選擇合適的冷凍保護(hù)劑是減少冷凍損傷的關(guān)鍵,。然而，不同濃度的冷凍保護(hù)劑對(duì)MI期卵母細(xì)胞紡錘體的影響各異,，需要通過(guò)大量實(shí)驗(yàn)進(jìn)行優(yōu)化,。此外,，冷凍保護(hù)劑的滲透性和毒性也是需要考慮的因素。冷凍和解凍過(guò)程中的溫度控制、時(shí)間控制以及操作手法等都會(huì)對(duì)MI期卵母細(xì)胞的紡錘體造成影響,。因此,，需要不斷優(yōu)化冷凍和解凍程序，以減少對(duì)紡錘體的損傷,。近年來(lái),，研究者們通過(guò)不斷嘗試和優(yōu)化冷凍保護(hù)劑的配方，取得了進(jìn)展,。例如,，一些研究表明，使用高濃度的蔗糖作為冷凍保護(hù)劑可以提高M(jìn)I期卵母細(xì)胞的存活率和紡錘體穩(wěn)定性,。此外,，還有一些新型冷凍保護(hù)劑如乙二醇、丙二醇等也被應(yīng)用于MI期卵母細(xì)胞的冷凍保存中,。紡錘體微管與染色體上的動(dòng)粒結(jié)合,，形成穩(wěn)定的連接。香港成熟卵母細(xì)胞紡錘體兼容大部分顯微鏡

在核移植過(guò)程中,，紡錘體的穩(wěn)定性是首要考慮的問(wèn)題,。冷凍和解凍過(guò)程中的溫度變化和冷凍保護(hù)劑的毒性都可能對(duì)紡錘體造成損傷，導(dǎo)致染色體分離異常,，進(jìn)而影響胚胎發(fā)育,。因此，如何在冷凍過(guò)程中保持紡錘體的穩(wěn)定性,，是核移植紡錘體卵冷凍研究面臨的重要挑戰(zhàn),。體細(xì)胞核在移入去核卵母細(xì)胞后，需要經(jīng)歷復(fù)雜的重新編程過(guò)程,，以獲得全能性,。然而，這一過(guò)程受到多種因素的調(diào)控,，包括表觀遺傳修飾,、轉(zhuǎn)錄因子表達(dá)等。在冷凍過(guò)程中,，這些調(diào)控機(jī)制可能受到干擾,，導(dǎo)致重新編程失敗或異常，從而影響胚胎發(fā)育,。上海MII期紡錘體胚胎發(fā)育紡錘體在細(xì)胞分裂過(guò)程中展現(xiàn)出驚人的自我組裝能力,。

光學(xué)相干斷層成像是一種基于低相干光干涉原理的成像技術(shù)，具有高分辨率,、非侵入性和實(shí)時(shí)成像等特點(diǎn),。在紡錘體卵冷凍研究中，OCT技術(shù)可用于觀察卵母細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)的細(xì)微變化，包括紡錘體的形態(tài)和位置,。雖然目前OCT技術(shù)在紡錘體成像方面的應(yīng)用還較為有限,，但隨著技術(shù)的不斷發(fā)展和完善，相信未來(lái)OCT將在紡錘體卵冷凍研究中發(fā)揮更加重要的作用,。雖然MRI和超聲波成像在生殖醫(yī)學(xué)中主要用于軟組織的成像,，如子宮、卵巢等病變檢測(cè),，但它們?cè)诩忓N體卵冷凍研究中的應(yīng)用也值得探討,。隨著技術(shù)的不斷進(jìn)步，高分辨率MRI和超聲波成像技術(shù)可能會(huì)實(shí)現(xiàn)對(duì)卵母細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)的更精細(xì)觀察,。

紡錘體觀測(cè)新技術(shù)提升“試管嬰兒”胚胎受精率

什么是紡錘體觀測(cè)儀,？

      紡錘體觀測(cè)儀是利用光線經(jīng)過(guò)雙折射性的物體時(shí)產(chǎn)生的光程差，對(duì)卵母細(xì)胞內(nèi)的紡錘體進(jìn)行動(dòng)態(tài)及無(wú)創(chuàng)觀察的顯微觀測(cè)系統(tǒng),。

紡錘體觀測(cè)儀主要有什么用處,？

       紡錘體觀測(cè)儀主要用于ICSI注射時(shí)紡錘**置觀測(cè)，避免ICSI注射時(shí)對(duì)卵子的紡錘體損傷,。

       目前的ICSI注射方法是：假定成熟的MII卵母細(xì)胞的紡錘體靠近***極體,，通過(guò)定位***極**置于6點(diǎn)或12點(diǎn)方向，在垂直于***極體的3點(diǎn)鐘方向注入精子,。但事實(shí)上,，紡錘體的位置不是固定不變的，***極體不能精細(xì)預(yù)測(cè)所有卵母細(xì)胞紡錘體的位置,，約39%的紡錘體并不能通過(guò)***極體預(yù)測(cè),。傳統(tǒng)的ICSI注射很可能損壞紡錘體,，若紡錘體損傷很可能導(dǎo)致卵母細(xì)胞死亡或染色體異常,。因此，在ICSI注射時(shí)對(duì)紡錘體進(jìn)行觀察,，對(duì)于ICSI操作和受精結(jié)局都有非常重要的意義,，可以顯著提高ICSI受精率，有大量文獻(xiàn)報(bào)道正常受精率在觀察到紡錘體的卵子中***高于未觀察到紡錘體的卵子（83.3% VS 77.2%）,。

紡錘體儀還有什么作用,？

      紡錘體觀測(cè)儀還可以對(duì)一代受精后的卵母細(xì)胞受精情況進(jìn)行評(píng)估，選擇未受精的卵母細(xì)胞進(jìn)行補(bǔ)救ICSI***,。 紡錘體,，作為細(xì)胞分裂的“引擎”，驅(qū)動(dòng)著生命的延續(xù)與多樣性,。

紡錘體觀測(cè)儀在補(bǔ)救ICSI中的應(yīng)用

我們知道,，成熟的卵母細(xì)胞排出***極體。IVF加入精子后，精子會(huì)穿透層層障礙**終進(jìn)入卵子,，隨著時(shí)間的推移,，卵子的紡錘體會(huì)將染色單體拉向兩極，進(jìn)而排出第二極體,，再往后大約加精后9-16小時(shí),，雌雄原核會(huì)出現(xiàn)，而原核的出現(xiàn)才是受精的標(biāo)志,。但是對(duì)于那些沒有受精的卵子,，到了原核出現(xiàn)的時(shí)間窗，發(fā)現(xiàn)沒有受精時(shí)再去補(bǔ)救ICSI,，往往錯(cuò)過(guò)了卵子的比較好受精時(shí)間,，因?yàn)闆]有受精的卵子會(huì)在體外老化，即使受精,，胚胎的發(fā)育潛能也很低,。所以，我們?cè)诩泳蟮?-6小時(shí),，通過(guò)觀察第二極體的排出來(lái)初步判斷是否受精,，**的增加了那些受精障礙患者的受精率，也避免了卵子的老化,。

當(dāng)然,，偶爾也會(huì)出現(xiàn)錯(cuò)誤補(bǔ)救。文獻(xiàn)報(bào)道對(duì)IVF受精后的未排出第二極體的卵母細(xì)胞進(jìn)行ICSI補(bǔ)救,，實(shí)驗(yàn)組用紡錘體觀測(cè)儀觀察并統(tǒng)計(jì)紡錘體的數(shù)目,，82.7%含有一個(gè)紡錘體，17.3%含有兩個(gè)紡錘體,，并對(duì)含有一個(gè)紡錘體的卵母細(xì)胞進(jìn)行補(bǔ)救ICSI,；而對(duì)照組并未用紡錘體觀測(cè)儀觀察紡錘體，只對(duì)未排出第二極體的卵母細(xì)胞進(jìn)行補(bǔ)救ICSI,。結(jié)果發(fā)現(xiàn),，使用紡錘體觀測(cè)儀觀察紡錘體的數(shù)目能顯著提高正常受精率，降低多原核受精比率,。 紡錘體在細(xì)胞分裂中扮演關(guān)鍵角色,，確保遺傳物質(zhì)均等分配。上海核移植紡錘體透明帶

紡錘體微管的排列方向決定了染色體分離的方向,。香港成熟卵母細(xì)胞紡錘體兼容大部分顯微鏡

染色體

      當(dāng)細(xì)胞從間期進(jìn)入有絲分裂期,，間期細(xì)胞微管網(wǎng)絡(luò)解聚為游離的αβ-微管蛋白二聚體，再重組成紡錘體,，介導(dǎo)染色體的運(yùn)動(dòng),；分裂末期紡錘體微管解聚,，又重組形成細(xì)胞質(zhì)微管網(wǎng)絡(luò)。

      可分為：動(dòng)粒微管：連接染色體動(dòng)粒于兩極的微管,。

      極間微管：從兩極發(fā)出,，在紡錘體中部赤道區(qū)相互交錯(cuò)的微管。

      星體微管：中心體周圍呈輻射分布的微管,。

      染色體的運(yùn)動(dòng)依賴紡錘體微管的組裝和去組裝,。在這一過(guò)程中動(dòng)粒微管與動(dòng)粒之間的滑動(dòng)主要是依靠結(jié)合在動(dòng)粒部位的驅(qū)動(dòng)蛋白和動(dòng)力蛋白沿微管的運(yùn)動(dòng)來(lái)完成。極微管在紡錘體中部交錯(cuò),，有些分布在極微管之間特殊的雙極馬達(dá)蛋白,，其中2個(gè)馬達(dá)蛋白沿一條微管運(yùn)動(dòng)，另2個(gè)馬達(dá)結(jié)構(gòu)域沿另一條微管運(yùn)動(dòng),。由于2條微管分別來(lái)自二極,，故極性相反。當(dāng)雙極驅(qū)動(dòng)蛋白四聚體沿微管向正極運(yùn)動(dòng)時(shí),，紡錘體二極間距離延長(zhǎng),。反之紡錘體距離縮短。 香港成熟卵母細(xì)胞紡錘體兼容大部分顯微鏡