HE染色分化作用：染色后，用某些特定的溶液將組織過多結(jié)合的染色劑脫去,，這個(gè)過程稱為分化作用,，所用的溶液稱為分化液。在HE染色中用0.5%鹽酸乙醇作為分化液,，因酸能破壞蘇木精的醌型結(jié)構(gòu),，使組織與色素分離而褪色。經(jīng)蘇木精染色后,，必須用0.5%鹽酸乙醇分化,，使細(xì)胞核過多結(jié)合的蘇木精染料和細(xì)胞漿吸附的蘇木精染料脫去，在進(jìn)行伊紅染色，才能保證細(xì)胞核與細(xì)胞漿染色的分明,。因此,，在HE染色中分化是極為關(guān)鍵的一步。返藍(lán)作用：分化之后,，蘇木精在酸性條件下處于紅色離子狀態(tài),，呈紅色，在堿性條件下處于藍(lán)色離子狀態(tài),，呈藍(lán)色,。組織切片經(jīng)0.5%鹽酸乙醇分化后呈紅色或粉紅色，故分化之后,，立即用水出去組織切片上的酸而終止分化,，再用弱堿性水（0.2%氨水）使蘇木精染上的細(xì)胞核呈現(xiàn)藍(lán)色，這個(gè)過程稱為返藍(lán)作用或藍(lán)化作用,。另外用自來水浸洗也可使細(xì)胞核返藍(lán),，但所需時(shí)間較長。HE染色小貼士以及相關(guān)技巧分析,。甘肅專業(yè)的HE染色檢測(cè)

HE染色細(xì)胞質(zhì)過染分析及應(yīng)對(duì)原因：（1）伊紅染色液濃度太高,，特別是焰紅燃料、四溴四氯熒光素鈉的存在,；（2）切片在伊紅染色時(shí)間過長,；（3）切片在伊紅染色后經(jīng)乙醇脫水步驟時(shí)過的太快，而使乙醇分化伊紅的作用不能產(chǎn)生,。對(duì)策：適當(dāng)稀釋伊紅染色液,，減少伊紅染色時(shí)間，或者使切片在乙醇脫水等步驟時(shí),，停留時(shí)間相對(duì)均勻,。同樣，也要檢查切片的厚度是否合適,。切片中出現(xiàn)藍(lán)黑色沉淀物分析及應(yīng)對(duì)原因：蘇木精染色液中的金屬膜,，黏附在玻片上。對(duì)策：每天染色前仔細(xì)過濾蘇木精染色液,，或建議使用半氧化蘇木精染色液,，如Gill蘇木精染色液,可以避免過多的金屬膜產(chǎn)生。黑龍江比較好的HE染色HE染色技術(shù)幾種常見的染色問題,。

HE染色就是用蘇木精和伊紅對(duì)細(xì)胞內(nèi)的核糖體和細(xì)胞質(zhì)染色的方法。H:Hematoxylin,，蘇木精E:Eosin,，伊紅蘇木精（Hematoxylin,H）是一種堿染料，可將細(xì)胞核和細(xì)胞內(nèi)核糖體染成藍(lán)紫色，被堿染料染色的結(jié)構(gòu)具有嗜堿,。伊紅（,，E）是一種酸染料，能將細(xì)胞質(zhì)染成紅色或淡紅色,，被酸染料染色的結(jié)構(gòu)具有嗜酸,。染色前，須用二甲苯脫去切片中的石蠟,，再經(jīng)由高濃度到低濃度酒精,，***入蒸餾水，就可染色,。 很多細(xì)胞在新生時(shí)期胞漿對(duì)伊紅著色較淡或輕度嗜堿,，當(dāng)其衰老時(shí)或發(fā)生退行變則呈現(xiàn)嗜伊紅濃染。 膠原纖維在老化和出現(xiàn)透明變時(shí),，伊紅著色由淺變深,。

HE染色脫蠟不凈的原因及驗(yàn)證方法：1)二甲苯使用過久，含蠟成分太高或脫蠟效果差：可更換二甲苯驗(yàn)證,。2)切片經(jīng)烤片,，冷卻后放入二甲苯脫蠟或室溫太低；延長拖拉時(shí)間或用熱的切片脫蠟驗(yàn)證,。3)脫蠟時(shí)間太短或振蕩太少,，幅度太小,；可延長脫蠟時(shí)間或以多振蕩來驗(yàn)證,。4)洗滌二甲苯用的乙醇使用時(shí)間過久，導(dǎo)致乙醇中二甲苯含量過高,，二甲苯殘留在切片上（由于二甲苯與水不相溶,，切片上有二甲苯的地方，蘇木精就沒有辦法滲透進(jìn)去,，在切片染色完成后留下了點(diǎn)狀的不著**域）：更換各道乙醇驗(yàn)證,。5)二甲苯、乙醇質(zhì)量不佳（偶有試劑瓶?jī)?nèi)裝的試劑與試劑名不相符）：換批號(hào)驗(yàn)證,。6)更換脫蠟液體時(shí)試劑拿錯(cuò)：需重新配置驗(yàn)證,。7)更換脫蠟液體時(shí)試劑次序放錯(cuò)：需重新配置驗(yàn)證。8)烤片時(shí)間短,，切片上水分沒有烤干,，也會(huì)導(dǎo)致著色不勻，出現(xiàn)點(diǎn)狀發(fā)白區(qū)域,。HE染色,，優(yōu)先南京英瀚斯生物。

HE染色法，石蠟切片技術(shù)里常用的染色法之一,。蘇木精染液為堿性,，主要使細(xì)胞核內(nèi)的染色質(zhì)與胞質(zhì)內(nèi)的核糖體著紫藍(lán)色；伊紅為酸性染料,，主要使細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞外基質(zhì)中的成分著紅色,。去氧核糖核酸（DNA）兩條鏈上的磷酸基向外，帶負(fù)電荷,，呈酸性,，很容易與帶正電荷的蘇木精堿性染料以離子鍵結(jié)合而被染色。蘇木精在堿性溶液中稱藍(lán)色,，所以細(xì)胞核被染成藍(lán)色,。伊紅Y是一種化學(xué)合成的酸性染料，在水中離解成帶負(fù)電荷的陰離子,，與蛋白質(zhì)的氨基正電荷的陽離子結(jié)合使胞漿染色,，細(xì)胞漿、紅細(xì)胞,、肌肉,、結(jié)締組織、嗜伊紅顆粒等被染成不同程度的紅色或粉紅色,，與藍(lán)色的細(xì)胞核形成鮮明對(duì)比,。伊紅是細(xì)胞漿的良好染料。由于組織或細(xì)胞的不同成分對(duì)蘇木精的親和力不同及染色性質(zhì)不一樣,。經(jīng)蘇木精染色后,，細(xì)胞核及鈣鹽粘液等呈藍(lán)色，可用鹽酸酒精分化和弱堿性溶液顯藍(lán),，如處理適宜,，可使細(xì)胞核著清楚的深藍(lán)色，胞漿等其它成分脫色,。再利用胞漿染料伊紅染胞漿,，使胞漿的各種不同成分又呈現(xiàn)出深淺不同的粉紅色。故各種組織或細(xì)胞成分與病變的一般形態(tài)結(jié)構(gòu)特點(diǎn)均可顯示出來,。HE染色的基本原理和結(jié)果分析,。甘肅專業(yè)的HE染色檢測(cè)

科研常備實(shí)驗(yàn)操作之HE染色。甘肅專業(yè)的HE染色檢測(cè)

HE染色骨組織的處理方式：組織里存有鈣鹽可妨礙用常規(guī)方法制作良好切片,。骨組織及鈣化病灶,，經(jīng)過固定后，需要先將鈣鹽除去使組織軟化,，才能進(jìn)行常規(guī)切片,。如果脫鈣不全,，則切片容易撕開或碎裂，損傷切片刀刀刃,。脫去鈣鹽的過程，稱為脫鈣,。骨組織固定24小時(shí)后,，鋸下不超過0.5cm厚的薄骨片，以4%甲醛溶液固定后,，進(jìn)行脫鈣,。骨組織過厚則需延長脫鈣時(shí)間，但長時(shí)間浸于強(qiáng)酸會(huì)影響切片染色效果,。取材骨組織固定于10%甲醛溶液24小時(shí)后再鋸取厚度約0.5cm骨片固定以10%甲醛溶液固定2天脫鈣將組織置于脫鈣劑中,，每日更換新鮮液，直至組織軟化為止除酸流水沖洗24小時(shí)脫水,、浸蠟,、切片進(jìn)行常規(guī)脫水、透明,、浸蠟,、切片南京英瀚斯，專業(yè)的病理染色實(shí)驗(yàn)服務(wù)平臺(tái),。甘肅專業(yè)的HE染色檢測(cè)