培養(yǎng)基對CCK8測定的影響：不同的培養(yǎng)基中含有氧化還原性物質(zhì)不同,，（主要是氨基酸的成分及糖含量）,，會與CCK8發(fā)生反應(yīng)，產(chǎn)生實驗誤差,，因此所用培養(yǎng)基要一致,，不要更換其他培養(yǎng)基,。比如DMEM空白吸收為0.93；1640培養(yǎng)基在0.5左右,。另外培養(yǎng)基中有酚紅存在的情況下,，會增加空白吸收，但不影響測定,，扣除空白吸收即可,，可見空白孔非常重要，所以每次實驗均要設(shè)定空白對照,。另外，血清不影響測定,。有師妹在做一個HIF1a***劑實驗時,，多加了這個***劑的濃度，向每孔加入10 μL CCK溶液（注意不要在孔中生成氣泡,，它們會影響OD值的讀數(shù)）,。湖北凱基cck8

特點不同1、CellCountingKit-8：靈敏度高,，數(shù)據(jù)可靠,，重現(xiàn)性好；操作簡便,，省時省力,；水溶性，不需要換液,，尤其適合于懸浮細(xì)胞,；無需放射性同位素和有機溶劑，對細(xì)胞毒性低,；適合于高通量***篩選,。2、MTT法：特點是靈敏度高,、經(jīng)濟(jì),。三、應(yīng)用不同1,、CellCountingKit-8：主要用途為***篩選,、細(xì)胞增殖測定、細(xì)胞毒性測定,、**藥敏試驗,。2、MTT法：***用于一些生物活性因子的活性檢測,、大規(guī)模的抗*****篩選,、細(xì)胞毒性試驗以及**放射敏感性測定等,。上海mtt與cck8的區(qū)別細(xì)胞增殖與毒性檢測實驗方法及經(jīng)驗總結(jié)-CCK-8 法.

貼壁生長的時間我一般就直接讓它貼壁長24h了，這個時間細(xì)胞已經(jīng)貼壁完全,，而且這樣設(shè)置時間對自己安排實驗時間也方便,。沒人愿意大半夜爬起來做實驗吧。3,、加藥后的孵育時間,，我的實驗摸了3個時間，24h,，48h,，72h。然后根據(jù)數(shù)據(jù)的穩(wěn)定性（RSD）,、OD值的范圍（1.0左右）這些來選擇比較好的時間,。太長了就沒有必要了，細(xì)胞呆在孔里幾天不換液結(jié)果可想而知了,。4,、CCK8試劑加入量，說明書中明確寫出建議加入量為培養(yǎng)基體積的10%,。這里有一個問題：假設(shè)我要孔內(nèi)是200微升的體系,，即細(xì)胞懸液+藥液+CCK8=200微升呢，還是細(xì)胞懸液+藥液=200微升,，cck8不算在體系內(nèi)呢,。關(guān)于這一點文獻(xiàn)報道不一致。本人**終采用的是后者,。5,、cck8試劑加入后孵育時間，隨著時間的增加,，OD值就會增大,。總之原則就是把OD值控制在1.0左右,。這里我考察了0.5h,、1.0h、2.0h,。

細(xì)胞增殖實驗就是對細(xì)胞生長的測定,，常用的方法有MTT、CCK8以及流式檢測,。閱讀大量文獻(xiàn)發(fā)現(xiàn),，如果想證明一個***或者說是一個作用條件對細(xì)胞生長的影響，基本上大家都采用MTT或CCK8結(jié)合流式的雙標(biāo)準(zhǔn)來證明作用效果,。所以,，***先給大家介紹一下MTT和CCK8比色法的實驗操作和注意事項,。MTT實驗操作1、在96孔板中培養(yǎng)細(xì)胞,，設(shè)置對照組（細(xì)胞+無血清培養(yǎng)基）,、實驗組和空白組（無血清培養(yǎng)基），可以采用如下圖的排版方式：2,、在對照組和實驗組中,，代謝率低了以后，細(xì)胞呼吸減弱,，NAD+產(chǎn)生減少,，測出的Formazan也會減少。

五,、實驗注意事項：·若暫時不測定OD值,，可以向每孔中加入10μL0.1M的HCL溶液或者1%w/vSDS溶液，并遮蓋培養(yǎng)板避光保存在室溫條件下,。24小時內(nèi)測定，吸光度不會發(fā)生變化,。·如果待測物質(zhì)有氧化性或還原性的話,，可在加CCK8之前更換新鮮培養(yǎng)基（除去培養(yǎng)基，并用培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次,，然后加入新的培養(yǎng)基）,，去掉***影響。當(dāng)然***影響比較小的情況下,，可以不更換培養(yǎng)基,，直接扣除培養(yǎng)基中加入***后的空白吸收即可。·當(dāng)使用標(biāo)準(zhǔn)96孔板時,，貼壁細(xì)胞的**小接種量至少為1,000個/孔(100μl培養(yǎng)基),。檢測白細(xì)胞時的靈敏度相對較低，因此推薦接種量不低于2,500個/孔(100μl培養(yǎng)基),。CCK8細(xì)胞增殖實驗檢測原理.北京cck8細(xì)胞

MTT與CCK8區(qū)別是什么?湖北凱基cck8

細(xì)菌***對CCK8檢測的影響：我們做***的,，經(jīng)常會做到細(xì)菌或***對細(xì)胞的影響。那這種情況下我們應(yīng)該怎么辦,。其實細(xì)菌防御系統(tǒng)還是非常強大,，單獨和CCK-8在一起孵育時，不會發(fā)生還原反應(yīng),，幾乎不會和細(xì)菌發(fā)生顯色反應(yīng),。而細(xì)菌不需要入胞繁殖，所以結(jié)果還是可信的,。**討厭的就是***,，我不知道有多少人是做***的,。***是需要入胞繁殖的，而且需要借助細(xì)胞的東西來進(jìn)行繁殖,。繁殖過程中就需要消耗宿主的能量,，會產(chǎn)生氧化還原反應(yīng)，所以我用CCK-8來測定***對細(xì)胞活性的影響或者某個***對***復(fù)制的影響時,，我都小心翼翼的測很多個時間點,，說實話，效果不是很好,。所以我比較喜歡中性紅,。湖北凱基cck8