至0-4℃的冰水浴中冷卻至室溫,。手動接種易污染,？泰林自含式按壓設(shè)計，30秒零接觸完成培養(yǎng),！東北生物指示劑芽孢數(shù)量

蒸汽/EO滅菌后如何快速驗證,？泰林生物指示劑快速出結(jié)果！生物指示劑耐受性

兩類過氧化氫滅菌驗證生物指示劑的選擇之結(jié)構(gòu)選擇 常壓過氧化氫空間滅菌生物指示劑多為片式,，自含式產(chǎn)品目前只有少數(shù)企業(yè)能生產(chǎn),。自含式常壓過氧化氫空間滅菌生物指示劑的載體一般緊靠透氣材料，保證芽孢與過氧化氫充分接觸,。真空滅菌生物指示劑產(chǎn)品形式一般為自含式,，其染菌載體需遠(yuǎn)離透氣材料（通常在底部），增加滅菌的挑戰(zhàn)性,。 自含式過氧化氫滅菌生物指示劑（適用于常壓空間滅菌） 過氧化氫低溫等離子體滅菌生物指示劑（適用于真空滅菌）生物指示劑耐受性

    浙江泰林生物技術(shù)股份有限公司(股票代碼:300813)成立于2002年,，是一家聚焦于生命科學(xué)系統(tǒng)解決方案相關(guān)產(chǎn)業(yè)的企業(yè)集團。公司深耕行業(yè)三十余年,，形成了覆蓋生物安全,、制藥工程、醫(yī)學(xué)工程等領(lǐng)域的多元化業(yè)務(wù)布局,，為生命科學(xué)研究和產(chǎn)業(yè)化提供一站式謝列成套裝備、精密儀器,、配套耗材等產(chǎn)品與服務(wù),，累計服務(wù)國內(nèi)外客戶超5,000家，業(yè)務(wù)覆蓋40余個國家和地區(qū),。泰林生物以“服務(wù)人類健康,，造福天下蒼生”為使命，注重技術(shù)創(chuàng)新與標(biāo)準(zhǔn)化建設(shè),，主導(dǎo)或參與20余項國家標(biāo)準(zhǔn)及行業(yè)規(guī)范的制定,，并多次獲得行業(yè)認(rèn)可，以創(chuàng)新能力和產(chǎn)品質(zhì)量鑄就企業(yè)核心競爭力,，取得客戶的信賴,。