細胞增殖實驗就是對細胞生長的測定,，常用的方法有MTT、CCK8以及流式檢測,。閱讀大量文獻發(fā)現(xiàn),，如果想證明一個***或者說是一個作用條件對細胞生長的影響，基本上大家都采用MTT或CCK8結(jié)合流式的雙標準來證明作用效果,。所以,，***先給大家介紹一下MTT和CCK8比色法的實驗操作和注意事項。

MTT實驗操作

1,、在96孔板中培養(yǎng)細胞,，設置對照組（細胞+無血清培養(yǎng)基）、實驗組和空白組（無血清培養(yǎng)基）,，可以采用如下圖的排版方式：

2,、在對照組和實驗組中，每孔加入細胞懸液100ul,培養(yǎng)24小時,； 向每孔加入10 μL CCK溶液（注意不要在孔中生成氣泡,，它們會影響OD值的讀數(shù)）,。北京cck8結(jié)果如何分析

CCK8原理、優(yōu)勢和步驟 檢測原理：

◆ Cell Counting Kit簡稱CCK試劑盒,，是一種基于WST-8（化學名：2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑單鈉鹽）的廣泛應用于細胞增殖和細胞毒性的快速高靈敏度檢測試劑盒,。

◆ WST-8屬于MTT的升級產(chǎn)品，工作原理為：在電子耦合試劑存在的情況下,，可以被線粒體內(nèi)的脫氫酶還原生成高度水溶性的橙黃色的甲臜產(chǎn)物（formazan）,。顏色的深淺與細胞的增殖成正比，與細胞毒性成反比,。使用酶標儀在450mM波長處測定OD值,，間接反映活細胞數(shù)量。 北京cck8結(jié)果如何分析細胞增殖測定：細胞增殖實驗在很多領(lǐng)域都會用到,，比如**相關(guān),、損傷后修復等。

切記一定要使用無血清的基礎培養(yǎng)基,，一是可以排除血清對細胞生長的影響；二是血清的存在會對吸光度的測量產(chǎn)生影響,。以上是MTT比色法的介紹,，MTT比色法因為涉及到吸出培養(yǎng)基溶解沉淀的操作，所以更適用于貼壁細胞,，懸浮細胞比較好選用CCK8檢測細胞增殖,，下面給大家介紹一下CCK8操作的注意事項。CCK8實驗操作CCK8的優(yōu)勢在于對細胞沒有毒性,，可以直接加入細胞中長時間孵育,，而不用考慮試劑本身對細胞帶來的影響。向各孔中加入10ul的CCK-8檢測溶液,。如若檢測的細胞增殖或毒性試驗,，需在此之前加入作用***培養(yǎng)適當時間，例如6h/12h/24h等,，然后再加入CCK8檢測液,。

沒有做過MTT實驗，但其實原理及目的都是一樣的（反應機理不一樣）,。都說CCK8簡單點而且數(shù)據(jù)更穩(wěn)定,，所以就用了這個試劑盒。CCK8的說明書大家一定要認真閱讀,，里面很多細節(jié)的問題都有提到,。而且說明書里提供的一些關(guān)于各種細胞的種板數(shù)都很有參考價值，因為那是反復驗證過的比較好數(shù)值,。但無論如何,，做這個試驗一定要摸條件,。你就算再懶，這個懶不得,，否則你都只是在做無用功,。以下言論全部以細胞毒性試驗為前提，如果你做的是促進細胞生長的***的藥效實驗那就另當別論了,。CCK8原理,、優(yōu)勢和步驟.

細胞增殖實驗就是對細胞生長的測定，常用的方法有MTT,、CCK8以及流式檢測,。閱讀大量文獻發(fā)現(xiàn)，如果想證明一個***或者說是一個作用條件對細胞生長的影響,，基本上大家都采用MTT或CCK8結(jié)合流式的雙標準來證明作用效果,。所以，***先給大家介紹一下MTT和CCK8比色法的實驗操作和注意事項,。MTT實驗操作1,、在96孔板中培養(yǎng)細胞，設置對照組（細胞+無血清培養(yǎng)基）,、實驗組和空白組（無血清培養(yǎng)基）,，可以采用如下圖的排版方式：2、在對照組和實驗組中,，每孔加入細胞懸液100ul,培養(yǎng)24小時cck8結(jié)果處理**終結(jié)果.湖北cck8 dojindo 說明書

CCK8雖好,這些情況下不建議用!北京cck8結(jié)果如何分析

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