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廣東比較好的HE染色分析

來源: 發(fā)布時(shí)間:2025-05-03

HE染色攻略:HE染色又稱為蘇木精-伊紅染色,,染色后組織或細(xì)胞可以借助普通光學(xué)顯微鏡觀察與鑒別細(xì)胞凋亡與細(xì)胞壞死的一種染色方法,。這種方法適用范圍***,對(duì)組織細(xì)胞的各種成分都可著色,,便于***觀察組織構(gòu)造,,而且適用于各種固定液固定的材料,染色后不易褪色可長(zhǎng)期保存,。經(jīng)過HE染色,,細(xì)胞核被蘇木素染成藍(lán)紫色,細(xì)胞質(zhì)被伊紅染色呈粉紅色,??梢杂^察細(xì)胞結(jié)構(gòu),、組織層次等等。首先切片組織是否完整,,組織有無損傷,;然后看切片有無刀痕;***細(xì)胞核是否清晰可見,,胞核與包漿要對(duì)比鮮明。HE染色需要哪些材料及實(shí)驗(yàn)步驟,。廣東比較好的HE染色分析

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HE染色注意事項(xiàng):1,、染色時(shí)調(diào)節(jié)pH值很重要。如果組織塊在福爾馬林中固定時(shí)間長(zhǎng),,組織酸化而影響細(xì)胞核著色,。因此,要在自來水中沖洗時(shí)間長(zhǎng)一些或在飽和碳酸鋰水溶液中處理10-30min,,這樣可以使細(xì)胞核著色較深,。染伊紅時(shí)胞漿著色不佳,可在伊紅溶液中滴加1-2滴冰醋酸,。2,、切片染蘇木精后,分色這一步是關(guān)鍵,,應(yīng)在顯微鏡下控制進(jìn)行,,一般以細(xì)胞核染色清楚(晰)而細(xì)胞質(zhì)基本無色為佳。如果過分延長(zhǎng)分色時(shí)間將導(dǎo)致染色太淺,,應(yīng)重新染色后再行分色,。3、切片經(jīng)酒精脫水后,,入二甲苯時(shí)可出現(xiàn)白色不透明狀態(tài),,此為脫水不徹底,應(yīng)將切片退回?zé)o水酒精,,更換酒精,、二甲苯,以求徹底脫水與透明,。4,、在染色過程中不要讓切片干燥,以免切片收縮,、變形,,影響神經(jīng)元形態(tài)。5,、切片從二甲苯取出或進(jìn)入二甲苯前,,切片周邊均應(yīng)擦干凈或吸干多余水分,。6、***封固時(shí),,要用中性樹脂,,防止日后褪色,蓋片要選大于組織塊的面積,,如漏出一部分不久將會(huì)褪色,,所用樹脂濃度要適當(dāng),樹脂封固時(shí)不能有氣泡,。山西推薦的HE染色外包腎臟組織HE染色如何觀察,。

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HE染色結(jié)果判讀:細(xì)胞核被蘇木精染成鮮明的藍(lán)色,軟骨基質(zhì),、鈣鹽顆粒呈深藍(lán)色,,粘液呈灰藍(lán)色。細(xì)胞漿被伊紅染成深淺不同的粉紅色至桃紅色,,胞漿內(nèi)嗜酸性顆粒呈反光強(qiáng)的鮮紅色,。膠原纖維呈淡粉紅色,彈力纖維呈亮粉紅色,,紅血球呈橘紅色,,蛋白性液體呈粉紅色。著色狀況與組織或細(xì)胞的種類有關(guān),,也隨其生活周期及病理變化而改變,。例如,細(xì)胞在新生時(shí)期胞漿對(duì)伊紅著色較淡或輕度嗜堿,,當(dāng)其衰老時(shí)或發(fā)生退行性變則呈現(xiàn)嗜伊紅濃染,。膠原纖維在老化和出現(xiàn)透明變性時(shí),伊紅著色由淺變深,。H-E染色評(píng)定標(biāo)準(zhǔn):(1)切片完整,,厚度4-6微米,厚薄均勻,,無皺褶無刀痕,;(2)染色核漿分明,紅藍(lán)適度,,透明潔凈,,封裱美觀。

HE染色知識(shí)點(diǎn)1:對(duì)送檢組織標(biāo)本的要求送檢組織標(biāo)本在手術(shù)切除或活檢后應(yīng)當(dāng)立即放入4%中性緩沖甲醛溶液中固定,。尸檢標(biāo)本應(yīng)當(dāng)盡量在死亡后盡早取材固定,。送檢組織需要全部取材的,應(yīng)當(dāng)在送檢單上注明,,有特殊要求(如細(xì)菌培養(yǎng),、解釋道化學(xué)分析等)應(yīng)當(dāng)事先聯(lián)系,,并且在標(biāo)本未固定前進(jìn)行處理。知識(shí)點(diǎn)2:組織取材要求在對(duì)送檢組織標(biāo)本進(jìn)行詳細(xì)檢查的基礎(chǔ)上,,根據(jù)診斷的需要,,確定取材的部位和塊數(shù)。切取的組織應(yīng)當(dāng)按照不同的部位分別給予不同的編號(hào)或標(biāo)記,,以便鏡檢時(shí)核對(duì),。另外,盡可能在取材前對(duì)有意義的標(biāo)本的表面及剖面鏡下攝影,,并編號(hào)存檔南京英瀚斯,,專業(yè)的病理染色實(shí)驗(yàn)服務(wù)平臺(tái)。什么是HE染色,,HE染色實(shí)驗(yàn)的目的。

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HE染色等常規(guī)染色,,組化或是熒光優(yōu)先推薦做石蠟切片,。原因:石蠟切片對(duì)組織的形態(tài)保存比冰凍切片好,并且對(duì)抗原基本無影響,。脂質(zhì)染色(油紅O染**odipy染色,,尼羅紅染色)必須做冰凍切片,不能做石蠟切片,。以下染色必須要新鮮或冷凍組織冰凍切片:ROS染**-半乳糖甘酶染色,,ATP染色,膽固醇染色,。如果標(biāo)本已經(jīng)放在-80°冰箱冷凍了之后又想要做石蠟切片,,將標(biāo)本取出來千萬不要解凍直接放于固定液內(nèi)固定(在固定液內(nèi)邊解凍邊固定)。組織形態(tài)結(jié)構(gòu)保存完好順序:新鮮組織立即投入固定液內(nèi)固定石蠟切片>組織-80°冷凍后投入固定液內(nèi)固定石蠟切片>新鮮組織立即投入固定液內(nèi)固定冰凍切片>組織-80°冷凍后直接冰凍切片,。石蠟組織切片的HE染色,。河北推薦的HE染色多少錢

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HE染色觀察細(xì)胞凋亡,,凋亡檢測(cè)中形態(tài)學(xué)方法是**直觀,、可靠的方法之一。對(duì)組織和各種細(xì)胞進(jìn)行染色后,,在光學(xué)顯微鏡,、熒光顯微鏡或電子顯微鏡下觀察,通過觀察細(xì)胞的形態(tài)或染色的類型來判斷凋亡的發(fā)生與否,。細(xì)胞涂片或細(xì)胞甩片的制備:對(duì)于貼壁細(xì)胞,,可將蓋玻片放于培養(yǎng)器皿中,讓培養(yǎng)細(xì)胞長(zhǎng)于玻片上,,然后用藥物誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡后取出,,用4%多聚甲醛固定5min,。對(duì)于懸浮細(xì)胞,用藥物誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡后,,離心1000r/min收集細(xì)胞,,用PBS洗2次,收集調(diào)整細(xì)胞數(shù)為1X105/ml,,涂片或用離心甩片,,用4%多聚甲醛固定5min;在光學(xué)顯微鏡下,,貼壁細(xì)胞由原來的梭形或多角形變小,、變圓,核呈藍(lán)色或藍(lán)黑色,,胞漿呈淡紅色,,核固縮、破碎,,形成凋亡小體等,。懸浮細(xì)胞,整個(gè)細(xì)胞皺縮,,核固縮,,破碎,形成凋亡小體,,染色質(zhì)顏色加深等,。廣東比較好的HE染色分析