CCK-8盒子的選購還記得***次做CCK-8的實驗時研究生二年級的時候,，當時用的***個盒子是Sigma的,，當時的Sigma-Aldrich就是Sigma-Aldrich,，還不是現在的Millipore-Sigma,。那個盒子給了我莫大的鼓勵，因為在那之前做分子克隆一直都不是很順利,。這個盒子是我的碩士老板從美國帶回來的,，品質有保證，***的結果也是很好的,。后面在做CCK-8的實驗時,，我們在有選擇的情況下都會買sigma，下圖2是sigma官網的截圖,。其實也不貴，只是到貨時間太慢,。細胞毒性測定：這個可以和各個處理因素對細胞活性和增殖的影響,，比如低氧或者什么化學物品對細胞的影響上,。天津celltiter glo 與cck8

制作標準曲線1.先用細胞計數板計數所制備的細胞懸液中的細胞數量，然后接種細胞,。2.按比例(例如：1/2比例)依次用培養(yǎng)基等比稀釋成一個細胞濃度梯度,，一般要做3-5個細胞濃度梯度，每組3-6個復孔,。3.接種后培養(yǎng)2-4小時使細胞貼壁,，然后加CCK-8試劑培養(yǎng)一定時間后測定O.D值，制作出一條以細胞數量為橫坐標(X軸),，O.D值為縱坐標(Y軸)的標準曲線,。根據此標準曲線可以測定出未知樣品的細胞數量(使用此標準曲線的前提條件是實驗的條件要一致，便于確定細胞的接種數量以及加入CCK-8后的培養(yǎng)時間),。江蘇cck8 od值CCK8的實驗步驟,、實驗分組及檢測方法.

特點不同1、CellCountingKit-8：靈敏度高,，數據可靠,，重現性好；操作簡便,，省時省力,；水溶性，不需要換液,，尤其適合于懸浮細胞,；無需放射性同位素和有機溶劑，對細胞毒性低,；適合于高通量***篩選,。2、MTT法：特點是靈敏度高,、經濟,。三、應用不同1,、CellCountingKit-8：主要用途為***篩選,、細胞增殖測定、細胞毒性測定,、**藥敏試驗,。2、MTT法：***用于一些生物活性因子的活性檢測,、大規(guī)模的抗*****篩選,、細胞毒性試驗以及**放射敏感性測定等。

讀數前可在搖床上溫柔混勻,，酶標儀在 450nm 波長處檢測每孔的吸光度,。

***率（％）= [（對照孔吸光度-實驗孔吸光度）/（對照孔吸光度-空白孔吸光度）]×100=IC50

注意事項

CCK8法檢測細胞生長情況基于的原理是脫氫酶催化的反應,，如果實驗處理條件中存在還原劑的影響，應事先去除,。如果實驗條件中存在還原物質,，需單獨測定還原物質的空白吸光度。如果還原物質的吸光度很小,，可以忽略不計,；但如果吸光度很大，則需要去除培養(yǎng)基,，再用培養(yǎng)基洗滌細胞3次,，然后再加入新的 100ul培養(yǎng)基和10ul CCK-8 溶液進行檢測。 化學名：2-(2-甲氧基-4-硝基苯基).

實驗材料及試劑96孔板,、CO2培養(yǎng)箱,、酒精燈、移液***,、酶標儀等,；細胞、CCK8等,。實驗內容取生長狀態(tài)良好的對數生長期細胞,，每孔按4×103個接種至96孔板中，每組設置8個復孔,，置于細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng),，待細胞貼壁后轉染相應質粒后。繼續(xù)培養(yǎng)48h后,，棄含藥培養(yǎng)基,，每孔加入新鮮配制的含10ｕL的毒性檢測液CCK8，置于培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)4h后,，用酶標儀測波長為450nm的OD值,。實驗重復3次，取實驗結果的平均值作為**終實驗結果,。按公式計算生長***率＝[(對照組OD－實驗組OD)/對照組OD]×**,，以分組為橫坐標，生長***率為縱坐標,，繪制細胞生長cck8試劑盒價格是多少?天津cck8檢測原理

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,、***濃度的確定需要做一個時間梯度，鋪板和上述相同,，只需把各個實驗組改成各個作用時間就可以了,。至于說***濃度的確定，網上有很多確認方法，個人建議以IC50值作為***濃度即可,。計算方法,，某園子里都有，就不在這里介紹了,。

MTT作用之后，一定要小心吸走培養(yǎng)液,，以免將孔內的紫色結晶吸走,。有條件的實驗室，這一步可以采用離心機將沉淀充分離心到孔底,，防止被吸出,。如果沒有這種類型的離心機，可以在測量吸光度的時候,，將酶聯免疫的機器震蕩時間調制5分鐘,，**起碼可以保證沉淀充分溶解。 天津celltiter glo 與cck8