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來源: 發(fā)布時間:2022-02-16

氧化還原試劑對CCK8測定的影響:CCK8是一個氧化還原反應實驗,,在整個操作當中,如果有氧化還原試劑都會影響**終的結果,。當有還原性物質(zhì)存在時會影響CCK8的測定,,增加OD值,。在有氧化性物質(zhì)存在時會***測定反應的發(fā)生,減少OD值,。在高中化學我們就知道金屬是氧化還原反應中的重要參與者,。各個公司都會告訴你:“終濃度為1mM的氯化亞鉛、氯化鐵,、硫酸銅會***5%,、15%,、90%的顯色反應,使靈敏度降低,。如果終濃度是10mM的話,,將會*****?!蔽?*開始看到這句話時很懵,,因為不知道在操作中怎樣會遇到這種情況。下面就分享我能想到或者在操作中真實遇到的,。cck8試劑盒價格是多少?上海cck8結果圖怎么做

CCK8檢測細胞增殖/毒性的注意事項:1.加入CCK8溶液時不要在孔中生成氣泡,,它們會影響OD值的讀數(shù);2.要設計空白對照組,;3.對于大多數(shù)情況,,加入CCK8溶液后,孵育2h左右就可以了,;4.使用酶標儀之前要提前開啟10min預熱;5.若連續(xù)多天檢測,,必須保持所有條件一致,。相關鏈接:CCK8的特性、保存方法以及與BrdU的區(qū)別CCK8空白對照,,測定參比波長的設定以及OD值的合適范圍CCK8標準曲線,、檢測時間、終止反應以及減少加樣誤差的方法外界因素(金屬/***/細菌/培養(yǎng)基/培養(yǎng)板)對CCK8測定的影響細胞因素(預培養(yǎng)/生長方式/狀態(tài)/細胞數(shù)/死細胞)對CCK8測定的影響細胞增殖到底用MTT還是CCK8呢?北京cck8測的是什么細胞增殖測定:細胞增殖實驗在很多領域都會用到,,比如**相關,、損傷后修復等。

二,、優(yōu)點:·使用方便,,省去了洗滌細胞,不需要放射性同位素和有機溶劑,;·CCK-8法能快速檢測,;·CCK-8法的檢測靈敏度很高,甚至可以測定較低細胞密度,;·CCK-8法的重復性優(yōu)于MTT法,,MTT實驗生成的formazan不是水溶性的,需要使用DMSO等有機溶劑溶解,;而本方法產(chǎn)生的formazan是水溶性的,,不但省去了溶解步驟,更因此而減少了該操作步驟帶來的誤差,;·CCK-8法對細胞毒性小,,可以多次測定選取比較好測定時間,,與MTT方法相比線性范圍更寬,靈敏度更高,;·CCK-8細胞活性檢測試劑中為1瓶溶液,,毋需預制,即開即用,。

實驗材料及試劑96孔板,、CO2培養(yǎng)箱、酒精燈,、移液***,、酶標儀等;細胞,、CCK8等,。實驗內(nèi)容取生長狀態(tài)良好的對數(shù)生長期細胞,每孔按4×103個接種至96孔板中,,每組設置8個復孔,,置于細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng),待細胞貼壁后轉(zhuǎn)染相應質(zhì)粒后,。繼續(xù)培養(yǎng)48h后,,棄含藥培養(yǎng)基,每孔加入新鮮配制的含10uL的毒性檢測液CCK8,,置于培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)4h后,,用酶標儀測波長為450nm的OD值。實驗重復3次,,取實驗結果的平均值作為**終實驗結果,。按公式計算生長***率=[(對照組OD-實驗組OD)/對照組OD]×**,以分組為橫坐標,,生長***率為縱坐標,,繪制細胞生長CCK8細胞增值檢測實驗簡介.

CCK-8的原理

所以粗略的可以認為生成的甲瓚物的顏色的深淺與活細胞的數(shù)量成正比。為什么是粗略的呢,,因為這里沒有考慮到細胞代謝水平的高低,,有些細胞在***處理后,可能活細胞數(shù)不變,,但是代謝率低了以后,,細胞呼吸減弱,NAD+產(chǎn)生減少,,測出的Formazan也會減少,,所以此時怎么算呢(此時我就比較懷戀中性紅了)?當然也有解決的辦法,下期給大家介紹,。因此可利用這個原理進行細胞增殖和毒性分析,,在吸光度為450時檢測讀數(shù)。用途及常用的公 在96孔板中接種細胞懸液(100μL/孔),。將培養(yǎng)板放在培養(yǎng)箱中預培養(yǎng)(37℃,5% CO2).湖北cck8實驗步驟

用酶聯(lián)免疫檢測儀在450nm波長處測定其光吸收值.上海cck8結果圖怎么做

cck8試劑加入后孵育時間,,隨著時間的增加,OD值就會增大,??傊瓌t就是把OD值控制在1.0左右。這里我考察了0.5h,、1.0h,、2.0h。再說一下關于種板設置問題,。眾所周知周圍一圈孔因為邊緣效應都是不用來做實驗的,。一般每組樣品我會設置6個復孔,得到的OD值去掉**大值與**小值,,其余取平均值,。我用的是排***,會省很多力氣,,但是也會增大組內(nèi)誤差,。這個只有通過校正移液***和選用**適***頭了。能力有限,,表達不清的大家湊合著看看吧,。有疑問的歡迎大家留言討論,,我們的目標是共同進步上海cck8結果圖怎么做