HE染色顯微鏡下見切片內(nèi)有大量水珠分析以及應(yīng)對原因:切片經(jīng)梯度乙醇處理后沒有完全脫水,導(dǎo)致二甲苯透明中性樹膠封固后殘留大量水分,。對策:移去蓋玻片,,用二甲苯溶解封固劑如中性樹膠。將切片置入新鮮的無水乙醇中,,待切片重新脫水完全后,用新二甲苯透明,,中性樹膠封固,。所有用于脫水和透明的液體,在使用一定時間以后,,應(yīng)即時更換,。光鏡下切片某些區(qū)域難以聚焦分析以及應(yīng)對原因:蓋玻片上可能有封固切片的封固劑。對策:移去蓋玻片,,重新用干凈的蓋玻片封片關(guān)于HE染色,,你不知道的實驗技巧。江蘇值得信賴的HE染色分析
HE染色知識點1:對送檢組織標(biāo)本的要求送檢組織標(biāo)本在手術(shù)切除或活檢后應(yīng)當(dāng)立即放入4%中性緩沖甲醛溶液中固定,。尸檢標(biāo)本應(yīng)當(dāng)盡量在死亡后盡早取材固定,。送檢組織需要全部取材的,應(yīng)當(dāng)在送檢單上注明,,有特殊要求(如細菌培養(yǎng),、解釋道化學(xué)分析等)應(yīng)當(dāng)事先聯(lián)系,,并且在標(biāo)本未固定前進行處理。知識點2:組織取材要求在對送檢組織標(biāo)本進行詳細檢查的基礎(chǔ)上,,根據(jù)診斷的需要,,確定取材的部位和塊數(shù)。切取的組織應(yīng)當(dāng)按照不同的部位分別給予不同的編號或標(biāo)記,,以便鏡檢時核對,。另外,盡可能在取材前對有意義的標(biāo)本的表面及剖面鏡下攝影,,并編號存檔南京英瀚斯,,專業(yè)的病理染色實驗服務(wù)平臺。四川推薦的HE染色服務(wù)HE染色結(jié)果如何分析和讀片,?
HE染色攻略:HE染色又稱為蘇木精-伊紅染色,,染色后組織或細胞可以借助普通光學(xué)顯微鏡觀察與鑒別細胞凋亡與細胞壞死的一種染色方法。這種方法適用范圍***,,對組織細胞的各種成分都可著色,,便于***觀察組織構(gòu)造,而且適用于各種固定液固定的材料,,染色后不易褪色可長期保存,。經(jīng)過HE染色,細胞核被蘇木素染成藍紫色,,細胞質(zhì)被伊紅染色呈粉紅色,。可以觀察細胞結(jié)構(gòu),、組織層次等等,。首先切片組織是否完整,組織有無損傷,;然后看切片有無刀痕,;***細胞核是否清晰可見,胞核與包漿要對比鮮明,。
HE染色反藍的原理:蘇木素染液,,細胞核內(nèi)的染色質(zhì)主要是去氧核糖核酸(DNA),DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu)中,兩條鏈上的磷酸基向外,,帶負電荷,,呈酸性,很容易與帶正電荷的蘇木素精堿性染料以離子或氫鍵結(jié)合而被染色,。蘇木精在堿性溶液中呈藍色,,所以細胞核被染成藍色。 分化:蘇木素染色之后,,用水洗去未結(jié)合在細胞上的染液,,但是在細胞核中結(jié)合過多的染料和細胞漿中吸附的染料必須用分化液1%鹽酸酒精脫去,,才能保證細胞核和細胞漿染色的分明,把這個過程稱為染色的分化作用,。因酸能破壞蘇木素的醌型結(jié)構(gòu),,使色素與組織解離,分化不可過度,。藍化:分化之后蘇木素在酸性條件下處于紅色離子狀態(tài),,在堿性條件下處于藍色離子狀態(tài),而呈藍色,,所以分化之后用水洗去酸而中止分化,,再用弱堿性水使蘇木精染上的細胞核變呈藍色,稱藍化作用,,一般多用自來水浸洗即可變藍,,也可用溫水(50度溫水比較好)變藍。比較基礎(chǔ)的病理染色HE染色,。
HE染色結(jié)果判讀:細胞核被蘇木精染成鮮明的藍色,,軟骨基質(zhì)、鈣鹽顆粒呈深藍色,,粘液呈灰藍色,。細胞漿被伊紅染成深淺不同的粉紅色至桃紅色,胞漿內(nèi)嗜酸性顆粒呈反光強的鮮紅色,。膠原纖維呈淡粉紅色,,彈力纖維呈亮粉紅色,紅血球呈橘紅色,,蛋白性液體呈粉紅色,。著色狀況與組織或細胞的種類有關(guān),也隨其生活周期及病理變化而改變,。例如,,細胞在新生時期胞漿對伊紅著色較淡或輕度嗜堿,當(dāng)其衰老時或發(fā)生退行性變則呈現(xiàn)嗜伊紅濃染,。膠原纖維在老化和出現(xiàn)透明變性時,伊紅著色由淺變深,。H-E染色評定標(biāo)準(zhǔn):(1)切片完整,,厚度4-6微米,厚薄均勻,,無皺褶無刀痕,;(2)染色核漿分明,紅藍適度,,透明潔凈,,封裱美觀,。讓您放心的實驗外包公司,專業(yè)HE染色實驗服務(wù)平臺,。江蘇值得信賴的HE染色分析
HE染色的基本原理和結(jié)果分析,。江蘇值得信賴的HE染色分析
HE染色觀察肝臟HE染色切片,首先要在顯微鏡下找到肝臟的標(biāo)志性結(jié)構(gòu)——肝小葉,。顯微鏡首先調(diào)4倍物鏡,,調(diào)準(zhǔn)焦螺旋至視野清晰,可以看到肝小葉結(jié)構(gòu),。人的肝小葉之間結(jié)締組織少,,小葉分隔不明顯,但動物如豬或小鼠,,其肝小葉分界非常明顯,。肝小葉**有**靜脈,在橫切片上顯示為空洞,。肝小葉之間為將物鏡調(diào)制10倍或20倍,,就可以清楚地看到肝小葉結(jié)構(gòu)。肝細胞以**靜脈為中心向周圍放射狀排列,,稱為肝板,。一般在20倍物鏡下可以清晰看到肝細胞。20倍物鏡下,,肝細胞內(nèi)染色為藍色的是細胞核,,細胞核大而圓,居中,,異染色質(zhì)少而著色淺,,能清晰看到核仁。肝細胞胞質(zhì)豐富,,多成嗜酸性,,當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)合成旺盛時,胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)散在的嗜堿性物質(zhì),。肝細胞內(nèi)有豐富的細胞器比如溶酶體,、高爾基體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng),,等等,,但是在光鏡下是無法看到的,需要在電鏡下才能觀察到,。當(dāng)然,,肝小葉內(nèi)除了肝細胞,還有膽小管、肝血竇,、肝巨噬細胞等組織形態(tài),,但是在HE染色時并不容易觀察到。做肝臟HE染色切片主要目的一般都是為了觀察肝細胞形態(tài)是否完整,、胞核有無增大,、肝小葉形態(tài)是否完整,以檢測藥物等刺激因素對肝臟的損傷作用,。江蘇值得信賴的HE染色分析