美國(guó)HamiltonThorne的TOXIVOS精子分析儀已經(jīng)被FDA和國(guó)內(nèi)外毒理學(xué)實(shí)驗(yàn)室所使用,。本試驗(yàn)研究目的對(duì)精子分析儀和血細(xì)胞計(jì)數(shù)板在大鼠附睪精子計(jì)數(shù)結(jié)果的比較驗(yàn)證,。方法選取三批次雄性SD大鼠60只,每批20只,對(duì)三批次雄鼠的精子計(jì)數(shù)進(jìn)行比較,。健康雄鼠通過(guò)戊巴比妥鈉麻醉實(shí)施安樂(lè)死后,取左側(cè)附睪尾稱重,將附睪尾部放入37℃預(yù)熱的含有M199培養(yǎng)液平皿中,剪碎附睪尾,放入培養(yǎng)箱中37℃孵育5min,然后吸取1份精子懸液,用M199培養(yǎng)液進(jìn)行一定倍數(shù)的稀釋,混勻后,取1滴稀釋液,滴入精子分析儀**載玻片上,將載玻片放入TOXIVOS精子分析儀載物臺(tái),進(jìn)行精子計(jì)數(shù),同時(shí)吸取稀釋后的精子懸液滴入血細(xì)胞計(jì)數(shù)板內(nèi),通過(guò)光學(xué)顯微鏡進(jìn)行計(jì)數(shù),比較兩種計(jì)數(shù)方法的差異性。結(jié)果***批次雄鼠精子分析儀和血細(xì)胞計(jì)數(shù)器的精子計(jì)數(shù)結(jié)果分別為70.2±33.2,61.0±27.1;第二批次雄鼠精子分析儀和血細(xì)胞計(jì)數(shù)器的精子計(jì)數(shù)結(jié)果分別為128.8±116.8,114.6±86.9;第三批次雄鼠精子分析儀和血細(xì)胞計(jì)數(shù)器的精子計(jì)數(shù)結(jié)果分別為165.9±91.7,140.0±59.6,。三個(gè)批次的精子分析儀和血細(xì)胞計(jì)數(shù)板的精子計(jì)數(shù)結(jié)果無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05),。結(jié)論精子分析儀是一種方便、可靠,、快速、高效的研究工具,在生殖毒理學(xué)研究中具有重要的應(yīng)用價(jià)值,。精子分析,，平均角位移（MAD）?：精子頭沿其曲線軌跡瞬時(shí)轉(zhuǎn)折角度的時(shí)均J對(duì)值?。山羊精子分析精子動(dòng)力分析

醫(yī)生為了鑒定男性生育能力,，常囑男方作精液檢查,，正常精液顏色為灰白色或乳白色。如節(jié)欲時(shí)間長(zhǎng)者,，可呈淡黃色,，若出現(xiàn)鮮紅色.暗紅色，則提示患者有炎癥或生殖道損傷,。每次排精量為2~6毫升,，常受排精次數(shù)與頻率的影響。新鮮精液呈稠厚膠凍狀,，1小時(shí)之內(nèi)應(yīng)液化為稀薄的液體,，用一根小玻璃棒插入精液中再提起，所形成的精液絲長(zhǎng)度一般不超過(guò)2厘米,，否則視為異常,。精液呈弱堿性，PH值為7.2~7.8,。正常精子數(shù)應(yīng)超過(guò)2000萬(wàn)/毫升,。排精后1小時(shí)內(nèi)活動(dòng)精＞=50%。世界衛(wèi)生組織推薦精子活動(dòng)力分為四級(jí)：0級(jí)：不活動(dòng),；1級(jí)：精子原地?cái)[動(dòng),；2級(jí)：有中等的前向運(yùn)動(dòng)；3級(jí)：前向運(yùn)動(dòng)活躍，快速直線運(yùn)動(dòng),。正常的精子活動(dòng)力為2~3級(jí)的精子＞=40%~50%.精子形態(tài)：畸形精子小于50%,。分析男性生育能力不能單從精液的一項(xiàng)指標(biāo)定論，應(yīng)對(duì)精子數(shù)量活力活動(dòng)率液化時(shí)間畸形率等多方面進(jìn)行綜合能力分析,。采集精液前5～7天內(nèi)必須停止性生活,，并且不得有**、夢(mèng)遺等情況,，還應(yīng)禁煙戒酒,，忌服對(duì)生精功能有影響的藥物等。精子分析VCLHamilton Thorne精子分析儀采用先進(jìn)的光學(xué)成像,，能夠?qū)崟r(shí)分析精子的動(dòng)力學(xué)參數(shù),，提供有效的精子質(zhì)量評(píng)估。

二,、生化及免疫學(xué)檢驗(yàn)：1,、精漿果糖測(cè)定【正常參考值】9.11-17.67mmol/L?！九R床意義】（1）精液果糖為0,，可見于先天性兩側(cè)輸精管及精囊腺缺如、兩側(cè)輸精管完全阻塞或逆行**,。（2）精液果糖降低,，常見于精囊炎和雄***分泌不足，果糖不足可導(dǎo)致精子運(yùn)動(dòng)能量缺乏,，甚至不易受孕,。2、精漿酸性磷酸酶測(cè)定【正常參考值】金氏法：＞255nmol·s-1/L【臨床意義】（1）精漿酸性磷酸酶含量增高,，常見于前列腺肥大或早期前列腺惡性**患者,。（2）精漿酸性磷酸酶含量降低，常見于前列腺炎患者,。（3）精漿酸性磷酸酶檢測(cè)是法醫(yī)鑒定有無(wú)精液**敏感的方法,。3、精漿頂體酶活性測(cè)定【正常參考值】36.72±21.43U/L,?！九R床意義】精子頂體酶活力與精子密度及精子頂體完整率呈正相關(guān)，其活力不足,，可導(dǎo)致男性不育,。4、精漿乳酸脫氫酶-X同功酶(LDH-X)測(cè)定【正常參考值】LDH-X***活性：2620±1340U/L,；LDH-X相對(duì)活性：≥0.426,?！九R床意義】LDH-X具有睪丸及精子的組織特異性，是精于運(yùn)動(dòng)獲能的關(guān)鍵酶,，該酶檢測(cè)可作為診斷男性不育有價(jià)值的指標(biāo),。睪丸萎縮患者LDH-X降低或消失，精子發(fā)生缺陷時(shí)無(wú)LDH-X形成,，少精或無(wú)精者可致LDH-X活性降低,。服用棉酚也可抑制此酶活性。

通過(guò)結(jié)果的生物學(xué)意義對(duì)結(jié)果質(zhì)量進(jìn)行評(píng)估?當(dāng)所有具生物學(xué)意義的參數(shù)在測(cè)試中表現(xiàn)出較小的可變性時(shí)則方法學(xué)可變性亦較低方法學(xué)可變性低則結(jié)果質(zhì)量就高,。CASA系統(tǒng)獲得的數(shù)值與直觀評(píng)估獲得的數(shù)值進(jìn)行分析和比較在精子數(shù)量和綜合運(yùn)動(dòng)性上具有較好的相關(guān)性而·131·中國(guó)優(yōu)生與遺傳雜志2002第10卷第6期DOI:10．13404／j．cnki．cjbhh．2002．06．091在前向運(yùn)動(dòng)精子百分率上的相關(guān)性較低］,。Holt等報(bào)道了在常規(guī)實(shí)驗(yàn)條件下采用五種不同的CASA系統(tǒng)對(duì)**參數(shù)值進(jìn)行比較，其結(jié)果為：采用同一個(gè)測(cè)定池由不同的操作者測(cè)定**參數(shù),；變異系數(shù)（CV）是29％?活動(dòng)精子比率的CV為24％?平均路徑速度（VAP）的CV為43?85％,。作者們指出該分析結(jié)果不應(yīng)看作是不同CASA系統(tǒng)間的工作情況的比較?實(shí)際上它揭示了操作者的錯(cuò)誤是差異的主要來(lái)源。目前有待于尋找進(jìn)一步的標(biāo)準(zhǔn)來(lái)評(píng)估CASA變量的結(jié)果質(zhì)量,。精子***的生物學(xué)功能是使卵細(xì)胞授精?因此用夫婦中的授精結(jié)果來(lái)考察精子運(yùn)動(dòng)性是合理的?只有在該基礎(chǔ)上能夠確定活動(dòng)性參數(shù)的重要性,。輔助生殖技術(shù)（授精I(xiàn)VF）的發(fā)展使檢測(cè)精子質(zhì)量與各參數(shù)間的關(guān)系的比較成為可能；同樣可以驗(yàn)證CASA測(cè)定結(jié)果與精子真實(shí)質(zhì)量間的相關(guān)性有利于CASA結(jié)果質(zhì)量的提高,。Hamilton Thorne精子分析儀具備快速和高效的分析功能,，能夠在短時(shí)間內(nèi)處理大量樣本，提高工作效率,。

前沿性檢查：目前不作為生育力低下男性初步評(píng)估的常規(guī)方法,。這一部分包括了非常專業(yè)化的,、主要用于研究的方法和其他新興檢測(cè)技術(shù),。有研究認(rèn)為，氧化應(yīng)激可能是影響人類精子功能和妊娠結(jié)局的重要因素,；新的證據(jù)也表明了精子DNA完整性和染色質(zhì)組裝與生育力的關(guān)系,。前沿性檢查一節(jié)中詳細(xì)介紹了精子氧化應(yīng)激和活性氧實(shí)驗(yàn)、精子染色質(zhì)檢測(cè)(苯胺藍(lán)和色霉素A3染色)的具體實(shí)驗(yàn)操作及討論,。手冊(cè)重寫了計(jì)算機(jī)輔助精子分析(CASA)部分,，強(qiáng)調(diào)了CASA對(duì)于檢測(cè)精子濃度的局限性與質(zhì)控要求，增加了CASA檢測(cè)精子超活化運(yùn)動(dòng)的內(nèi)容,。對(duì)精子跨膜離子流和轉(zhuǎn)運(yùn)的功能分析,，可更好地了解男性不育因素和男性生殖***疾病。為此,，手冊(cè)新增了檢測(cè)精子跨膜離子流和轉(zhuǎn)運(yùn)的內(nèi)容,。精子分析儀參數(shù)，精子頭側(cè)擺幅度（ALH）?：精子頭關(guān)于其平均路徑的側(cè)向位移幅度,。美國(guó)瀕危物種精子分析VCL

HAMILTON THORNE精子分析儀可分析參數(shù),，鞭打頻率（BCF）?：精子曲線路徑跨越其平均路徑的平均頻率,。山羊精子分析精子動(dòng)力分析

檢查具備條件受檢者，經(jīng)歷一段經(jīng)常排精過(guò)程后,，禁房事5－7天（上次排精到取標(biāo)本間隔時(shí)間至少不得少于100小時(shí)）,；[1]備大口有蓋清潔干燥容器一個(gè)，以**方式獲取精液,，一次全部射入容器,，蓋上蓋，記錄標(biāo)本離體時(shí)間,；貼身保溫,，30分鐘內(nèi)送到化驗(yàn)室，并向檢驗(yàn)員提供標(biāo)本取出時(shí)間,。精液常規(guī)觀察：精液總?cè)萘浚ê辽?，精子活?dòng)情況，精子密度（個(gè)/毫升）,，精液液化時(shí)間（標(biāo)本取出到精液液化的時(shí)間）,，不動(dòng)精子（個(gè)/高倍視野）等。見不動(dòng)精子,，須染色方可區(qū)分：不活動(dòng)的精子,、死精子、未成熟精子等,。找不到精子必須離心后檢驗(yàn),，仍然找不到精子；方可報(bào)告無(wú)精,。經(jīng)三次取樣化驗(yàn),，結(jié)果仍然找不到精子方可確認(rèn)無(wú)精子癥。山羊精子分析精子動(dòng)力分析