蛋白質(zhì)有哪些翻譯后修飾?作用機(jī)制和生物學(xué)功能是什么,?前體蛋白是沒(méi)有活性的,常常要進(jìn)行一個(gè)系列的翻譯后加工,,才能成為具有功能的成熟蛋白,。加工的類型是多種多樣的,,一般分為以下幾種:N-端fMet或Met的切除、二硫鍵的形成,、化學(xué)修飾和剪切,。當(dāng)合成蛋白質(zhì)時(shí),20種不同的氨基酸會(huì)組合成為蛋白質(zhì),。蛋白質(zhì)的翻譯后蛋白質(zhì)其他的生物化學(xué)官能團(tuán)(如醋酸鹽,、磷酸鹽、不同的脂類及碳水化合物)會(huì)附在蛋白質(zhì)上從而改變蛋白質(zhì)的化學(xué)性質(zhì),,或是造成結(jié)構(gòu)的改變(如建立雙硫鍵),,來(lái)擴(kuò)闊蛋白質(zhì)的功能。再者,,酶可以從蛋白質(zhì)的N末端移除氨基酸,,或從中間將肽鏈剪開(kāi)。舉例來(lái)說(shuō),,胰島素它會(huì)在建立雙硫鍵后被剪開(kāi)兩次,,并在鏈的中間移走多肽前體,而形成的蛋白質(zhì)包含了兩條以雙硫鍵連接的多肽鏈,。蛋白質(zhì)發(fā)生翻譯后修飾時(shí)其分子質(zhì)量會(huì)發(fā)生響應(yīng)的改變,,通過(guò)質(zhì)譜能夠精確測(cè)定蛋白質(zhì)或多肽的分子質(zhì)量。四川丙二?;揎椀鞍踪|(zhì)組學(xué)
蛋白質(zhì)學(xué)組翻譯后修飾分析:組蛋白是一類高度保守的蛋白質(zhì),,是染色質(zhì)的關(guān)鍵成分,是DNA包裝的結(jié)構(gòu)單位,。組蛋白的功能受其翻譯后修飾介導(dǎo),。組蛋白翻譯后修飾包括通過(guò)絲氨酸或蘇氨酸殘基的磷酸化,賴氨酸或精氨酸的甲基化,,賴氨酸的乙?;兔撘阴;?,賴氨酸的泛素化和磺?;葘?duì)組蛋白進(jìn)行的共價(jià)修飾。組蛋白這些修飾對(duì)于核完整性至關(guān)重要,,因?yàn)樗鼈兛梢哉{(diào)節(jié)染色質(zhì)結(jié)構(gòu)并募集參與基因調(diào)節(jié),、DNA修復(fù)和染色體濃縮的酶。組蛋白的翻譯后修飾大多位于N末端的尾巴上,,因?yàn)镹末端是蛋白質(zhì)中比較暴露和比較靈活的區(qū)域。分析組蛋白翻譯后修飾有助于探索組蛋白修飾與染色體濃縮,、DNA轉(zhuǎn)錄等生物功能之間的關(guān)系,。武漢蛋白質(zhì)糖基化修飾組學(xué)有哪些蛋白質(zhì)有哪些翻譯后修飾,?
蛋白質(zhì)修飾位點(diǎn)分析:基于LC-MS/MS分析能夠精確測(cè)定蛋白質(zhì)或多肽分子質(zhì)量這一特性,從而檢測(cè)蛋白質(zhì)或者多肽上位點(diǎn)發(fā)生何種修飾,??蓹z測(cè)修飾類型如下: 磷酸化、糖基化,、乙?;⒎核鼗?、丙?;⒍□,;?、丙二酰化,、戊二?;㈢牾,;?、單甲基化、二甲基化,、三甲基化,。1、磷酸化:信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo),、細(xì)胞周期,、生長(zhǎng)發(fā)育機(jī)理等;2,、糖基化:蛋白質(zhì)折疊,、更新以及免疫應(yīng)答等;3,、乙?;夯虮磉_(dá)調(diào)控、細(xì)胞凋亡,、細(xì)胞代謝,、蛋白質(zhì)穩(wěn)定性以及神經(jīng)退行性的病變等;4,、泛素化:細(xì)胞周期,、細(xì)胞凋亡、轉(zhuǎn)錄調(diào)控,、DNA修復(fù)以及信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)等,;5,、甲基化:染色質(zhì)結(jié)構(gòu)及轉(zhuǎn)錄調(diào)控等;6,、丙?;?/ 丙二酰化 / 戊二?;?/ 琥珀?;褐饕嬖谟诰€粒體和細(xì)菌中,與代謝過(guò)程密切相關(guān),。
蛋白翻譯后修飾:蛋白質(zhì)氨基酸序列的特定位置可以與化學(xué)基團(tuán)或者小分子量的蛋白共價(jià)結(jié)合從而發(fā)生蛋白質(zhì)翻譯后修飾(post-translational modifications,,PTMs)。翻譯后修飾是蛋白質(zhì)生物合成的一個(gè)步驟,,翻譯后多肽鏈在成為成熟的蛋白質(zhì)產(chǎn)品之前要經(jīng)過(guò)修飾,,PTMs的類型包括磷酸化、乙?;?、糖基化、泛素化和二硫鍵等等,,它導(dǎo)致蛋白質(zhì)組復(fù)雜性的大幅增加,。對(duì)于任何給定的蛋白質(zhì),各種各樣的PTMs提供了一種通過(guò)改變蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)和功能來(lái)促進(jìn)細(xì)胞快速變化的方法,。PTMs在信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo),、蛋白質(zhì)穩(wěn)定性和周轉(zhuǎn)率、蛋白質(zhì)與蛋白質(zhì)識(shí)別和相互作用以及空間定位中起著至關(guān)重要的作用,。乙?;揎検求w內(nèi)保守的可逆轉(zhuǎn)的蛋白修飾。
蛋白質(zhì)翻譯后修飾的檢測(cè)方法:質(zhì)譜是蛋白質(zhì)翻譯后修飾檢測(cè)的常用技術(shù)之一,,可以用于已知和未知的翻譯后修飾檢測(cè)。蛋白質(zhì)翻譯后修飾(post-translational modifications,,PTMs),,如磷酸化、乙?;?、泛素化、SUMO化,、糖基化等,,大幅度的增加了蛋白質(zhì)組的復(fù)雜性。檢測(cè)蛋白質(zhì)的翻譯后修飾,了解它們?nèi)绾喂ぷ?、影響蛋白質(zhì)組和調(diào)控基因組將極大地提高我們對(duì)遺傳學(xué)和表觀遺傳學(xué)的理解,。目標(biāo)蛋白的PTMs研究通常需要一個(gè)富集步驟,,因?yàn)樾揎椀鞍椎呢S度一般較低,。大多數(shù)PTMs檢測(cè)方法都是結(jié)合富集策略開(kāi)發(fā)的,以比較好的識(shí)別,、驗(yàn)證和研究目標(biāo)蛋白中PTMs的功能,。乙酰化修飾對(duì)細(xì)胞核內(nèi)轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子的刺激有著非常重要的作用,。武漢蛋白質(zhì)糖基化修飾組學(xué)有哪些
蛋白質(zhì)磷酸化修飾鑒定方法有免疫印跡技術(shù),。四川丙二酰化修飾蛋白質(zhì)組學(xué)
蛋白質(zhì)乙?;揎椊M學(xué)定量分析:1. SILAC細(xì)胞標(biāo)記,,組織/細(xì)胞破碎,提取,、提純目的蛋白質(zhì)(基于SILAC的乙?;揎椊M學(xué)定量)。2. 使用胰蛋白酶將目的蛋白酶解成多肽片段,。3. 對(duì)多肽片段進(jìn)行iTRAQ標(biāo)記(基于iTRAQ的乙?;揎椊M學(xué)定量)。4. 使用高效特異性乙?;贵w對(duì)乙?;揎楇亩芜M(jìn)行免疫富集。5. 使用LC-MS/MS對(duì)富集的乙?;亩芜M(jìn)行序列分析,。6. 數(shù)據(jù)分析,比對(duì)不同樣本中蛋白乙?;揎椝讲町?,并對(duì)產(chǎn)生變化的生物學(xué)意義進(jìn)行解釋。四川丙二?;揎椀鞍踪|(zhì)組學(xué)
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