醫(yī)療和預(yù)后有關(guān)的免疫組化。與醫(yī)療及預(yù)后有關(guān)的標(biāo)記物主要分以下為三類:(1)cancer基因標(biāo)記物:如cancer基因C-erbB2,、c-myc,、P53蛋白等,，卵巢上皮性cancer中P53的過(guò)表達(dá)與cancer的擴(kuò)散、分化,、術(shù)后殘存cancer灶呈正相關(guān);乳腺cancer中表達(dá)C-erbB2的浸潤(rùn)性cancer患者預(yù)后差;肺cancer中突變型P53基因蛋白表達(dá)增高,，PTEN基因表達(dá)減弱，提示cancer預(yù)后不良,。(2)細(xì)胞增殖性標(biāo)記物:cancer細(xì)胞增生是否活躍直接影響著臨床的醫(yī)療與預(yù)后,，如表皮生長(zhǎng)因子受體(EGFR)、Ki-67,、PCNA,、cycling等可對(duì)cancer細(xì)胞的增生做出評(píng)價(jià)，表達(dá)指數(shù)越高,，表明其增殖指數(shù)越活躍,，惡性度增高，預(yù)后不良,，其中以惡性淋巴瘤乳腺cancer較為明顯;在對(duì)乳腺cancer的研究中發(fā)現(xiàn)Ki-67,、EGFR陽(yáng)性者，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移率高,，并與ji素受體的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)。(3)類固醇ji素受體:如雌ji素受體(ER),、孕ji素受體(PR)等,，應(yīng)用更為范圍廣的的是子宮內(nèi)膜cancer及乳腺cancer，如對(duì)乳腺cancer中ER,、PR的檢測(cè),，有助于決定臨床醫(yī)療中是否需要加入內(nèi)分泌ji素阻斷醫(yī)療，并能判斷預(yù)后,，ER及PR陽(yáng)性表達(dá),、原cancer基因(C-erbB-2)陰性表達(dá)病例對(duì)三苯氧胺等ji素醫(yī)療反應(yīng)良好，而ERPR,、C-erbB-2三種抗體均陰性(TNBC)患者采用三苯氧胺可能意義不大,。免疫組化相關(guān)知識(shí)匯總。湖北病理免疫組化價(jià)格

免疫組化結(jié)果要如何分析,？

 （1）陽(yáng)性著色細(xì)胞計(jì)數(shù)法,。在40*光鏡下，隨機(jī)選擇不重疊的10個(gè)視野,，機(jī)器或人工計(jì)數(shù)陽(yáng)性著色細(xì)胞,，每組3~6張不同動(dòng)物組織切片，然后進(jìn)行組間比較即可,。

（2）灰密度分析法,。可以通過(guò)在不同組別和不同動(dòng)物組織切片上選擇相同區(qū)域、相同條件下用image j進(jìn)行灰密度分析,，然后進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析即可,。

（3）評(píng)分法。用光學(xué)顯微鏡下對(duì)組織切片分別按染色程度（0~3分為陰性著色,、淡黃色,、淺褐色、深褐色）,、陽(yáng)性范圍進(jìn)行評(píng)分（1~4分為0~25%,、26~50%、51~75%,、76~100%）,，**終可以分?jǐn)?shù)相加，再進(jìn)行比較,。對(duì)于以上這幾種方法,，各有利弊，請(qǐng)細(xì)心選擇,。要想得到正確結(jié)果的前提是你要做出著色均勻,、背景很淺的高質(zhì)量切片。

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做免疫組化時(shí)如何選擇一抗,？

1,、單克隆和多克隆抗體的選擇。由一種克隆產(chǎn)生的特異性抗體叫做單克隆抗體,。單克隆抗體能目標(biāo)明確地與單一的特異抗原決定簇結(jié)合,，就像導(dǎo)彈精確地命中目標(biāo)一樣。另一方面,，即使是同一個(gè)抗原決定簇,，在機(jī)體內(nèi)也可以由好幾種克隆來(lái)產(chǎn)生抗體，形成好幾種單克隆抗體混雜物,，稱為多克隆抗體,。在抗原抗體反應(yīng)中，一般單克隆抗體特異性強(qiáng),，但親和力相對(duì)小,，檢測(cè)抗原靈敏度相對(duì)就低,；而多克隆抗體特異性稍弱，但抗體的親和力強(qiáng),，靈敏度高,，但易出現(xiàn)非特異性染色（可以通過(guò)封閉等避免）。

2,、應(yīng)用范圍的選擇,。有的一抗只能用于Westernblotting，或免疫組化,、免疫熒光,、免疫沉淀等；甚至標(biāo)明石蠟切片或冰凍切片,。

3,、種屬反應(yīng)性的選擇（speciesreactivity）。這一點(diǎn)很重要,，表明這種抗體可能存在種屬差別,，且這種抗體適合檢測(cè)哪種種屬動(dòng)物體內(nèi)的抗原。

4,、種屬來(lái)源,，一般兔來(lái)源的多是多克隆抗體；而小鼠來(lái)源的多是單克隆抗體,，但也有另外,。根據(jù)此來(lái)源來(lái)選擇相應(yīng)的二抗。

5,、生產(chǎn)廠家的選擇。

免疫組化結(jié)果中的假陰性是指所有抗體標(biāo)記的切片均呈陰性,，無(wú)陽(yáng)性信號(hào),，假陰性結(jié)果不是真實(shí)的反應(yīng)。導(dǎo)致假陰性結(jié)果的原因有:(1)抗原修復(fù)方法選擇不當(dāng),，根據(jù)不同的抗原特點(diǎn)采用不同的修復(fù)方法,，大多數(shù)抗體要求熱修復(fù)，熱修復(fù)又包括高壓修復(fù),、微波修復(fù)及煮沸熱修復(fù);而對(duì)某些細(xì)胞內(nèi)抗原和細(xì)胞間質(zhì)抗原需要用酶消化,，如表皮生長(zhǎng)因子(EGFR)要求胃蛋白酶(Pepsin)消化，而Vimentin則不用修復(fù);(2)一抗本身的問(wèn)題:一抗效價(jià)降低或失效,。在免疫組化中染色結(jié)果的假陰性會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)診或漏診,，進(jìn)而影響臨床診斷及延誤醫(yī)療。解決這一問(wèn)題的可通過(guò)設(shè)立陽(yáng)性對(duì)照,，比較兩者染色結(jié)果,。若陽(yáng)性對(duì)照有表達(dá),，表明試劑和染色體系及實(shí)驗(yàn)步驟均無(wú)問(wèn)題;若陽(yáng)性對(duì)照無(wú)表達(dá)，則檢測(cè)過(guò)程中某一試劑或某個(gè)步驟存在問(wèn)題,，應(yīng)逐一查找原因,。動(dòng)物、細(xì)胞的免疫組化,、免疫熒光,，就找英瀚斯生物！

免疫組化的應(yīng)用領(lǐng)域

免疫組化在生物醫(yī)學(xué)研究和臨床診斷中有著廣泛的應(yīng)用,。在**學(xué)中,，免疫組化通常被用于**標(biāo)志物的檢測(cè)，幫助確定**的類型,、分級(jí)和預(yù)后,。例如，免疫組化通過(guò)檢測(cè)ER,、PR和HER2的表達(dá),，可以指導(dǎo)乳腺*的治療方案。在神經(jīng)科學(xué)中,，免疫組化用于研究神經(jīng)元的分布和功能,。在免疫學(xué)中，免疫組化可以用于檢測(cè)炎癥細(xì)胞和免疫細(xì)胞在組織中的分布和水平,。此外,，免疫組化實(shí)驗(yàn)技術(shù)還被廣泛應(yīng)用于發(fā)育生物學(xué)、病理學(xué)和藥物研發(fā)等領(lǐng)域,。 如何做好免疫組化實(shí)驗(yàn),？安徽什么是免疫組化多少錢(qián)

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免疫組化的DAB顯色時(shí)間如何把握,？

1,、DAB顯色時(shí)間不是固定的，主要由顯微鏡下控制顯色時(shí)間,，到出現(xiàn)淺棕色本底時(shí)即可沖洗,；

2、DAB顯色時(shí)間很短（如幾秒或幾十秒）就出現(xiàn)很深的棕褐色,，這很可能說(shuō)明你的抗體濃度過(guò)高或抗體孵育時(shí)間過(guò)長(zhǎng),，需要下調(diào)抗體濃度或縮短你的抗體孵育時(shí)間；

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3、此外,，若很短時(shí)間就出現(xiàn)背景很深,，還有可能你前面的封閉非特異性蛋白不全,，需要延長(zhǎng)封閉時(shí)間；

4,、DAB顯色時(shí)間很長(zhǎng)（如超過(guò)十幾分鐘）才出現(xiàn)陽(yáng)性染色,，一方面可能說(shuō)明你的抗體濃度過(guò)低或孵育時(shí)間過(guò)短（比較好一抗4度過(guò)夜）；另一方面就是封閉時(shí)間過(guò)長(zhǎng),。 湖北病理免疫組化價(jià)格