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HE染色全名蘇木精—伊紅染色法,,屬于化學染色法,,其主要依靠蘇木精染液為堿性,主要使細胞核內(nèi)的染色質(zhì)與胞質(zhì)內(nèi)的核糖體著紫藍色,;伊紅為酸性染料,,主要使細胞質(zhì)和細胞外基質(zhì)中的成分著紅色。實驗過程:1,、石蠟切片脫蠟至水:依次將切片放入二甲苯Ⅰ20min-二甲苯Ⅱ20min-無水乙醇Ⅰ5min-無水乙醇Ⅱ5min-75%酒精5min,,自來水洗。2,、蘇木素染色:切片入蘇木素染液染3-5min,,自來水洗,分化液分化,,自來水洗,,返藍液返藍,流水沖洗,。3,、伊紅染色:切片依次入85%、95%的梯度酒精脫水各5min,,入伊紅染液中染色5min,。4、脫水封片:切片依次放入無水乙醇I5min-無水乙醇II5min-無水乙醇Ⅲ5min-二甲Ⅰ5min-二甲苯Ⅱ5min透明,,中性樹膠封片,。5、顯微鏡鏡檢,,圖像采集分析,。結(jié)果判讀:細胞核呈藍色,細胞質(zhì)呈紅色脾臟組織HE染色如何觀察,。遼寧HE染色公司
HE染色知識點1:對送檢組織標本的要求送檢組織標本在手術(shù)切除或活檢后應(yīng)當立即放入4%中性緩沖甲醛溶液中固定,。尸檢標本應(yīng)當盡量在死亡后盡早取材固定。送檢組織需要全部取材的,,應(yīng)當在送檢單上注明,,有特殊要求(如細菌培養(yǎng)、解釋道化學分析等)應(yīng)當事先聯(lián)系,,并且在標本未固定前進行處理,。知識點2:組織取材要求在對送檢組織標本進行詳細檢查的基礎(chǔ)上,根據(jù)診斷的需要,,確定取材的部位和塊數(shù),。切取的組織應(yīng)當按照不同的部位分別給予不同的編號或標記,以便鏡檢時核對,。另外,,盡可能在取材前對有意義的標本的表面及剖面鏡下攝影,并編號存檔南京英瀚斯,,專業(yè)的病理染色實驗服務(wù)平臺,。湖北病理HE染色檢測讓您放心的實驗外包公司,專業(yè)HE染色實驗服務(wù)平臺,。
HE染色多聚甲醛保存組織的注意事項:多聚甲醛放置過久其中的醛基可能會被氧化為酸,,使溶液pH降低,從而影響染色,。不同細胞或組織樣品所需的固定時間有所不同,,應(yīng)當根據(jù)細胞或組織的種類以及組織塊的大小來調(diào)整固定時間。多聚甲醛雖然作用溫和,,但能硬化組織,,固定時間過久會導致組織變脆,切片時易碎,。因此固定時間通常不宜超過24小時,。多聚甲醛可長期存在于固定過的細胞或組織樣品中,固定完成后用適當?shù)南礈煲夯蛩疀_洗數(shù)小時仍會有殘留,,因此后續(xù)實驗結(jié)果如果受醛基影響,,須盡量洗去殘留的多聚甲醛。醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基,,使抗原決定簇的三維構(gòu)象出現(xiàn)空間障礙,。分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結(jié)構(gòu)可能部分或完全掩蓋某些抗原決定簇,使之不能充分暴露,,可造成假陰性的染色,,影響免疫組化結(jié)果,。因此,4%多聚甲醛固定的細胞或組織樣品在進行免疫組化檢測時,,有時需要對抗原先進行修復(fù),,然后才能進行免疫染色等后續(xù)操作。
HE染色觀察肝臟HE染色切片,,首先要在顯微鏡下找到肝臟的標志性結(jié)構(gòu)——肝小葉,。顯微鏡首先調(diào)4倍物鏡,調(diào)準焦螺旋至視野清晰,,可以看到肝小葉結(jié)構(gòu),。人的肝小葉之間結(jié)締組織少,小葉分隔不明顯,,但動物如豬或小鼠,,其肝小葉分界非常明顯。肝小葉**有**靜脈,,在橫切片上顯示為空洞,。肝小葉之間為將物鏡調(diào)制10倍或20倍,就可以清楚地看到肝小葉結(jié)構(gòu),。肝細胞以**靜脈為中心向周圍放射狀排列,,稱為肝板。一般在20倍物鏡下可以清晰看到肝細胞,。20倍物鏡下,,肝細胞內(nèi)染色為藍色的是細胞核,細胞核大而圓,,居中,,異染色質(zhì)少而著色淺,能清晰看到核仁,。肝細胞胞質(zhì)豐富,,多成嗜酸性,當?shù)鞍踪|(zhì)合成旺盛時,,胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)散在的嗜堿性物質(zhì),。肝細胞內(nèi)有豐富的細胞器比如溶酶體、高爾基體,、內(nèi)質(zhì)網(wǎng),,等等,但是在光鏡下是無法看到的,,需要在電鏡下才能觀察到,。當然,肝小葉內(nèi)除了肝細胞,還有膽小管,、肝血竇,、肝巨噬細胞等組織形態(tài),但是在HE染色時并不容易觀察到,。做肝臟HE染色切片主要目的一般都是為了觀察肝細胞形態(tài)是否完整,、胞核有無增大、肝小葉形態(tài)是否完整,,以檢測藥物等刺激因素對肝臟的損傷作用。海馬組織HE染色如何觀察,。
HE染色等常規(guī)染色,,組化或是熒光優(yōu)先推薦做石蠟切片。原因:石蠟切片對組織的形態(tài)保存比冰凍切片好,,并且對抗原基本無影響,。脂質(zhì)染色(油紅O染**odipy染色,尼羅紅染色)必須做冰凍切片,,不能做石蠟切片,。以下染色必須要新鮮或冷凍組織冰凍切片:ROS染**-半乳糖甘酶染色,ATP染色,,膽固醇染色,。如果標本已經(jīng)放在-80°冰箱冷凍了之后又想要做石蠟切片,將標本取出來千萬不要解凍直接放于固定液內(nèi)固定(在固定液內(nèi)邊解凍邊固定),。組織形態(tài)結(jié)構(gòu)保存完好順序:新鮮組織立即投入固定液內(nèi)固定石蠟切片>組織-80°冷凍后投入固定液內(nèi)固定石蠟切片>新鮮組織立即投入固定液內(nèi)固定冰凍切片>組織-80°冷凍后直接冰凍切片,。骨組織HE染色的操作流程。江蘇病理HE染色
HE染色是常見的病理染色,,是比較基礎(chǔ)是病理染色之一,。遼寧HE染色公司
HE染色觀察細胞凋亡,凋亡檢測中形態(tài)學方法是**直觀,、可靠的方法之一,。對組織和各種細胞進行染色后,在光學顯微鏡,、熒光顯微鏡或電子顯微鏡下觀察,,通過觀察細胞的形態(tài)或染色的類型來判斷凋亡的發(fā)生與否。細胞涂片或細胞甩片的制備:對于貼壁細胞,,可將蓋玻片放于培養(yǎng)器皿中,,讓培養(yǎng)細胞長于玻片上,然后用藥物誘導細胞凋亡后取出,,用4%多聚甲醛固定5min,。對于懸浮細胞,用藥物誘導細胞凋亡后,離心1000r/min收集細胞,,用PBS洗2次,,收集調(diào)整細胞數(shù)為1X105/ml,涂片或用離心甩片,,用4%多聚甲醛固定5min,;在光學顯微鏡下,貼壁細胞由原來的梭形或多角形變小,、變圓,,核呈藍色或藍黑色,胞漿呈淡紅色,,核固縮,、破碎,形成凋亡小體等,。懸浮細胞,,整個細胞皺縮,核固縮,,破碎,,形成凋亡小體,染色質(zhì)顏色加深等,。遼寧HE染色公司