用LipoFectMax?轉(zhuǎn)染Hela細(xì)胞,左圖轉(zhuǎn)染GFPcDNA,右圖共轉(zhuǎn)染GFPCDNA和GFP靶向siRNA。轉(zhuǎn)染siRNA后可以從右圖明顯看到基因沉默。4適用于神經(jīng)細(xì)胞的轉(zhuǎn)染圖4.用LipoFectMax?和LipoFectamine®2000分別對小鼠神經(jīng)元細(xì)胞進行轉(zhuǎn)染綠色熒光白蛋白(GFP),,轉(zhuǎn)染24小時后觀察轉(zhuǎn)染效果,LipoFectMax?轉(zhuǎn)染效率(左圖)比LipoFectamine®2000(右圖)高5倍,。LipoFectMax?轉(zhuǎn)染試劑轉(zhuǎn)染試劑操作流程細(xì)胞毒性低圖2.LipoFectMax?,,LipoFectamine®2000及LipoFectamine®3000分別對A549細(xì)胞進行轉(zhuǎn)染操作,通過計算轉(zhuǎn)染后的細(xì)胞存活率比較細(xì)胞毒性.轉(zhuǎn)染試劑實現(xiàn)了更高的有效***細(xì)胞/未轉(zhuǎn)染細(xì)胞比率,,超過其他RNAi試劑,。基因轉(zhuǎn)染試劑配制
十全十美難,,十全九美卻可以通過選擇一款好的轉(zhuǎn)染試劑來實現(xiàn),。理想的轉(zhuǎn)染試劑包括要具有較高的轉(zhuǎn)染效率,細(xì)胞毒性低,,操作簡單可重復(fù),,價格還要可愛。現(xiàn)在大多數(shù)實驗室用的是脂質(zhì)體系列轉(zhuǎn)染試劑,,但脂質(zhì)體對細(xì)胞毒性大,,某些細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率還很低,,看單孔的價格也很不美好。尤其是在轉(zhuǎn)染RNA方面,,脂質(zhì)體的劣勢較明顯,。QIAGEN在轉(zhuǎn)染試劑領(lǐng)域的研發(fā)思路與其核酸純化領(lǐng)域的精而專,全而深不同,。在轉(zhuǎn)染試劑的研發(fā)過程中,,另辟蹊徑,研精致思進而做到小而美的轉(zhuǎn)染產(chǎn)品,。從市面上眾多轉(zhuǎn)染試劑的一片紅海中,,神奇的開辟出一塊藍海,為客戶烹制出了幾款高效,、快速,、低毒又親民的轉(zhuǎn)染試劑私房菜。上海國產(chǎn)轉(zhuǎn)染試劑分裝隨后分離血清并檢測FVII蛋白的水平(Biophen 顯色檢測),。
基于陽離子聚合物的轉(zhuǎn)染試劑,,帶正電的聚合物與核酸帶負(fù)電的磷酸基團形成帶正電的復(fù)合物后與細(xì)胞表面帶負(fù)電的蛋白多糖相互作用,并通過內(nèi)吞作用進入細(xì)胞,。其又分為樹枝狀陽離子聚合物和線性陽離子聚合物兩類,,前者細(xì)胞毒性相對較大,后者細(xì)胞毒性較小,,但其轉(zhuǎn)染效率都高于脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染,,適用也較為廣范。以上單一成分的轉(zhuǎn)染試劑或聚焦于提高效率或著重于降低細(xì)胞毒性,,可謂魚和熊掌不可兼得也,。新一代轉(zhuǎn)染試劑,不局限于單一成分,,混合了不同配方的脂類(非脂質(zhì)體),、加上蛋白質(zhì)組分、以及各種的成分,,兼具了轉(zhuǎn)染效率高和細(xì)胞毒性小的優(yōu)勢,,且操作更加簡單,易于高通量,。
轉(zhuǎn)染48小時后,,使用尼康熒光顯微鏡GFP熒光進行成像(左側(cè)四幅圖),A:LipoD293,;B:293fectin,;C:Xfect和D:Fugene6.帶有6xHis標(biāo)記的GFP熒光蛋白使用Ni-NTA親和柱技術(shù)實現(xiàn)分離。5微升洗脫液載入SDS-PAGE凝膠電泳分離并進行Coomassie亮藍染色(右上圖E),,道1為LipoD293293,、道2為標(biāo)準(zhǔn)蛋白分子,、道3為Xfect、道4為293fectin和道5為Fugene6,。這四種轉(zhuǎn)染試劑產(chǎn)生蛋白質(zhì)的效率被進一步定量(見右下圖F),。產(chǎn)生慢***的比較通過LipoD293?試劑(升級版)和LipofectamineLTX(LTX)試劑將三個cDNAs共轉(zhuǎn)染進293T細(xì)胞。一個GFP載體,,pHR-SIN-cppt-CMVEWP被用來測定慢***的滴度,。在24孔板中每孔加入1x10^5293T細(xì)胞,其次是分別添加不同量的慢定都上清液,,1微升(上圖)和10微升(下圖),。帶你了解性價比比較高的轉(zhuǎn)染試劑-PEI轉(zhuǎn)染.
細(xì)胞轉(zhuǎn)染過程:X-tremeGENE9DNA轉(zhuǎn)染試劑簡介:X-tremeGENE9DNA轉(zhuǎn)染試劑是脂質(zhì)和其它成分混合而得的一類多組份試劑,溶于80%乙醇中,,經(jīng)0.2μm濾膜過濾,,然后封裝于玻璃小瓶中,適用于細(xì)胞分析的多種實驗,。優(yōu)勢:1.具有細(xì)胞毒性極低,、轉(zhuǎn)染后細(xì)胞存活率高,生成可信任的生理學(xué)相關(guān)數(shù)據(jù),。2.操作簡便、節(jié)省時間,,只需對X-tremeGENE9DNA轉(zhuǎn)染試劑進行簡單稀釋,,再與質(zhì)粒DNA共同孵育,即可直接向細(xì)胞添加反應(yīng)混合物(有無血清均可),。3.對于常用細(xì)胞無需進行費時費力的優(yōu)化RNAiMAX轉(zhuǎn)染試劑是先進,、高效的siRNA輸送解決方案。上海roche轉(zhuǎn)染試劑對照
驚艷登場!臨床級載體生產(chǎn)必備轉(zhuǎn)染試劑,?;蜣D(zhuǎn)染試劑配制
產(chǎn)生慢***的比較通過LipoD293?試劑(升級版)和LipofectamineLTX(LTX)試劑將三個cDNAs共轉(zhuǎn)染進293T細(xì)胞。一個GFP載體,,pHR-SIN-cppt-CMVEWP被用來測定慢***的滴度,。在24孔板中每孔加入1x10^5293T細(xì)胞,其次是分別添加不同量的慢定都上清液,,1微升(上圖)和10微升(下圖),。5天后,細(xì)胞通過流式細(xì)胞儀檢測,。右上角的數(shù)字表明轉(zhuǎn)導(dǎo)的細(xì)胞的百分比來測定慢***的滴度,。由LipoD293?andLTX產(chǎn)生的慢***的滴度被量化,分為是8x10^6和3x10^6tu/ml,?;蜣D(zhuǎn)染試劑配制
上海儒安生物科技有限公司成立于2016-09-20,,是一家專注于細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑,ecl發(fā)光液,,cck8細(xì)胞增殖,,內(nèi)參抗體的****,公司位于真南路4268號2幢J1718室,。公司經(jīng)常與行業(yè)內(nèi)技術(shù)**交流學(xué)習(xí),,研發(fā)出更好的產(chǎn)品給用戶使用。公司現(xiàn)在主要提供細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑,,ecl發(fā)光液,,cck8細(xì)胞增殖,內(nèi)參抗體等業(yè)務(wù),,從業(yè)人員均有細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑,,ecl發(fā)光液,cck8細(xì)胞增殖,,內(nèi)參抗體行內(nèi)多年經(jīng)驗,。公司員工技術(shù)嫻熟、責(zé)任心強,。公司秉承客戶是上帝的原則,,急客戶所急,想客戶所想,,熱情服務(wù),。公司會針對不同客戶的要求,不斷研發(fā)和開發(fā)適合市場需求,、客戶需求的產(chǎn)品,。公司產(chǎn)品應(yīng)用領(lǐng)域廣,實用性強,,得到細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑,,ecl發(fā)光液,cck8細(xì)胞增殖,,內(nèi)參抗體客戶支持和信賴,。上海儒安生物秉承著誠信服務(wù)、產(chǎn)品求新的經(jīng)營原則,,對于員工素質(zhì)有嚴(yán)格的把控和要求,,為細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑,ecl發(fā)光液,,cck8細(xì)胞增殖,,內(nèi)參抗體行業(yè)用戶提供完善的售前和售后服務(wù)。