光學(xué)相干斷層成像是一種基于低相干光干涉原理的成像技術(shù),,具有高分辨率,、非侵入性和實(shí)時(shí)成像等特點(diǎn)。在紡錘體卵冷凍研究中,,OCT技術(shù)可用于觀察卵母細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)的細(xì)微變化,,包括紡錘體的形態(tài)和位置。雖然目前OCT技術(shù)在紡錘體成像方面的應(yīng)用還較為有限,,但隨著技術(shù)的不斷發(fā)展和完善,,相信未來OCT將在紡錘體卵冷凍研究中發(fā)揮更加重要的作用。雖然MRI和超聲波成像在生殖醫(yī)學(xué)中主要用于軟組織的成像,,如子宮,、卵巢等病變檢測(cè),,但它們?cè)诩忓N體卵冷凍研究中的應(yīng)用也值得探討。隨著技術(shù)的不斷進(jìn)步,,高分辨率MRI和超聲波成像技術(shù)可能會(huì)實(shí)現(xiàn)對(duì)卵母細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)的更精細(xì)觀察,。紡錘體微管的動(dòng)態(tài)變化是細(xì)胞對(duì)外界刺激響應(yīng)的一部分。香港紡錘體透明帶
什么是紡錘體,?它有多重要,?
紡錘體主要由微管蛋白組成,微管蛋白是一種含有α和β亞單位的異二聚體,。紡錘體不是一成不變的,,常常處于組裝和去組裝的動(dòng)態(tài)變化過程中,一般在細(xì)胞分裂的中,、后期,,紡錘體結(jié)構(gòu)較為典型。紡錘體主要有兩個(gè)作用:其一,,排列與分配染色體,;其二,決定細(xì)胞胞質(zhì)分裂的分裂面,。紡錘體的完整性決定了染色體分裂過程在時(shí)間和空間上的準(zhǔn)確性,。紡錘體就像一位聰明的大力士的雙手,在細(xì)胞分裂過程中,,能精細(xì)的將等位染色體平均拉向細(xì)胞的兩極,,確保分裂后的2個(gè)子細(xì)胞中的染色體數(shù)目相等。但是,,如果這個(gè)大力士多了一只或幾只手,,染色體的分配將紊亂,導(dǎo)致非整倍體,。紡錘體損傷的增加多見于高齡婦女,,或接觸某些化學(xué)物質(zhì)的卵母細(xì)胞。
在細(xì)胞分裂過程中,,紡錘體對(duì)卵母細(xì)胞染色體的平衡,、運(yùn)動(dòng)、分配,、和極體的排出非常關(guān)鍵,。卵母細(xì)胞成熟過程中的兩次減數(shù)分裂形成兩次紡錘體,卵母細(xì)胞受精,、雌雄原核融合后又會(huì)形成有絲分裂紡錘體。 美國哺乳動(dòng)物紡錘體起偏器紡錘體微管的正極朝向細(xì)胞兩極,,負(fù)極則靠近染色體,。
卵母細(xì)胞冷凍保存主要采用兩種方法:慢速冷凍法和玻璃化冷凍法,。相較于傳統(tǒng)的慢速冷凍法,玻璃化冷凍法因其更高的解凍存活率和妊娠成功率而逐漸成為主流技術(shù),。玻璃化冷凍法的基本原理是將含有生物樣本的溶液在極短的時(shí)間內(nèi)(如幾分鐘內(nèi))冷卻至液氮溫度,,使溶液在凝固點(diǎn)以下形成無冰晶的半固體或固體狀態(tài)。這種方法避免了冰晶形成對(duì)細(xì)胞結(jié)構(gòu)的破壞,,從而減少了冷凍損傷,。在卵母細(xì)胞冷凍保存中,玻璃化冷凍法通過優(yōu)化冷凍保護(hù)劑的濃度和冷凍速率,,使卵母細(xì)胞在冷凍過程中保持其結(jié)構(gòu)的完整性,。
液晶偏振光顯微鏡是一種將液晶可變減速器、電子成像及數(shù)碼成像技術(shù)結(jié)合起來的成像系統(tǒng),,能夠觀測(cè)到具有雙折性特征的細(xì)胞結(jié)構(gòu),,如紡錘體和透明帶。Polscope成像系統(tǒng)無需對(duì)細(xì)胞進(jìn)行固定和染色,,因此能夠評(píng)估卵母細(xì)胞的質(zhì)量與紡錘體,、透明帶等的相關(guān)性。在紡錘體卵冷凍研究中,,Polscope成像系統(tǒng)可用于實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)冷凍過程中紡錘體的形態(tài)變化,,評(píng)估冷凍保護(hù)劑的效果和冷凍速率對(duì)紡錘體的影響。此外,,解凍后也可利用Polscope成像系統(tǒng)評(píng)估紡錘體的恢復(fù)情況和穩(wěn)定性,,從而篩選出高質(zhì)量的卵母細(xì)胞進(jìn)行后續(xù)操作,。紡錘體微管的動(dòng)態(tài)不穩(wěn)定性是其功能的基礎(chǔ),。
在生殖醫(yī)學(xué)領(lǐng)域,,卵母細(xì)胞冷凍保存技術(shù)作為輔助生殖技術(shù)的重要組成部分,,近年來取得了進(jìn)展,。尤其是針對(duì)成熟卵母細(xì)胞紡錘體的冷凍保存研究,,不僅關(guān)乎女性生育能力的保存,,還涉及到遺傳學(xué)的穩(wěn)定性和安全性,。成熟卵母細(xì)胞,,即處于第二次減數(shù)分裂中期(MII期)的卵母細(xì)胞,,其內(nèi)部包含一個(gè)高度復(fù)雜且精細(xì)的紡錘體結(jié)構(gòu)。紡錘體由微管組成,,這些微管通過動(dòng)態(tài)變化,,將染色體緊密地聯(lián)系在一起,并確保在細(xì)胞分裂過程中染色體的正確分離,。成熟卵母細(xì)胞的紡錘體對(duì)溫度變化和機(jī)械刺激極為敏感,,這使得其冷凍保存過程充滿了挑戰(zhàn)。紡錘體在細(xì)胞分裂末期逐漸解體,,為細(xì)胞質(zhì)分裂做準(zhǔn)備,。深圳輔助生殖紡錘體加熱臺(tái)
紡錘體微管的動(dòng)態(tài)變化是細(xì)胞分裂過程中引人注目的現(xiàn)象之一,。香港紡錘體透明帶
紡錘體觀測(cè)新技術(shù)提升“試管嬰兒”胚胎受精率
什么是紡錘體觀測(cè)儀?
紡錘體觀測(cè)儀是利用光線經(jīng)過雙折射性的物體時(shí)產(chǎn)生的光程差,,對(duì)卵母細(xì)胞內(nèi)的紡錘體進(jìn)行動(dòng)態(tài)及無創(chuàng)觀察的顯微觀測(cè)系統(tǒng),。
紡錘體觀測(cè)儀主要有什么用處?
紡錘體觀測(cè)儀主要用于ICSI注射時(shí)紡錘**置觀測(cè),,避免ICSI注射時(shí)對(duì)卵子的紡錘體損傷,。
目前的ICSI注射方法是:假定成熟的MII卵母細(xì)胞的紡錘體靠近***極體,通過定位***極**置于6點(diǎn)或12點(diǎn)方向,,在垂直于***極體的3點(diǎn)鐘方向注入精子,。但事實(shí)上,紡錘體的位置不是固定不變的,,***極體不能精細(xì)預(yù)測(cè)所有卵母細(xì)胞紡錘體的位置,,約39%的紡錘體并不能通過***極體預(yù)測(cè)。傳統(tǒng)的ICSI注射很可能損壞紡錘體,,若紡錘體損傷很可能導(dǎo)致卵母細(xì)胞死亡或染色體異常,。因此,在ICSI注射時(shí)對(duì)紡錘體進(jìn)行觀察,,對(duì)于ICSI操作和受精結(jié)局都有非常重要的意義,,可以顯著提高ICSI受精率,有大量文獻(xiàn)報(bào)道正常受精率在觀察到紡錘體的卵子中***高于未觀察到紡錘體的卵子(83.3% VS 77.2%),。
紡錘體儀還有什么作用,?
紡錘體觀測(cè)儀還可以對(duì)一代受精后的卵母細(xì)胞受精情況進(jìn)行評(píng)估,選擇未受精的卵母細(xì)胞進(jìn)行補(bǔ)救ICSI***,。 香港紡錘體透明帶