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來源: 發(fā)布時間:2023-07-15

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ELISA間接法細胞實驗外包間接法常用于檢測抗體,,一般的操作步驟為:將已知的抗原固著于塑膠孔盤上,完成后洗去多余的抗原,;加入待測檢體,,檢體中若含有待測的一次抗體,則其會與塑膠孔盤上的抗原進行專一性鍵結(jié),;洗去多余待測檢體,,加入帶有酶的二次抗體,與待測的一次抗體鍵結(jié),;洗去多余未鍵結(jié)二次抗體,,加入酶底物使酶呈色,藉儀器(ELISAreader)測定塑膠盤中的吸光值(OD值),,以評估有色終產(chǎn)物的含量即可測量待測抗體的含量,。江西推薦的細胞實驗外包哪家靠譜醫(yī)學細胞實驗外包對樣品有一定的要求。

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洗滌在ELISA過程中不是反應聚,,但卻是決定實驗成敗的關鍵,。細胞實驗外包洗滌的目的是洗去反應液中沒有與固相抗原或抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應過程中非特異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì),。聚苯乙烯待塑料對蛋白質(zhì)的吸附作用是普遍性的。因此在ELISA測定的反應過程中應盡量避免非特異性吸附,,而在洗滌時又應把這種非特異性吸附的干擾物質(zhì)洗滌下來,。在標本和結(jié)合物的稀釋液和洗滌液中加入聚山梨酯(吐溫,Tween)一類物質(zhì)即右達到此目的,。聚山梨酯是聚氧乙烯去水山梨醇脂肪酸酯,,為非離子型的表面張力物質(zhì),常作為助溶劑,。根據(jù)脂肪酸的種類而對聚山梨酯編號,,結(jié)合月桂酸的為聚山梨酯20,在ELISA中比較為常用,。它的洗滌效果好,,并具有減少非特異性吸附和增強抗原抗體結(jié)合的作用。

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