HE染色骨組織的處理方式:組織里存有鈣鹽可妨礙用常規(guī)方法制作良好切片,。骨組織及鈣化病灶,,經(jīng)過(guò)固定后,,需要先將鈣鹽除去使組織軟化,才能進(jìn)行常規(guī)切片,。如果脫鈣不全,,則切片容易撕開(kāi)或碎裂,損傷切片刀刀刃,。脫去鈣鹽的過(guò)程,,稱(chēng)為脫鈣。骨組織固定24小時(shí)后,,鋸下不超過(guò)0.5cm厚的薄骨片,,以4%甲醛溶液固定后,進(jìn)行脫鈣,。骨組織過(guò)厚則需延長(zhǎng)脫鈣時(shí)間,,但長(zhǎng)時(shí)間浸于強(qiáng)酸會(huì)影響切片染色效果,。取材骨組織固定于10%甲醛溶液24小時(shí)后再鋸取厚度約0.5cm骨片固定以10%甲醛溶液固定2天脫鈣將組織置于脫鈣劑中,,每日更換新鮮液,直至組織軟化為止除酸流水沖洗24小時(shí)脫水,、浸蠟,、切片進(jìn)行常規(guī)脫水、透明,、浸蠟,、切片南京英瀚斯,專(zhuān)業(yè)的病理染色實(shí)驗(yàn)服務(wù)平臺(tái),。HE染色小攻略技巧分析,。寧夏病理HE染色分析
HE染色常見(jiàn)問(wèn)題:Q3:細(xì)胞核染色過(guò)淺,顏色暗淡答:切片在蘇木素染液中停留過(guò)短,,或蘇木素過(guò)度氧化失效,,或分化時(shí)間太長(zhǎng)。對(duì)策:重新染色,。將組織切片放入0.01%氫氧化鈉,、0.5%氨水、飽和的碳酸氫鈉溶液,、乙醇溶液,,每個(gè)3-5min即可,接著重新染色,??梢赃m當(dāng)?shù)亟M織的嗜堿性以增強(qiáng)核染色,,如Zenker液固定的切片可放入5%碳酸氫鈉溶液中3h,自來(lái)水沖洗5-10min染色,,或Bouin液固定的切片可放入5%碳酸氫鈉溶液中1h,,自來(lái)水沖洗10min染色。Q4:細(xì)胞核染色過(guò)深,,胞漿著藍(lán)色答:切片在蘇木素染液中停留過(guò)長(zhǎng),;或切片太厚;或分化時(shí)間太短,。這種情況首先鏡下看看切片厚度(比較好厚度1-2層細(xì)胞核),,要么重新染色,要么重新制片,。南京英瀚斯,,專(zhuān)業(yè)的病理染色實(shí)驗(yàn)服務(wù)平臺(tái)。海南靠譜的HE染色多少錢(qián)HE染色規(guī)范化流程及注意事項(xiàng),?
HE染色攻略:HE染色又稱(chēng)為蘇木精-伊紅染色,,染色后組織或細(xì)胞可以借助普通光學(xué)顯微鏡觀察與鑒別細(xì)胞凋亡與細(xì)胞壞死的一種染色方法。這種方法適用范圍***,,對(duì)組織細(xì)胞的各種成分都可著色,,便于***觀察組織構(gòu)造,而且適用于各種固定液固定的材料,,染色后不易褪色可長(zhǎng)期保存,。經(jīng)過(guò)HE染色,細(xì)胞核被蘇木素染成藍(lán)紫色,,細(xì)胞質(zhì)被伊紅染色呈粉紅色,。可以觀察細(xì)胞結(jié)構(gòu),、組織層次等等,。首先切片組織是否完整,組織有無(wú)損傷,;然后看切片有無(wú)刀痕,;***細(xì)胞核是否清晰可見(jiàn),胞核與包漿要對(duì)比鮮明,。
HE染色細(xì)胞核被蘇木精染成鮮明的藍(lán)色,,軟骨基質(zhì)、鈣鹽顆粒呈深藍(lán)色,,粘液呈灰藍(lán)色,。細(xì)胞漿被伊紅染成深淺不同的粉紅色至桃紅色,胞漿內(nèi)嗜酸性顆粒呈反光強(qiáng)的鮮紅色,。膠原纖維呈淡粉紅色,,彈力纖維呈亮粉紅色,,紅血球呈橘紅色,蛋白性液體呈粉紅色,。著***況與組織或細(xì)胞的種類(lèi)有關(guān),,也隨其生活周期及病理變化而改變。例如,,細(xì)胞在新生時(shí)期胞漿對(duì)伊紅著色較淡或輕度嗜堿,,當(dāng)其衰老時(shí)或發(fā)生退行性變則呈現(xiàn)嗜伊紅濃染。膠原纖維在老化和出現(xiàn)透明變性時(shí),,伊紅著色由淺變深,。比較基礎(chǔ)的病理染色HE染色。
HE染色脫蠟不凈的原因及驗(yàn)證方法:1)二甲苯使用過(guò)久,,含蠟成分太高或脫蠟效果差:可更換二甲苯驗(yàn)證,。2)切片經(jīng)烤片,冷卻后放入二甲苯脫蠟或室溫太低,;延長(zhǎng)拖拉時(shí)間或用熱的切片脫蠟驗(yàn)證,。3)脫蠟時(shí)間太短或振蕩太少,幅度太??;可延長(zhǎng)脫蠟時(shí)間或以多振蕩來(lái)驗(yàn)證。4)洗滌二甲苯用的乙醇使用時(shí)間過(guò)久,,導(dǎo)致乙醇中二甲苯含量過(guò)高,,二甲苯殘留在切片上(由于二甲苯與水不相溶,切片上有二甲苯的地方,,蘇木精就沒(méi)有辦法滲透進(jìn)去,在切片染色完成后留下了點(diǎn)狀的不著**域):更換各道乙醇驗(yàn)證,。5)二甲苯,、乙醇質(zhì)量不佳(偶有試劑瓶?jī)?nèi)裝的試劑與試劑名不相符):換批號(hào)驗(yàn)證。6)更換脫蠟液體時(shí)試劑拿錯(cuò):需重新配置驗(yàn)證,。7)更換脫蠟液體時(shí)試劑次序放錯(cuò):需重新配置驗(yàn)證,。8)烤片時(shí)間短,切片上水分沒(méi)有烤干,,也會(huì)導(dǎo)致著色不勻,,出現(xiàn)點(diǎn)狀發(fā)白區(qū)域。讓您放心的實(shí)驗(yàn)外包公司,,專(zhuān)業(yè)HE染色實(shí)驗(yàn)服務(wù)平臺(tái),。寧夏病理HE染色分析
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HE染色細(xì)胞質(zhì)過(guò)染分析及應(yīng)對(duì)原因:(1)伊紅染色液濃度太高,,特別是焰紅燃料,、四溴四氯熒光素鈉的存在;(2)切片在伊紅染色時(shí)間過(guò)長(zhǎng),;(3)切片在伊紅染色后經(jīng)乙醇脫水步驟時(shí)過(guò)的太快,,而使乙醇分化伊紅的作用不能產(chǎn)生。對(duì)策:適當(dāng)稀釋伊紅染色液,,減少伊紅染色時(shí)間,,或者使切片在乙醇脫水等步驟時(shí),停留時(shí)間相對(duì)均勻,。同樣,,也要檢查切片的厚度是否合適。切片中出現(xiàn)藍(lán)黑色沉淀物分析及應(yīng)對(duì)原因:蘇木精染色液中的金屬膜,,黏附在玻片上,。對(duì)策:每天染色前仔細(xì)過(guò)濾蘇木精染色液,或建議使用半氧化蘇木精染色液,,如Gill蘇木精染色液,可以避免過(guò)多的金屬膜產(chǎn)生,。寧夏病理HE染色分析