HE染色實驗步驟：（1）樣品制備：對于貼壁生長細胞,，胰酶消化,，調(diào)整細胞濃度約1×105/ml，滴加于蓋玻片上(置于6孔板中),，培養(yǎng)相應(yīng)時間后,，取出細胞爬片，用PBS洗滌3次,。（2）樣品固定：95%乙醇固定20min,，PBS洗滌2次，每次1min,。（3）染核：蘇木素染液染色2-3min,，自來水洗滌。（4）分色：鏡下觀察,，若細胞核染色過深，用1%鹽酸酒精溶液分色數(shù)秒,，自來水洗滌,。（5）染胞質(zhì)：浸入伊紅染液染色1min，自來水洗滌,。（6）吹干或自然晾干細胞爬片后,，中性樹膠封片。若細胞用4%多聚甲醛固定,，則染色時間相應(yīng)延長,，蘇木素染色12-15min，伊紅5min即可HE染色,，南京英瀚斯,，專業(yè)的實驗外包公司。浙江靠譜的HE染色

HE染色伊紅溶液中加入少量的冰醋酸(一般小于10%就行),，可改變組織等電點,，促進伊紅與胞漿蛋白質(zhì)結(jié)合，其本身不參與染色的反應(yīng),。當(dāng)蘇木素染色效能極高,，很短時間就導(dǎo)致核漿共染時,，可適當(dāng)?shù)靥砑颖姿?一般不超過2%)，抑制蘇木素染色效能,，方便控制染色時間,，同時也能提高蘇木素染色的清晰度。現(xiàn)在有商用的HE染色液賣,，但是質(zhì)量參差不齊,。如果課題組較大，完全可以自己配制,，效果也挺好,。配制為乙酸濃度5%-7.5%和鹽酸濃度為0.5%-1%的蘇木素溶液放置一周，即可完全成熟,，染色效果好,，氧化膜和結(jié)晶都很少(一般蘇木素中酸度越低越容易產(chǎn)生氧化膜和結(jié)晶，這也是提示更換蘇木素的標志之一),。內(nèi)蒙古病理HE染色檢測HE染色規(guī)范化流程及注意事項,？

HE染色：在組織病理學(xué)中，蘇木素-伊紅染色是一種日常使用比較普遍的常規(guī)染色方法,。常規(guī)蘇木素染色的對比染色是用伊紅,，也有采用焰紅，因為焰紅比伊紅色澤更鮮明,，還有采用橘黃G,，比布里希猩紅，波爾多紅等作為對比染色,。伊紅是比較常用的胞質(zhì)染料,，本身溶于醇而不溶于水，為磚紅色粉末狀或醬紅色結(jié)晶,。配方：伊紅Y（水溶）0.5-1g,，蒸餾水99ml。如果取用伊紅Y（醇溶性）應(yīng)當(dāng)溶于99ml 75%或95%的乙醇中,。如果在伊紅液中加入0.5ml冰醋酸,，可以加速其染色過程，使得胞質(zhì)的色澤更加艷麗,。結(jié)果是細胞核呈藍色,，胞質(zhì)、肌肉,、結(jié)締組織,、紅細胞和嗜伊紅顆粒呈不同程度的紅色。鈣鹽和各種微生物也可染成藍色或紫藍色。

HE染色等常規(guī)染色,，組化或是熒光優(yōu)先推薦做石蠟切片,。原因：石蠟切片對組織的形態(tài)保存比冰凍切片好，并且對抗原基本無影響,。脂質(zhì)染色（油紅O染**odipy染色,，尼羅紅染色）必須做冰凍切片，不能做石蠟切片,。以下染色必須要新鮮或冷凍組織冰凍切片：ROS染**-半乳糖甘酶染色,，ATP染色，膽固醇染色,。如果標本已經(jīng)放在-80°冰箱冷凍了之后又想要做石蠟切片,，將標本取出來千萬不要解凍直接放于固定液內(nèi)固定（在固定液內(nèi)邊解凍邊固定）。組織形態(tài)結(jié)構(gòu)保存完好順序：新鮮組織立即投入固定液內(nèi)固定石蠟切片＞組織-80°冷凍后投入固定液內(nèi)固定石蠟切片＞新鮮組織立即投入固定液內(nèi)固定冰凍切片＞組織-80°冷凍后直接冰凍切片,。冰凍切片是否可以做HE染色,？

HE染色細胞質(zhì)過染分析及應(yīng)對原因：（1）伊紅染色液濃度太高，特別是焰紅燃料,、四溴四氯熒光素鈉的存在,；（2）切片在伊紅染色時間過長；（3）切片在伊紅染色后經(jīng)乙醇脫水步驟時過的太快,，而使乙醇分化伊紅的作用不能產(chǎn)生,。對策：適當(dāng)稀釋伊紅染色液，減少伊紅染色時間,，或者使切片在乙醇脫水等步驟時,，停留時間相對均勻。同樣,，也要檢查切片的厚度是否合適,。切片中出現(xiàn)藍黑色沉淀物分析及應(yīng)對原因：蘇木精染色液中的金屬膜，黏附在玻片上,。對策：每天染色前仔細過濾蘇木精染色液，或建議使用半氧化蘇木精染色液,，如Gill蘇木精染色液,可以避免過多的金屬膜產(chǎn)生,。HE染色(脫蠟、水化,、染色,、脫水、封片) - 實驗方法,。廣東HE染色分析

脾臟組織HE染色如何觀察,。浙江靠譜的HE染色

HE染色全名蘇木精—伊紅染色法，屬于化學(xué)染色法,，其主要依靠蘇木精染液為堿性,，主要使細胞核內(nèi)的染色質(zhì)與胞質(zhì)內(nèi)的核糖體著紫藍色,；伊紅為酸性染料，主要使細胞質(zhì)和細胞外基質(zhì)中的成分著紅色,。實驗過程：1,、石蠟切片脫蠟至水：依次將切片放入二甲苯Ⅰ20min-二甲苯Ⅱ20min-無水乙醇Ⅰ5min-無水乙醇Ⅱ5min-75%酒精5min，自來水洗,。2,、蘇木素染色：切片入蘇木素染液染3-5min，自來水洗,，分化液分化,，自來水洗，返藍液返藍,，流水沖洗,。3、伊紅染色：切片依次入85%,、95%的梯度酒精脫水各5min,，入伊紅染液中染色5min。4,、脫水封片：切片依次放入無水乙醇I5min-無水乙醇II5min-無水乙醇Ⅲ5min-二甲Ⅰ5min-二甲苯Ⅱ5min透明,，中性樹膠封片。5,、顯微鏡鏡檢,，圖像采集分析。結(jié)果判讀：細胞核呈藍色,，細胞質(zhì)呈紅色浙江靠譜的HE染色