HE染色病理技術(shù)中**常用的一種方法,通過它可以做出病理診斷和發(fā)現(xiàn)尋求別的輔助方法,,以達(dá)到準(zhǔn)確,,完整的病理診斷。一,、染色目的 病理學(xué)的所有切片,,都必須通過一種以上的染料,通過各種不同的方法,,將切片中各種不同的物質(zhì),,在不同染液的作用下,將其顯示出來,,使之在光學(xué)顯微鏡下,,能夠完全的觀看各種結(jié)構(gòu)。例如,,HE染色,,好質(zhì)量的切片可以清晰地顯示出多不同的結(jié)構(gòu),細(xì)胞核著藍(lán)黑色,,細(xì)胞漿著粉紅色,,軟骨著藍(lán)色等。清晰的結(jié)構(gòu)為診斷提供的依據(jù),,因此,,染色技術(shù)也是病理技術(shù)中的重要組成部分,必須不斷地總結(jié),,方能提高,。HE染色試驗(yàn)技術(shù)及注意事項(xiàng)。內(nèi)蒙古性價(jià)比高的HE染色多少錢
HE染色法,,,。蘇木精染液為堿 ,主要使細(xì)胞核內(nèi)的染色質(zhì)與胞質(zhì)內(nèi)的核糖體著紫藍(lán)色 ;伊紅為酸染料 ,,主要使細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞外基質(zhì)中的成分著紅色,。而線粒體用HE染色不可見,活細(xì)胞通常要求活細(xì)胞近似無色線粒體需要用健那綠來染色,,再在高倍鏡下觀察,。從人或動物新鮮尸體上取下塊(一般厚度不超過0.5厘米)投入預(yù)先配好的固定液中(10%福爾馬林,Bouin氏固定液等)使,、細(xì)胞的蛋白質(zhì)變凝固,,以防止細(xì)胞后的自溶或細(xì)菌的分解,從而保持細(xì)胞本來的形態(tài)結(jié)構(gòu),。一般用由低濃度到高濃度酒精作脫水劑,,逐漸脫去塊中的水份。再將塊置于既溶于酒精,,又溶于石蠟的透明劑二甲苯中透明,,以二甲苯替換出塊的中酒精,才能浸蠟包埋,。山西比較好的HE染色分析HE染色 ,石蠟切片技術(shù)里常用的染色法之一,。
HE染色法的話,不能準(zhǔn)確說出細(xì)胞器的顏色,,實(shí)驗(yàn)記錄或考試時(shí)只能說染色效果為 :細(xì)胞核藍(lán)色,,胞質(zhì)、肌纖維,、膠原纖維和紅細(xì)胞呈深淺不一的紅色,?;蛘咴敿?xì)說明如下:細(xì)胞核被蘇木精染成鮮明的藍(lán)色,,軟骨基質(zhì)、鈣鹽顆粒呈深藍(lán)色,,粘液呈灰藍(lán)色,。細(xì)胞漿被伊紅染成深淺不同的粉紅色至桃紅色,胞漿內(nèi)嗜酸性顆粒呈反光強(qiáng)的鮮紅色,。膠原纖維呈淡粉紅色,,彈力纖維呈亮粉紅色,紅血球呈橘紅色,,蛋白性液體呈粉紅色,。蘇木精染液為堿性 ,主要使細(xì)胞核內(nèi)的染色質(zhì)與胞質(zhì)內(nèi)的核糖體著紫藍(lán)色 ;伊紅為酸性染料 ,主要使細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞外基質(zhì)中的成分著紅色,。
HE染色組織樣本水化:將浸泡過二甲苯的待測組織樣本先放入無水乙醇中浸泡5min,,使脫蠟時(shí)用的二甲苯可以被洗脫出去,使水可以進(jìn)入組織中;再依次置于95%,、85%,、70%乙醇中各浸泡5min以達(dá)到充分水化的效果。組織切片蘇木素染色,、分化與反藍(lán):將水化后的組織樣本的切片使用PBS溶液浸泡清洗,,每次浸泡5min,總共清洗3次,。之后用移液***吸取已經(jīng)預(yù)先配制好的蘇木素染色液,,每個(gè)組織切片滴加100ul,充分染色10min,。染色完畢后使用蒸餾水洗去多余的蘇木素染色液,。然后再使用1%的鹽酸乙醇進(jìn)行分化,使細(xì)胞核中結(jié)合過多的染液和細(xì)胞漿中的多余的染液被除去,。分化完成后,,再用雙蒸水將組織切片沖洗干凈。為了使蘇木素染藍(lán)色,,使用弱堿性的促藍(lán)液加入組織切片中,,讓細(xì)胞核染藍(lán)色。反藍(lán)結(jié)束后先用清水進(jìn)行清洗,,再用雙蒸水將組織切片沖洗干凈,。冰凍組織切片的HE染色。
HE染色注意事項(xiàng):1.組織切片的脫蠟步驟應(yīng)徹底,,否則無論進(jìn)行那種染色都會發(fā)生困難,。脫蠟時(shí)間要充分,若溶蠟劑使用過久應(yīng)及時(shí)更換以免效率降低,,若室溫過低,,可將溶蠟劑置于溫箱中進(jìn)行脫蠟。 2.蘇木素染液使用一段時(shí)間后表面易出現(xiàn)亮晶狀飄浮物,,這可能是液體表面的過氧化物,,必須過濾除去,以防沉渣污染組織切片,。蘇木素液一般染過三,、四百張切片后,著色力會減弱,,著色不鮮艷,,呈灰藍(lán)色時(shí)應(yīng)及時(shí)更換新液。 3.染色的時(shí)間長短需依據(jù):染劑對組織的染色作用,,室溫條件,,切片厚薄,,固定液的類別,染液的新舊而進(jìn)行調(diào)節(jié),。所以在染色時(shí)必須使用顯微鏡觀察染色程度以利掌握時(shí)間,。 4.分化十分重要。分化步驟的準(zhǔn)確也是染色成敗的關(guān)鍵,,若分化失當(dāng)則必然引起染色不勻或過淡,,過深等現(xiàn)象,因此分化后一定要鏡檢,,觀察胞核是否清晰,,胞漿呈淡白色。否則需再次分化,,不然一旦復(fù)染后,,組織會呈紫藍(lán)色即“藍(lán)蓋紅”現(xiàn)象。 5.還原液不宜過濃,,若堿性太強(qiáng)易使組織脫落故以淡為宜,。 6.伊紅宜淡染,復(fù)染過深胞核會不清晰,,影響鏡檢,。 HE染色取材和樣本保存方式。山西比較好的HE染色分析
HE染色切片知識以及如何做出漂亮的切片,。內(nèi)蒙古性價(jià)比高的HE染色多少錢
HE染色攻略:HE染色又稱為蘇木精-伊紅染色,,染色后組織或細(xì)胞可以借助普通光學(xué)顯微鏡觀察與鑒別細(xì)胞凋亡與細(xì)胞壞死的一種染色方法。這種方法適用范圍***,,對組織細(xì)胞的各種成分都可著色,,便于***觀察組織構(gòu)造,而且適用于各種固定液固定的材料,,染色后不易褪色可長期保存,。經(jīng)過HE染色,細(xì)胞核被蘇木素染成藍(lán)紫色,,細(xì)胞質(zhì)被伊紅染色呈粉紅色,。可以觀察細(xì)胞結(jié)構(gòu),、組織層次等等。首先切片組織是否完整,,組織有無損傷,;然后看切片有無刀痕;***細(xì)胞核是否清晰可見,,胞核與包漿要對比鮮明,。內(nèi)蒙古性價(jià)比高的HE染色多少錢