培養(yǎng)基對CCK8測定的影響：不同的培養(yǎng)基中含有氧化還原性物質(zhì)不同,，（主要是氨基酸的成分及糖含量）,，會與CCK8發(fā)生反應,，產(chǎn)生實驗誤差,，因此所用培養(yǎng)基要一致,，不要更換其他培養(yǎng)基,。比如DMEM空白吸收為0.93,；1640培養(yǎng)基在0.5左右,。另外培養(yǎng)基中有酚紅存在的情況下,，會增加空白吸收，但不影響測定,，扣除空白吸收即可,，可見空白孔非常重要，所以每次實驗均要設定空白對照,。另外,，血清不影響測定，所以我用CCK-8來測定病毒對細胞活性的影響或者某個***對病毒復制的影響時,，我都小心翼翼的測很多個時間點,，說實話，效果不是很好,。所以我比較喜歡中性紅,。水溶性，不需要換液,，尤其適合于懸浮細胞.北京cck8 od值大于2

CCK8檢測細胞增殖/毒性的注意事項：1.加入CCK8溶液時不要在孔中生成氣泡,，它們會影響OD值的讀數(shù)；2.要設計空白對照組,；3.對于大多數(shù)情況,，加入CCK8溶液后，孵育2h左右就可以了,；4.使用酶標儀之前要提前開啟10min預熱,；5.若連續(xù)多天檢測，必須保持所有條件一致。相關鏈接：CCK8的特性,、保存方法以及與BrdU的區(qū)別CCK8空白對照,，測定參比波長的設定以及OD值的合適范圍CCK8標準曲線、檢測時間,、終止反應以及減少加樣誤差的方法外界因素(金屬/***/細菌/培養(yǎng)基/培養(yǎng)板)對CCK8測定的影響細胞因素(預培養(yǎng)/生長方式/狀態(tài)/細胞數(shù)/死細胞)對CCK8測定的影響細胞增殖到底用MTT還是CCK8呢?天津mtt法和cck8的區(qū)別CCK-8 反復凍融會增加背景值,，干擾實驗測定。

培養(yǎng)基對CCK8測定的影響：不同的培養(yǎng)基中含有氧化還原性物質(zhì)不同,，（主要是氨基酸的成分及糖含量）,，會與CCK8發(fā)生反應，產(chǎn)生實驗誤差,，因此所用培養(yǎng)基要一致,，不要更換其他培養(yǎng)基。比如DMEM空白吸收為0.93,；1640培養(yǎng)基在0.5左右,。另外培養(yǎng)基中有酚紅存在的情況下，會增加空白吸收,，但不影響測定,，扣除空白吸收即可，可見空白孔非常重要,，所以每次實驗均要設定空白對照,。另外，血清不影響測定,。有師妹在做一個HIF1a***劑實驗時,，多加了這個***劑的濃度，

CCK法的操作步驟（更多內(nèi)容請見說明書）：實驗一：細胞活性檢測1,、在96孔板中接種細胞懸液（100μL/孔）,。將培養(yǎng)板放在培養(yǎng)箱中預培養(yǎng)（37℃,5%CO2）。2,、向每孔加入10μLCCK溶液（注意不要在孔中生成氣泡,，它們會影響OD值的讀數(shù)）。3,、將培養(yǎng)板在培養(yǎng)箱內(nèi)孵育1-4小時,。4、用酶標儀測定在450nm處的吸光度,。5,、若暫時不測定OD值，可以向每孔中加入10μL0.1M的HCL溶液或者1%w/vSDS溶液,，并遮蓋培養(yǎng)板避光保存在室溫條件下,。24小時內(nèi)測定,，吸光度不會發(fā)生變化。***篩選：在測定一個***的毒性和安全有效濃度時,，經(jīng)常會用到CCK-8,。

特點不同1、CellCountingKit-8：靈敏度高,，數(shù)據(jù)可靠,，重現(xiàn)性好；操作簡便,，省時省力,；水溶性，不需要換液,，尤其適合于懸浮細胞,；無需放射性同位素和有機溶劑，對細胞毒性低,；適合于高通量***篩選,。2、MTT法：特點是靈敏度高,、經(jīng)濟,。三、應用不同1,、CellCountingKit-8：主要用途為***篩選、細胞增殖測定,、細胞毒性測定,、**藥敏試驗。2,、MTT法：***用于一些生物活性因子的活性檢測,、大規(guī)模的抗*****篩選、細胞毒性試驗以及**放射敏感性測定等,。所以粗略的可以認為生成的甲瓚物的顏色的深淺與活細胞的數(shù)量成正比,。湖北cck8生長曲線細胞數(shù)

換液的意思是將cck8加在培養(yǎng)基中以換液的形式加在孔板中避免氣泡產(chǎn)生。北京cck8 od值大于2

CCK8,，即Cell Counting Kit-8,，與MTT法的主要區(qū)別如下：一、原理不同1,、Cell Counting Kit-8：CCK-8 試劑盒利用了日本同仁化學研究所（Dojindo）開發(fā)的四唑鹽WST-8 (2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑單鈉鹽),。2、MTT法：其檢測原理為活細胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶能使外源性MTT還原為水不溶性的藍紫色結(jié)晶甲臜（Formazan）并沉積在細胞中,，而死細胞無此功能,。二甲基亞砜（DMSO）能溶解細胞中的甲臜,，用酶聯(lián)免疫檢測儀在570nm波長處測定其光吸收值，可間接反映活細胞數(shù)量,。在一定細胞數(shù)范圍內(nèi),，MTT結(jié)晶形成的量與細胞數(shù)成正比。北京cck8 od值大于2