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來源: 發(fā)布時(shí)間:2024-05-26

確定來源不明的轉(zhuǎn)移瘤的原發(fā)部位,,臨床上免疫組化也可以進(jìn)行操作,。對(duì)于來源不明的轉(zhuǎn)移瘤,,用免疫組化技術(shù)有助于確定惡性cancer的組織學(xué)來源,,進(jìn)一步確定原發(fā)部位,。如角蛋白抗體(CK20)在胃腸道cancer,、膽管cancer,、胰腺cancer中陽性,,而在肺cancer,、乳腺cancer,、腎cancer中陰性;Tg陽性可考慮甲狀腺轉(zhuǎn)移;波形蛋白(Vimentin)陽性支持肉瘤的診斷;前列腺特異性抗原(PSA)陽性可考慮前列腺轉(zhuǎn)移;甲狀腺球蛋白陽性可考慮甲狀腺濾泡細(xì)胞cancer;肌動(dòng)蛋白(Actin)、肌球蛋白(Myosin),、結(jié)蛋白(Desmin),、肌紅蛋白(Myoglobin)陽性可考慮橫紋肌肉瘤;S-100蛋白陽性支持黑色素瘤的診斷;等等這些都為cancer的醫(yī)療及預(yù)后提供了依據(jù)。有沒有做免疫組化比較好的公司,?內(nèi)蒙古免疫組化推薦

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實(shí)驗(yàn)失敗常見問題分析有哪些:

為什么在顯微鏡下觀察發(fā)現(xiàn)所有的切片都成陰性,?

答:這種現(xiàn)象主要是由操作不當(dāng)導(dǎo)致,可能的原因有:1.染色操作不當(dāng),,致使染色失?。?.漏加一種抗體或者制備出的抗體沒有活性,;3.緩沖液中有疊氮化鈉,,抑制了酶的活性,;4.復(fù)染或脫水劑使用不當(dāng)?shù)取=ㄗh逐一排查,,找到原因后重新進(jìn)行實(shí)驗(yàn),。

在顯微鏡下觀察發(fā)現(xiàn)所有的切片都成陽性,這是為什么,?答:與上一個(gè)問題類似,,出現(xiàn)的原因也是試驗(yàn)操作存在問題,可能的原因有:1.切片在染色過程中抗體過濃,,或者干片了,;使用的呈色底物溶液已變色或呈色反應(yīng)時(shí)間過長;3.抗體溫育的時(shí)間過長等,。

在顯微鏡下觀察發(fā)現(xiàn)切片的背景很深,,這是為什么?答:以下幾方面會(huì)導(dǎo)致切片的背景過深:1.蛋白質(zhì)封閉不夠或所用血清溶血,,造成抗體的非特異性反應(yīng),;2.內(nèi)源性過氧化酶沒有完全阻斷,顯色過程中過氧化酶與酶底物反應(yīng),,造成背景,;3.底物呈色反應(yīng)時(shí)間過長或呈色反應(yīng)后漂洗不徹底。 安徽免疫組化多少錢關(guān)于免疫組化,,你想知道的都在這里,!

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免疫組化在什么情況下進(jìn)行組織抗原修復(fù),抗原修復(fù)的條件是什么,? 

(1)由于組織中部分抗原在甲醛或多聚甲醛固定過程中,,發(fā)生了蛋白之間交聯(lián)及醛基的封閉作用,從而失去抗原性,。通過抗原修復(fù),,使得細(xì)胞內(nèi)抗原決定族重新暴露,提高抗原檢測率,。

(2)修復(fù)方法從強(qiáng)到弱一般分為三種,,高壓修復(fù)、微波修復(fù),、胰酶修復(fù),。修復(fù)液也分為若干種(具體的可以查閱相關(guān)資料,大量的:中性的,、高pH的等),。

(3)微波修復(fù),我們一般用6min*4次,,效果不錯(cuò),。

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免疫組化的發(fā)展路程,?在臨床病理診斷中,,免疫組織化學(xué)(IHC)是一種很重要的技術(shù)和手段,從20世紀(jì)70年代開始,,免疫組化技術(shù)就應(yīng)用于病理診斷,,對(duì)于診斷cancer、cancer分類,、判斷預(yù)后產(chǎn)生了巨大的影響,同時(shí)也擴(kuò)展了人們對(duì)于各種疾病及cancer形成過程的認(rèn)識(shí),,提高了病理診斷與研究水平,。但是,隨著免疫組化的廣泛應(yīng)用,,發(fā)現(xiàn)免疫組化技術(shù)存在一些局限性,。深入研究免疫組化原理和技術(shù),必須熟悉各種抗體真陽性反應(yīng)部位,,實(shí)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)室間免疫組化標(biāo)準(zhǔn)化,,使免疫組化在病理診斷中發(fā)揮比較大的輔助作用。如果您有免疫組化相關(guān)的實(shí)驗(yàn),,可以與我們英瀚斯生物進(jìn)行聯(lián)系,。病理免疫組化多少錢?

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免疫組化結(jié)果背景染色較深的原因有哪些,?

 (1)抗體濃度過高:一抗?jié)舛冗^高是常見的原因之一,。解決辦法是,每次使用新抗體前應(yīng)當(dāng)對(duì)其工作濃度進(jìn)行測試,,使每一抗體個(gè)體化,,找到適合自己實(shí)驗(yàn)室的理想工作濃度,既使是即用型的抗體也應(yīng)如此,,不能只簡單的按說明書進(jìn)行染色,。

(2)抗體孵育時(shí)間過長或溫度較高:解決辦法是,嚴(yán)格執(zhí)行操作規(guī)程,,比較好隨身佩帶報(bào)時(shí)表或報(bào)時(shí)鐘,,及時(shí)提醒,避免因遺忘而造成時(shí)間延長?,F(xiàn)在流行的二步法(Polymer)敏感性很高,,要求一抗孵育的時(shí)間不是傳統(tǒng)的1小時(shí),而是30分鐘,,因此,,要根據(jù)染色結(jié)果進(jìn)行調(diào)整,。 

(3)DAB變質(zhì)和顯色時(shí)間太長:DAB比較好現(xiàn)用現(xiàn)配,如有沉渣應(yīng)進(jìn)行過濾后再用,。配制好的DAB不應(yīng)存放時(shí)間太長,,因?yàn)樵跊]有酶的情況下,過氧化氫也會(huì)游離出氧原子與DAB產(chǎn)生反應(yīng)而降低DAB的效力,,未用完的DAB存放在冰箱里幾天后再用這種似乎節(jié)約的辦法是不可取的,。DAB的顯色比較好在顯微鏡下監(jiān)控,達(dá)到理想的染色程度時(shí)立即終止反應(yīng),。但是當(dāng)染**太多時(shí)或用染色機(jī)時(shí),,這樣做似乎不現(xiàn)實(shí),但至少應(yīng)對(duì)一些新的或少用的抗體顯色時(shí)進(jìn)行監(jiān)控,,避免顯色時(shí)間過長,。

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關(guān)于免疫組化的封閉:用和二抗來源一致的血清在保濕盒中于37℃孵育15~30min,,然后甩去封閉用血清,,勿洗;注意:封閉時(shí)間根據(jù)具體實(shí)驗(yàn)調(diào)整,;封閉液一般選用5%BSA或與二抗來源一致的血清,,切記是BSA,不是PBS.很多論壇寫的是PBS,太坑了,。①使用血清好還是BSA好,?答:***是待檢樣本會(huì)非特異性的和蛋白結(jié)合,從而導(dǎo)致背景過高,,因此可以用BSA或血清封閉掉這部分非特異性的結(jié)合,,從這點(diǎn)看,BSA和血清沒有明顯區(qū)別,。第二是待檢樣本中可能會(huì)有Fc受體,,可以和抗體恒定區(qū)結(jié)合,與抗體特異性無關(guān),封閉血清中有抗體,,因此用血清可以封閉掉一抗及二抗和樣本Fc受體之間結(jié)合,。BSA則無法封閉Fc受體。內(nèi)蒙古免疫組化推薦