特點不同1、CellCountingKit-8：靈敏度高，數(shù)據(jù)可靠,，重現(xiàn)性好；操作簡便,，省時省力；水溶性,，不需要換液,，尤其適合于懸浮細(xì)胞；無需放射性同位素和有機溶劑,，對細(xì)胞毒性低,；適合于高通量***篩選。2,、MTT法：特點是靈敏度高、經(jīng)濟,。三,、應(yīng)用不同1、CellCountingKit-8：主要用途為***篩選,、細(xì)胞增殖測定,、細(xì)胞毒性測定、**藥敏試驗,。2,、MTT法：***用于一些生物活性因子的活性檢測、大規(guī)模的抗*****篩選,、細(xì)胞毒性試驗以及**放射敏感性測定等,。化學(xué)名：2-(2-甲氧基-4-硝基苯基).江蘇cck8的價格

7,、若暫時不測定OD值,，可以向每孔中加入10μL0.1M的HCL溶液或者1%w/vSDS溶液，并遮蓋培養(yǎng)板避光保存在室溫條件下,。24小時內(nèi)測定,，吸光度不會發(fā)生變化。注意：如果待測物質(zhì)有氧化性或還原性的話,，可在加CCK之前更換新鮮培養(yǎng)基（除去培養(yǎng)基,，并用培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次，然后加入新的培養(yǎng)基），去掉***影響,。當(dāng)然***影響比較小的情況下,，可以不更換培養(yǎng)基，直接扣除培養(yǎng)基中加入***后的空白吸收即可,?；盍τ嬎悖罕４鏃l件：4℃避光保存一年有效，-20℃避光保存兩年有效,。江蘇cck8實驗結(jié)果計算CCK-8用途：***篩選,、細(xì)胞增殖測定、細(xì)胞毒性測定,、**藥敏試驗.

CKK-8原理

CellCountingKit,，CCK-8試劑含有WST-8（化學(xué)名：2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑單鈉鹽），是近年新開發(fā)的一種更新的水溶性四唑鹽檢測,，原理與WST-1類似：在電子載體1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓硫酸二甲酯（1-MethoxyPMS）的作用下被細(xì)胞線粒體中的脫氫酶還原成具有高度水溶性的橙黃色甲臜產(chǎn)物（Formazan）,。生成的甲臜物的數(shù)量與活細(xì)胞的數(shù)量成正比，用酶聯(lián)免疫分析儀測定其光吸收值可間接反映活細(xì)胞數(shù)量,，在一定細(xì)胞數(shù)量范圍內(nèi)甲臜形成的量與細(xì)胞數(shù)成正比,。

當(dāng)使用標(biāo)準(zhǔn)96孔板時，貼壁細(xì)胞的**小接種量至少為1000 個/孔(100μl培養(yǎng)基),。檢測白細(xì)胞時的靈敏度相對較低,，因此推薦接種量不低于2500 個/孔(100μl培養(yǎng)基)。酚紅和血清對CCK8法的檢測不會造成干擾,，可以通過扣除空白孔中本底的吸光度而消去,。

注意事項CCK8可以檢測大腸桿菌，但不能檢測酵母細(xì)胞,。在細(xì)胞增殖實驗每次測定的過程中需要避免細(xì)菌污染,，以免影響結(jié)果。CCK-8在0-5℃下能夠保存至少6個月,，在-20℃下避光可以保存1年,。當(dāng)在培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)時，培養(yǎng)板**外一圈的孔**容易干燥揮發(fā),，由于體積不準(zhǔn)確而增加誤差,。一般情況下，**外一圈的孔只加培養(yǎng)基,，不作為測定孔用,。在培養(yǎng)基中加入CCK8，培養(yǎng)一定的時間,，測定450 nm的吸光度即為空白對照,。 若細(xì)胞培養(yǎng)時間較長,，培養(yǎng)基顏色或 pH 發(fā)生變化，建議更換培養(yǎng)基后再加 CCK-8.

四,、方法及步驟：實驗一：細(xì)胞增殖分析1,、制備細(xì)胞懸液：細(xì)胞計數(shù)。2,、接種到96孔板中：根據(jù)合適的鋪板細(xì)胞數(shù)（約1-2×104）,，每孔約100ul細(xì)胞懸液，同樣的樣本可做4-6個重復(fù),。3,、37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)：細(xì)胞接種后貼壁大約需要培養(yǎng)4小時，如果不需要貼壁,，這步可以省去,。4、加入10ulCCK8：由于每孔加入CCK8量比較少,，有可能因試劑沾在孔壁上而帶來誤差,，建議將***頭浸入培養(yǎng)液中加入且在加完試劑后輕輕敲擊培養(yǎng)板以幫助混勻?；蛘咧苯优渲煤?0%CCK8的培養(yǎng)基（現(xiàn)用現(xiàn)配）,，以換液的形式加入。細(xì)胞毒性測定：這個可以和各個處理因素對細(xì)胞活性和增殖的影響,，比如低氧或者什么化學(xué)物品對細(xì)胞的影響上,。上海同仁cck8

CCK-8 反復(fù)凍融會增加背景值，干擾實驗測定,。江蘇cck8的價格

沒有做過MTT實驗，但其實原理及目的都是一樣的（反應(yīng)機理不一樣）,。都說CCK8簡單點而且數(shù)據(jù)更穩(wěn)定,，所以就用了這個試劑盒。CCK8的說明書大家一定要認(rèn)真閱讀,，里面很多細(xì)節(jié)的問題都有提到,。而且說明書里提供的一些關(guān)于各種細(xì)胞的種板數(shù)都很有參考價值，因為那是反復(fù)驗證過的比較好數(shù)值,。但無論如何,，做這個試驗一定要摸條件。你就算再懶,，這個懶不得,，否則你都只是在做無用功。以下言論全部以細(xì)胞毒性試驗為前提,，如果你做的是促進細(xì)胞生長的***的藥效實驗?zāi)蔷土懋?dāng)別論了,。江蘇cck8的價格