HE染色原理:易于被堿性或酸性染料著色的性質稱為嗜堿性(basophilia)和嗜酸性(acidophilia);而對堿性染料和酸性染料親和力都比較弱的現(xiàn)象稱為中性(neutrophilia),。構成組織內(nèi)蛋白質的氨基酸的種類很多,,它們有不同的等電點。在普通染色法中,,染色液的酸堿度為pH6左右,,細胞內(nèi)的酸性物質如細胞核的染色質、腺細胞和神經(jīng)細胞內(nèi)的粗面內(nèi)質網(wǎng)及透明軟骨基質等均被堿性染料染色,,這些物質稱為嗜堿性,。而細胞質中的其它蛋白質如紅細胞中的血紅蛋白、嗜酸粒細胞的顆粒及膠原纖維和肌纖維等被酸性染料染色,,這些物質稱為嗜酸型,。如果改變?nèi)旧旱乃釅A度,,pH值升高時,則原來被酸性染料染色的物質可變?yōu)槭葔A性,;pH值降低時,,原來被堿性染料染色的物質則可變?yōu)槭人嵝浴K哉f染色液的pH值可以影響染色的反應,。脫氧核糖核酸(DNA)兩條鏈上的磷酸基向外,,帶負電荷,呈酸性,,很容易與帶正電荷的蘇木精堿性染料以離子鍵結合而被染色,。蘇木精在堿性溶液中呈藍色,所以細胞核被染成藍色,。腦組織HE染色如何觀察,?上海推薦的HE染色公司
HE染色主要是為通細胞及胞核形態(tài)、大小來區(qū)別各種細胞的,,并不是直接通過顏色來區(qū)分的,HE染色細胞壞死的三種改變:(1)細胞核的改變:這是細胞壞死的主要形態(tài)標志,,表現(xiàn)為核濃縮,,核碎裂,核溶解,。(2)細胞質的改變:由于胞質發(fā)生凝固或溶解,,HE染色呈深紅色顆粒狀,如肝細胞壞死出現(xiàn)的嗜酸性小體醫(yī)學|教育網(wǎng)搜集整理,。(3)間質的改變:由于各種溶解酶的作用,,基質崩解、膠原纖維腫脹,、斷裂或液化,,與壞死的細胞融合成一片,呈紅染的顆粒狀無結構物質,。南京英瀚斯生物河南靠譜的HE染色價格HE染色技術幾種常見的染色問題,。
HE染色常見問題:Q3:細胞核染色過淺,顏色暗淡答:切片在蘇木素染液中停留過短,,或蘇木素過度氧化失效,,或分化時間太長。對策:重新染色,。將組織切片放入0.01%氫氧化鈉,、0.5%氨水、飽和的碳酸氫鈉溶液,、乙醇溶液,,每個3-5min即可,接著重新染色??梢赃m當?shù)亟M織的嗜堿性以增強核染色,,如Zenker液固定的切片可放入5%碳酸氫鈉溶液中3h,自來水沖洗5-10min染色,,或Bouin液固定的切片可放入5%碳酸氫鈉溶液中1h,,自來水沖洗10min染色。Q4:細胞核染色過深,,胞漿著藍色答:切片在蘇木素染液中停留過長,;或切片太厚;或分化時間太短,。這種情況首先鏡下看看切片厚度(比較好厚度1-2層細胞核),,要么重新染色,要么重新制片,。南京英瀚斯,,專業(yè)的病理染色實驗服務平臺。
HE染色法,,,。蘇木精染液為堿 ,主要使細胞核內(nèi)的染色質與胞質內(nèi)的核糖體著紫藍色 ,;伊紅為酸染料 ,,主要使細胞質和細胞外基質中的成分著紅色。而線粒體用HE染色不可見,,活細胞通常要求活細胞近似無色線粒體需要用健那綠來染色,,再在高倍鏡下觀察。從人或動物新鮮尸體上取下塊(一般厚度不超過0.5厘米)投入預先配好的固定液中(10%福爾馬林,,Bouin氏固定液等)使,、細胞的蛋白質變凝固,以防止細胞后的自溶或細菌的分解,,從而保持細胞本來的形態(tài)結構,。一般用由低濃度到高濃度酒精作脫水劑,逐漸脫去塊中的水份,。再將塊置于既溶于酒精,,又溶于石蠟的透明劑二甲苯中透明,以二甲苯替換出塊的中酒精,,才能浸蠟包埋,。什么是HE染色,HE染色實驗的目的,。
HE染色常見問題:切片染色不均勻,,有片狀的弱著**存在答:(1)取材時組織太厚,,固定過久,導致深部組織固定不佳,,而表淺組織過度固定,,而透明、脫水,、浸蠟均是如此,,這樣在后期染色時就會出現(xiàn)染色不均勻。應該將厚的組織剖開固定,。(2)制片過程有問題,,切片厚薄不一,或者有刀痕,,或組織與玻片間存在氣泡,。同一張切片厚薄不一,一般都是在制片時,,刀片固定不佳或刀片鈍或刀片與組織角度不佳(一般比較好角度為5°)(3)脫蠟前未烘烤,,脫蠟時間過短或脫蠟液使用過久,導致脫蠟不徹底,。(4)染色液過少,,著色不均勻;或染色時部分組織干涸而另一部分濕潤,,這樣會導致組織吸附染料的能力不一。(5)分化不當,。南京英瀚斯,,專業(yè)的病理染色實驗服務平臺。HE染色,,南京英瀚斯,,專業(yè)的實驗外包公司。上海推薦的HE染色公司
HE染色小貼士以及相關技巧分析,。上海推薦的HE染色公司
HE染色常見問題:成片的染色模糊不清,,灰染答:(1)組織未及時固定,部分自溶,;或固定不佳,,深部組織未處理到。這種只能重新固定了,。(2)盡管乙醇也是一種固定液,,但盡量少用或不用,因為其會導致組織發(fā)硬變脆,,染色效果不好,。(3)包埋時蠟的溫度過高,,或切片后烤片時間和溫度過久過高都不好,可能會導致無法染色,。(4)脫蠟不徹底,;染料有問題;分化過度導致的顏色變淡,,鏡下組織界限不清,;染完后的脫水和透明不佳,水霧殘留在組織上,。(5)通風窗中(防止空氣中的水霧),,戴口罩操作封片(減少哈氣帶來的水霧)。上海推薦的HE染色公司