含細(xì)胞的三維膠原的制備(以配制1毫升,,1mg/ml三維膠為例):準(zhǔn)備好懸浮于培養(yǎng)液的細(xì)胞,,并放置于冰浴中,。將200ul鼠尾膠原蛋白I型(5mg/ml)加到12ul0.1mol/LNaOH中(如果反過(guò)來(lái)把12ul0.1mol/LNaOH加到膠原溶液中,,會(huì)由于NaOH不能迅速混勻而產(chǎn)生局部的膠原凝結(jié)),,立即混勻,。再加入23ul10xPBS或10x培養(yǎng)液,,混勻(混勻后pH為7左右,,如果PBS或培養(yǎng)液中沒(méi)有加酚紅,,初次使用時(shí)需要用pH試紙測(cè)試),。加入760ul的細(xì)胞懸浮液,混勻后立即加到培養(yǎng)器皿中,。將培養(yǎng)器皿在室溫下放置20分鐘待膠凝固后,,加入適當(dāng)體積的細(xì)胞培養(yǎng)液,轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)箱中培養(yǎng),。在以小鼠為模式生...
服用膠原蛋白的注意事項(xiàng):1,、大分子膠原蛋白進(jìn)入人體后需要降解為小分子肽、氨基酸才能被人體吸收,,真正有效吸收的成分并不多,。2、這些食物多半脂肪含量較高,,不適合經(jīng)常食用,。高熱量,、高脂肪,尤其是油炸食物都容易產(chǎn)生自由基,,加速老化,。如果能少吃這一類(lèi)食物,就等于減少了身體被自由基傷害的機(jī)會(huì)及皮膚出現(xiàn)黑斑,、皺紋等的風(fēng)險(xiǎn),。3、孕婦是不能服用膠原蛋白產(chǎn)品,,因膠原蛋白是19種氨基酸組成的,,其中有幾種是不能被胎兒吸收的,容易引起第二特征過(guò)早的發(fā)育和成熟,,不利于出生后的嬰兒成長(zhǎng)和發(fā)育,。4°C沉淀10小時(shí),去除上清液,,絮狀溶液高速冷凍離心處理,,收集沉淀。上海正規(guī)鼠尾膠原報(bào)價(jià)鼠尾膠原在心肌細(xì)胞氧化損傷中的保護(hù)作用:膠原...
對(duì)于生物科研汪們來(lái)說(shuō),,大白鼠,、小白鼠們簡(jiǎn)直渾身是寶,從毛發(fā),、皮膚,,到心肝脾肺,甚至各種排泄物,,都是我們重要的研究對(duì)象,。尾巴,自然也是,。所以耗子尾汁不僅存在,,甚至是我們生物實(shí)驗(yàn)中必不可少的實(shí)驗(yàn)材料和實(shí)驗(yàn)對(duì)象。有不少人靠「耗子尾汁」發(fā)了CNS和頂刊,。沒(méi)有「耗子尾汁」,,很多課題可能都沒(méi)辦法開(kāi)展。在以小鼠為模式生物進(jìn)行科學(xué)研究的實(shí)驗(yàn)室中,,日常和基本的一個(gè)實(shí)驗(yàn)就是提取它們的遺傳物質(zhì)—DNA(脫氧核糖核酸)進(jìn)行基因型鑒定,,檢測(cè)這些小動(dòng)物的基因組中是否含有特定的DNA??梢岳斫鉃榻o小動(dòng)物做核酸檢測(cè),。鼠尾膠原,是一種細(xì)胞支持物,,它是細(xì)胞外基質(zhì)的主要成份,。廈門(mén)鼠尾膠原銷(xiāo)售廠家膠原蛋白的適用征狀:1,、由于工作勞累...
鼠尾膠原實(shí)驗(yàn)應(yīng)用:探討應(yīng)用鼠尾膠原在豚鼠前庭毛細(xì)胞膜片鉗實(shí)驗(yàn)中的促進(jìn)毛細(xì)胞貼壁效果。方法制作鼠尾膠原,,觀察全細(xì)胞膜片鉗實(shí)驗(yàn)中,,自制的鼠尾膠原對(duì)前庭毛細(xì)胞的貼壁黏附作用。結(jié)果無(wú)鼠尾膠原時(shí),,前庭毛細(xì)胞懸浮于外液,,不宜封接;有鼠尾膠原時(shí),,前庭毛細(xì)胞貼附于培養(yǎng)皿底壁,,易于封接和長(zhǎng)時(shí)間(約8h)的觀察和記錄。鼠尾膠原對(duì)前庭毛細(xì)胞具有良好的貼壁黏附促進(jìn)作用,。結(jié)論鼠尾膠原能促進(jìn)毛細(xì)胞貼壁,,涂布鼠尾膠原有利于膜片鉗實(shí)驗(yàn)的長(zhǎng)時(shí)程記錄,并且制作簡(jiǎn)便,,成本低廉,。膠原的立體結(jié)構(gòu)與一般的球狀蛋白質(zhì)完全不同,每一條亞基形成一股左手旋轉(zhuǎn)的螺旋,。杭州南昌鼠尾膠原鼠尾膠原是一種天然培養(yǎng)基,,它具有促進(jìn)體外培養(yǎng)細(xì)胞(特別是上皮細(xì)胞...
一種生物醫(yī)用鼠尾膠原蛋白的提取方法:1.用0.03?0.06mol/L的檸檬酸溶液溶解沉淀物,,成透明澄清黏稠溶液,;在冰水浴中,調(diào)節(jié)pH=6.5,,用的3?6mol/L的NaCl溶液緩慢加入上清液中,,不斷攪拌至溶液中白色的絮狀物不再析出,4°C沉淀10小時(shí),,去除上清液,,去除上清液,絮狀溶液高速冷凍離心處理,,收集沉淀,;2.用0.03?0.06mol/L的檸檬酸再次溶液溶解沉淀物,成透明澄清黏稠溶液,,冰水浴中,,調(diào)節(jié)PH=6.5;溶液依次通過(guò)陽(yáng)離子交換樹(shù)脂、陰離子交換樹(shù)脂進(jìn)行脫鹽處理,;(8)將脫鹽后的膠原蛋白溶液,,-40至-20°C預(yù)凍2?4小時(shí),然后真空冷凍干燥,,凍干產(chǎn)品經(jīng)進(jìn)一步處理得到含水率在3%以...
膠原蛋白占人體蛋白質(zhì)總量的三分之一,,不論來(lái)源于哪一種動(dòng)物或哪一種組織的膠原都有許多共同特性,。膠原蛋白可分為20幾個(gè)亞型,但為常見(jiàn)的為I,、II,、III型膠原蛋白,即間質(zhì)膠原蛋白,。其中I型為豐富且品質(zhì)優(yōu)良,。劃重點(diǎn):任何動(dòng)物的膠原都有許多共性,I型膠原蛋白為豐富且品質(zhì)優(yōu)良,,鼠尾膠原蛋白是I型膠原蛋白,。于是,動(dòng)物中心就進(jìn)行了有關(guān)“耗子尾汁”的發(fā)明:一種基于鼠尾膠原蛋白制備的可吸收止血材料及其制備方法并在說(shuō)明書(shū)中給出了原因:“一般的生物體中提取的膠原蛋白多為混合型,,之前多從牛皮,、豬皮、牛腱中提取,,但這類(lèi)膠原蛋白不僅有油脂等其他雜質(zhì),,鼠尾膠原醋酸溶解:按照6-10ug/cm2的濃度包被培養(yǎng)瓶。溫州鼠尾膠原...
膠原蛋白的應(yīng)用:1.膠原天然的緊密的纖維結(jié)構(gòu),,使膠原材料顯示出很強(qiáng)的韌性和強(qiáng)度,,適用于薄膜材料的制備;2.大較膠原被用作制造腸衣等可食用包裝材料.其獨(dú)特之處是:在熱處理過(guò)程中.隨著水分和油脂的蒸發(fā)和熔化.膠原幾乎與肉食的收縮率一致,。而其他的可食用包裝材料還沒(méi)被發(fā)現(xiàn)具有這品質(zhì),;3.由于膠原分子鏈上含有大量的親水基團(tuán).所以與水結(jié)合的能力很強(qiáng).這一性質(zhì)使膠原在食品中可以用作填充劑和凝膠;4.膠原在酸性和堿性介質(zhì)中膨脹,,這一性質(zhì)也應(yīng)用于制備膠原基材料的處理工藝中,。鼠尾膠原、多聚賴(lài)氨酸和明膠作為基質(zhì)包被培養(yǎng)器皿,。昆明鼠尾膠原供應(yīng)商一種基于鼠尾膠原蛋白制備的可吸收止血材料及其制備方法并在說(shuō)明書(shū)中給出了原因...
服用膠原蛋白的注意事項(xiàng):1,、大分子膠原蛋白進(jìn)入人體后需要降解為小分子肽、氨基酸才能被人體吸收,,真正有效吸收的成分并不多,。2、這些食物多半脂肪含量較高,,不適合經(jīng)常食用,。高熱量、高脂肪,,尤其是油炸食物都容易產(chǎn)生自由基,,加速老化。如果能少吃這一類(lèi)食物,就等于減少了身體被自由基傷害的機(jī)會(huì)及皮膚出現(xiàn)黑斑,、皺紋等的風(fēng)險(xiǎn),。3、孕婦是不能服用膠原蛋白產(chǎn)品,,因膠原蛋白是19種氨基酸組成的,,其中有幾種是不能被胎兒吸收的,容易引起第二特征過(guò)早的發(fā)育和成熟,,不利于出生后的嬰兒成長(zhǎng)和發(fā)育,。鼠尾膠原醋酸溶解:按照6-10ug/cm2的濃度包被培養(yǎng)瓶。南昌正規(guī)鼠尾膠原供應(yīng)商鼠尾膠原的生物礦化和TEM觀察:果凍樣Ⅰ型膠原蛋白...
鼠尾膠原實(shí)驗(yàn)應(yīng)用:鼠尾膠原為底物的人鼻腔纖毛上皮細(xì)胞培養(yǎng)模式的建立目的建立以鼠尾膠原為貼附底物的人鼻腔纖毛上皮細(xì)胞的體外培養(yǎng)模式,,為人鼻腔黏液纖毛運(yùn)輸系統(tǒng)的研究提供科學(xué)有效的方法.方法制備鼠尾膠原并鋪片,,以鼠尾膠原為貼附底物組織塊培養(yǎng)法培養(yǎng)人鼻腔纖毛上皮細(xì)胞,培養(yǎng)7天時(shí)進(jìn)行HE染色及掃描電鏡和透射電鏡觀察細(xì)胞形態(tài)和結(jié)構(gòu),,應(yīng)用高速攝像技術(shù)測(cè)量纖毛擺動(dòng)頻率.結(jié)果鼠尾膠原要平坦均勻,,平均厚度約為1mm;HE染色可見(jiàn)上皮細(xì)胞呈單層向周?chē)篱_(kāi),;掃描電鏡下見(jiàn)纖毛上皮細(xì)胞呈不規(guī)則多角形,,纖毛周?chē)梢?jiàn)微絨毛;透射電鏡下可見(jiàn)纖毛上皮細(xì)胞間為緊密連接;同一細(xì)胞任意兩點(diǎn)纖毛擺動(dòng)頻率是相同的,;同一來(lái)源體外培養(yǎng)的鉤突和...
鼠尾膠原凝膠體在皮膚細(xì)胞原代培養(yǎng)中的應(yīng)用:在國(guó)外的藥理,毒理和皮膚病學(xué)的研究領(lǐng)域中已得到的限翩,否則培養(yǎng)成功率極低.本文采用鼠尾膠原凝膠體作為滋養(yǎng)層,提高了培養(yǎng)細(xì)胞的材料和方法r1]實(shí)驗(yàn)材料:培養(yǎng)液DEIdE(G皿}ao),表皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(EGFSigma),小牛血清(上海祟明生物制品廠),氫化可的松,胰島素(Sigm,青,鏈霉素,胰蛋白酶,]~DTA,細(xì)胞培養(yǎng)皿~35mill(00rningrSA).(2)皮膚基底細(xì)胞的分離和細(xì)胞懸液的制備:2~3d的新生大鼠(wisr),以75%酒精消毒背部皮膚,剪下皮膚后.以消化12h.輕刷表皮面,收集細(xì)胞懸液,加入細(xì)胞培養(yǎng)液.用梯度離心收集細(xì)胞,以3...
鼠尾膠原蛋白耗子尾汁還能變得更加,,一種被稱(chēng)作鼠尾膠原蛋白的“珍貴”液體就來(lái)自大鼠的尾巴,制作過(guò)程需要經(jīng)歷醋酸抽提,、氯化鈉沉淀和磷酸氫二鈉沉淀等步驟,,才能從鼠尾中獲得珍貴的膠原蛋白。這種膠原蛋白在37℃的條件下會(huì)形成3股螺旋結(jié)構(gòu),,可以用來(lái)當(dāng)作細(xì)胞培養(yǎng)的基質(zhì),。細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,,細(xì)胞需要貼附在培養(yǎng)皿表面(懸浮培養(yǎng)細(xì)胞除外)才能完成生長(zhǎng)過(guò)程,,而有一些細(xì)胞卻總是不太給力,自己完成不了貼壁過(guò)程或者貼壁困難,,這個(gè)時(shí)候鼠尾膠原蛋白就能承擔(dān)起讓細(xì)胞更容易貼壁的作用,。這一步也被稱(chēng)作涂層(coating),給培養(yǎng)皿涂上了一層膠原蛋白后,,細(xì)胞就能更好地貼附上去,,除了培養(yǎng)皿,一些需要使用海藻碳酸鈣微球培養(yǎng)得細(xì)胞,,同樣也可...
膠原蛋白是脊椎動(dòng)物和無(wú)脊椎動(dòng)物支持結(jié)構(gòu)的主要組成,。在人的身體中這是皮膚、筋、軟骨,、骨骼及結(jié)締組織的較主要的蛋白質(zhì),。膠原蛋白占人體蛋白質(zhì)總量的三分之一,不論來(lái)源于哪一種動(dòng)物或哪一種組織的膠原都有許多共同特性,。氨基酸組成中約有三分之一為甘氨酸,,有脯氨酸和羥脯氨酸。根據(jù)其遺傳分子結(jié)構(gòu)遺傳基因的差別,,膠原蛋白分為20幾個(gè)亞型,。但較為常見(jiàn)的為Ι、Π,、ΙΙΙ型膠原蛋白,,即間質(zhì)膠原蛋白。其中I型較為豐富且品質(zhì)優(yōu)良,。它是研究成纖維細(xì)胞與細(xì)胞外基質(zhì)之間以及細(xì)胞之間相互作用的良好模型,。金華鼠尾膠原廠家批發(fā)價(jià)膠原的立體結(jié)構(gòu)與一般的球狀蛋白質(zhì)完全不同,每一條亞基形成一股左手旋轉(zhuǎn)的螺旋,,其中每3個(gè)氨基酸殘基形成一圈螺旋...
鼠尾膠原為貼附底物的人鼻腔纖毛上皮細(xì)胞的體外培養(yǎng)模式,為人鼻腔黏液纖毛運(yùn)輸系統(tǒng)的研究提供科學(xué)有效的方法,。方法制備鼠尾膠原并鋪片,以鼠尾膠原為貼附底物組織塊培養(yǎng)法培養(yǎng)人鼻腔纖毛上皮細(xì)胞,培養(yǎng)7天時(shí)進(jìn)行HE染色及掃描電鏡和透射電鏡觀察細(xì)胞形態(tài)和結(jié)構(gòu),應(yīng)用高速攝像技術(shù)測(cè)量纖毛擺動(dòng)頻率。結(jié)果鼠尾膠原要平坦均勻,平均厚度約為1mm;HE染色可見(jiàn)上皮細(xì)胞呈單層向周?chē)篱_(kāi);掃描電鏡下見(jiàn)纖毛上皮細(xì)胞呈不規(guī)則多角形,纖毛周?chē)梢?jiàn)微絨毛;透射電鏡下可見(jiàn)纖毛上皮細(xì)胞間為緊密連接;同一細(xì)胞任意兩點(diǎn)纖毛擺動(dòng)頻率是相同的;同一來(lái)源體外培養(yǎng)的鉤突和下鼻甲的纖毛擺動(dòng)頻率是相同的,。結(jié)論以鼠尾膠原為貼附底物人鼻腔纖毛上皮細(xì)胞的體...
鼠尾膠原醋酸溶解:1.將鼠尾膠原加入到0.1M的醋酸中,,制備成濃度為0.1%的溶液。在室溫中攪拌1-3小時(shí)直到完全溶解,。2.建議將溶液轉(zhuǎn)移到擰口的玻璃瓶中,,并小心的在瓶底鋪上一層氯仿。氯仿的量約為膠原溶液的10%,。不要晃動(dòng)或攪拌,。在2-8度中放置過(guò)夜。在無(wú)菌條件下轉(zhuǎn)移上層的膠原溶液,。我們不建議用過(guò)濾的方法無(wú)菌化,。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)該方法會(huì)導(dǎo)致丟失蛋白。3.稀釋一定數(shù)量的膠原溶液,。4.按照6-10ug/cm2的濃度包被培養(yǎng)瓶,。在室溫或37度結(jié)合數(shù)小時(shí)或者2-8度過(guò)夜。生物醫(yī)用鼠尾膠原蛋白的提取方法,,采用酸法與酶法相結(jié)合的工藝,,保持恒低溫?zé)o菌的環(huán)境。重慶正規(guī)鼠尾膠原價(jià)格鼠尾膠原蛋白的用途是什么:在工業(yè)應(yīng)用方...
鼠尾膠原蛋白Ⅰ型使用方法及注意事項(xiàng):通過(guò)醋酸抽提,、氯化鈉沉淀,、磷酸氫二鈉沉淀等步驟制備的。鼠尾膠原蛋白可用于包被細(xì)胞培養(yǎng)器皿,培養(yǎng)一些在普通細(xì)胞培養(yǎng)器皿中不易貼壁的細(xì)胞,。也可用于制備三維膠,,模擬真實(shí)的生長(zhǎng)環(huán)境,使細(xì)胞在三維環(huán)境中生長(zhǎng),。1,,在使用鼠膠原蛋白型包被的細(xì)胞培養(yǎng)皿中檢查到PC-12細(xì)胞的貼壁和生長(zhǎng)。1mg/ml濃度以上,,pH左右時(shí)可形成具有一定強(qiáng)度的三維膠,,檢查到NIH-3T3細(xì)胞在三維膠內(nèi)正常生長(zhǎng)、PC-12細(xì)胞在三維膠表面正常生長(zhǎng),。使用方法:1,、細(xì)胞培養(yǎng)器皿的表面包被推薦濃度:1-5ug/cm0.012mg/ml。按以下表格體積加到相應(yīng)的培養(yǎng)器皿中,。論鼠尾膠原能促進(jìn)毛細(xì)胞貼壁,,涂布...
除了讓細(xì)胞更好貼上去,鼠尾膠原蛋白還能用于制備三維膠,,這樣可以在培養(yǎng)皿中一定程度上模擬身體內(nèi)部的生長(zhǎng)環(huán)境,,讓細(xì)胞在更真實(shí)地條件下進(jìn)行生長(zhǎng),。當(dāng)然,除了這些,耗子尾汁還能做到很多事情,,只需要打開(kāi)網(wǎng)站——知網(wǎng),,輸入鼠尾膠原蛋白就能看到,,例如鼠尾膠原蛋白可用于制備防皺保濕或美白產(chǎn)品,,制作止血海綿敷料等各種用途。NO.3鼠尾DNA除了從整條鼠尾中提取的鼠尾膠原蛋白,,老鼠的尾巴尖尖也是制備「耗子尾汁」的好材料,。蘇州君欣生物科技有限公司制備鼠尾膠原:吸取上清,分裝成小瓶,,4℃保存,。寧波鼠尾膠原服務(wù)電話鼠尾膠原蛋白的用途是什么:在工業(yè)應(yīng)用方面,鼠尾膠原蛋白用于培養(yǎng)容器等實(shí)驗(yàn)室設(shè)備的內(nèi)部涂層,。設(shè)備上的膠原蛋白薄...
I型鼠尾膠原是借鑒NavneetaRajan,JasonHabermehl法,,經(jīng)過(guò)乙酸抽提、離心,、滅菌、透析等步驟制備得到的高純度,、高活性膠原蛋白,,屬于醫(yī)藥級(jí)別產(chǎn)品,可用于包被細(xì)胞培養(yǎng)器皿(單分子層包被),適合多種類(lèi)型細(xì)胞的貼壁如肝臟細(xì)胞,、神經(jīng)節(jié)細(xì)胞,、胚胎細(xì)胞、肌細(xì)胞,、肺細(xì)胞,、神經(jīng)鞘細(xì)胞等。I型膠原蛋白包被細(xì)胞培養(yǎng)板,,規(guī)格為6/24孔板,,表面經(jīng)I型膠原蛋白包被,可以很好的降低蛋白質(zhì)的吸附,。使用這種細(xì)胞培養(yǎng)板培養(yǎng)細(xì)胞,,可以獲得良好的細(xì)胞貼壁率,細(xì)胞增殖速度快,,形態(tài)均一,,細(xì)胞培養(yǎng)成功率高。它是研究成纖維細(xì)胞與細(xì)胞外基質(zhì)之間以及細(xì)胞之間相互作用的良好模型,。武漢正規(guī)鼠尾膠原平均價(jià)格一種海貍鼠尾膠原手術(shù)...
膠原蛋白的提取方法:酸法提?。核岱ㄌ崛≈饕捎玫碗x子濃度酸性條件浸漬處理原料,從而破壞分子間的鹽鍵和希夫堿,,而引起纖維膨脹,、溶解。作為溶劑使用的酸,,主要有鹽酸或亞硫酸,、磷酸、硫酸,、醋酸,、檸檬酸和甲酸等。酸法是提取膠原蛋白比較常用和有效的方法,,用酸法提取的膠原較大程度地保持了其三股螺旋結(jié)構(gòu),。此法處理快速,所得產(chǎn)品的分子量是連續(xù)的,,適用于醫(yī)用生物材料及原料的制備,,但產(chǎn)品得率低,設(shè)備腐蝕嚴(yán)重,,污染重,。趙蒼碧等[2]采用0.3%的醋酸溶液在4℃下從牛腱中提取膠原蛋白,得到高純度的膠原蛋白溶液,。加入適當(dāng)體積的細(xì)胞培養(yǎng)液,,轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)箱中培養(yǎng),。金華鼠尾膠原廠家供應(yīng)鼠尾膠原蛋白Ⅰ型使用方法及注意事項(xiàng):三維膠原...
膠原蛋白占人體蛋白質(zhì)總量的三分之一,不論來(lái)源于哪一種動(dòng)物或哪一種組織的膠原都有許多共同特性,。膠原蛋白可分為20幾個(gè)亞型,,但為常見(jiàn)的為I、II,、III型膠原蛋白,,即間質(zhì)膠原蛋白。其中I型為豐富且品質(zhì)優(yōu)良,。劃重點(diǎn):任何動(dòng)物的膠原都有許多共性,,I型膠原蛋白為豐富且品質(zhì)優(yōu)良,鼠尾膠原蛋白是I型膠原蛋白,。于是,,動(dòng)物中心就進(jìn)行了有關(guān)“耗子尾汁”的發(fā)明:一種基于鼠尾膠原蛋白制備的可吸收止血材料及其制備方法并在說(shuō)明書(shū)中給出了原因:“一般的生物體中提取的膠原蛋白多為混合型,之前多從牛皮,、豬皮,、牛腱中提取,但這類(lèi)膠原蛋白不僅有油脂等其他雜質(zhì),,酸法是提取膠原蛋白比較常用和有效的方法,,用酸法提取的膠原較大程度地保持了...
鼠尾膠原:含細(xì)胞三維膠原凝膠的制備(以配制1mg/mL三維膠1mL為例)準(zhǔn)備好懸浮于培養(yǎng)液的細(xì)胞,并放置于冰浴中,。將200μL本品加到12μL0.1mol/LNaOH中(如果反過(guò)來(lái)把12μL0.1mol/LNaOH加到膠原溶液中,,會(huì)由于NaOH不能迅速混勻而產(chǎn)生局部的膠原凝結(jié)),立即混勻,。再加入23μL10×PBS或10×培養(yǎng)液,,混勻后立即加到培養(yǎng)器皿中(混勻后pH為7左右,如果PBS或培養(yǎng)液中沒(méi)有加酚紅,,初次使用時(shí)需要測(cè)定pH值),。加入760μL的細(xì)胞懸浮液,混勻后立即加到培養(yǎng)器皿中,。將培養(yǎng)器皿在室溫放置20min待膠凝固后,,加入適當(dāng)體積的細(xì)胞培養(yǎng)液,轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)箱中培養(yǎng),。本品在室溫下pH中性...
鼠尾膠原凝膠體在皮膚細(xì)胞原代培養(yǎng)中的應(yīng)用:在國(guó)外的藥理,毒理和皮膚病學(xué)的研究領(lǐng)域中已得到的限翩,否則培養(yǎng)成功率極低.本文采用鼠尾膠原凝膠體作為滋養(yǎng)層,提高了培養(yǎng)細(xì)胞的材料和方法r1]實(shí)驗(yàn)材料:培養(yǎng)液DEIdE(G皿}ao),表皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(EGFSigma),小牛血清(上海祟明生物制品廠),氫化可的松,胰島素(Sigm,青,鏈霉素,胰蛋白酶,]~DTA,細(xì)胞培養(yǎng)皿~35mill(00rningrSA).(2)皮膚基底細(xì)胞的分離和細(xì)胞懸液的制備:2~3d的新生大鼠(wisr),以75%酒精消毒背部皮膚,剪下皮膚后.以消化12h.輕刷表皮面,收集細(xì)胞懸液,加入細(xì)胞培養(yǎng)液.用梯度離心收集細(xì)胞,以3...
鼠尾膠原實(shí)驗(yàn)應(yīng)用:鼠尾膠原在原代培養(yǎng)耳蝸血管紋邊緣細(xì)胞中的應(yīng)用,。目的:建立利用自制的鼠尾膠原培養(yǎng)大鼠耳蝸邊緣細(xì)胞的方法。方法:制作鼠尾膠原,并觀察利用自制的鼠尾膠原所培養(yǎng)出大鼠耳蝸邊緣細(xì)胞的效果,。結(jié)果:自制的鼠尾膠原能正常地培養(yǎng)出大鼠耳蝸邊緣細(xì)胞,,細(xì)胞角蛋白18表達(dá)陽(yáng)性,免疫組織化學(xué)結(jié)果和掃描電鏡證實(shí)所培養(yǎng)的細(xì)胞具有典型的分泌上皮細(xì)胞特征,。結(jié)論:成功建立了利用自制鼠尾膠原培養(yǎng)大鼠耳蝸邊緣細(xì)胞的方法,,并且制作簡(jiǎn)便,成本低廉,。在冰水浴中將粉碎的鼠尾腱在醋酸溶液中溶脹,。寧波廣州鼠尾膠原酸解提取鼠尾Ⅰ型膠原及相對(duì)分子質(zhì)量和濃度檢測(cè)鼠尾肌腱在醋酸溶液的酸解作用下,,其腱性組織被水解成膠凍狀溶液,從而分解成...
要準(zhǔn)備的器具:組織剪2把,,有齒鑷1把,,無(wú)齒鑷1把,200ml燒杯1個(gè),,培養(yǎng)皿1個(gè),,帶蓋廣口瓶1個(gè),離心管,、小瓶數(shù)個(gè),,滴管若干。以上物品須經(jīng)嚴(yán)格高壓消毒滅菌,。需配制的液體0.1%醋酸溶液,。經(jīng)44.48N10min高壓蒸汽滅菌(或是過(guò)濾除菌)后備用。此外還有用消毒雙蒸水配制75%酒精溶液,。取大鼠尾巴,,洗凈,置75%酒精浸泡消毒后,,手持尾巴,,用止血鉗夾住尾巴較高,折斷尾骨后拉出尾腱,,將尾腱剪碎后置消毒的三角燒瓶中,,稱(chēng)尾腱的重量,按每克尾腱50ml的比例加入0.1%醋酸溶液,,搖晃,,使尾腱分散于醋酸溶液中,4℃放置48小時(shí),,離心,。吸取其上清,分裝至小瓶,,4℃保存,。上述制備過(guò)程均在無(wú)菌條件下完成。使用溶解...
鼠尾膠原蛋白Ⅰ型使用方法及注意事項(xiàng):三維膠原的制備鼠尾膠原蛋白型在濃度1mg/ml以上,,pH左右時(shí)可形成具有一定強(qiáng)度三維膠,建議成膠濃度1-2mg/ml,。膠原蛋白溶解于0.006mol/L乙酸中,在成膠過(guò)程中需要加入0.06體積的0.1mol/LNaOH來(lái)中和,。需要的溶液(均需要無(wú)菌,、預(yù)冷)10mg/L酚紅用于pH指示)0.1mol/LNaOH,,0.1mol/L乙酸(一般不用),雙蒸水200ul鼠尾膠原蛋白型(5mg/ml)加到置于冰浴的離心管中,,加入690ulH2O12ul0.1mol/LNaOH12ul0.1mol/LNaOH加到膠原溶液中,,會(huì)由于NaOH不能迅速混勻而產(chǎn)生局部的膠原凝結(jié))...
鼠尾膠原:鼠尾膠原是一種天然培養(yǎng)基和一種天然的黏附劑。實(shí)驗(yàn)設(shè)備及材料:大鼠尾巴,、剪刀,、鑷子、止血鉗,、彎頭吸管,、平皿、三角燒瓶,、燒杯,、量筒、天平,、生理鹽水,、75%酒精、0.1%醋酸溶液,、蓋玻片,、培養(yǎng)瓶、鉆石筆,、鼠尾膠原,。實(shí)驗(yàn)內(nèi)容:1、制備鼠尾膠原(兩個(gè)同學(xué)一組操作),。2,、切割小玻片。3,、利用鼠尾膠原將小玻片固定于培養(yǎng)瓶?jī)?nèi),。制備鼠尾膠原:1、取大鼠尾巴洗凈,,75%酒精浸泡5分鐘,;2、手持尾巴,,用止血鉗夾住鼠尾的,,折斷尾骨后拉出尾腱;3,、將尾腱剪斷置于平皿中,,生理鹽水浸泡;4,、重復(fù)步驟2,、3,,直至尾腱量夠用;5,、吸去生理鹽水,,將尾腱稱(chēng)重(0.5-1克);6,、將尾腱置于平皿內(nèi)剪碎,,轉(zhuǎn)移至三角燒瓶中,;7...
酸解提取鼠尾Ⅰ型膠原及相對(duì)分子質(zhì)量和濃度檢測(cè)鼠尾肌腱在醋酸溶液的酸解作用下,,其腱性組織被水解成膠凍狀溶液,從而分解成鼠尾Ⅰ型膠原蛋白分子,。抽取鼠尾Ⅰ型膠原150μL滴在薄膜上,,可形成液滴狀膠原蛋白凝膠(,其生物力學(xué)強(qiáng)度極差,,一碰即散,。將鼠尾膠原蛋白進(jìn)行SDS-PAGE,結(jié)果顯示:Ⅰ型膠原蛋白原液在相對(duì)分子質(zhì)量130000附近有明顯條帶,,另一條帶的相對(duì)分子質(zhì)量大于170000(圖2),。膠原蛋白濃度為1.8mg/mL。吸取礦化液倒入小培養(yǎng)皿中,,將鼠尾Ⅰ型膠原纖維浸泡在礦化液中,。礦化2、6d后,,分別將礦化后的Ⅰ型膠原纖維進(jìn)行TEM和電子衍射觀察,。將無(wú)組織纖維、脂肪和多糖殘留的鼠尾腱,,真空冷凍干燥備用...
一種基于鼠尾膠原蛋白制備的可吸收止血材料及其制備方法:膠原蛋白是脊椎動(dòng)物和無(wú)脊椎動(dòng)物支持結(jié)構(gòu)的主要組成,。在人的身體中這是皮膚、筋,、軟骨,、骨骼及結(jié)締組織的較主要的蛋白質(zhì)。膠原蛋白占人體蛋白質(zhì)總量的三分之一,,不論來(lái)源于哪一種動(dòng)物或哪一種組織的膠原都有許多共同特性,。氨基酸組成中約有三分之一為甘氨酸,有脯氨酸和羥脯氨酸,。根據(jù)其遺傳分子結(jié)構(gòu)遺傳基因的差別,,膠原蛋白分為20幾個(gè)亞型。但較為常見(jiàn)的為Ι,、Π,、ΙΙΙ型膠原蛋白,,即間質(zhì)膠原蛋白。其中I型較為豐富且品質(zhì)優(yōu)良,。I型膠原蛋白分布非常普遍,,是主纖維束的主要成分,給結(jié)締組織以強(qiáng)度,;是較豐富的膠原蛋白類(lèi)型,,尤其是在皮膚真皮、骨,、筋和腱中,。鼠尾膠原、多聚賴(lài)氨酸...
鼠尾膠原:鼠尾膠原是一種天然培養(yǎng)基和一種天然的黏附劑,。實(shí)驗(yàn)設(shè)備及材料:大鼠尾巴,、剪刀、鑷子,、止血鉗,、彎頭吸管、平皿,、三角燒瓶,、燒杯、量筒,、天平,、生理鹽水、75%酒精,、0.1%醋酸溶液,、蓋玻片、培養(yǎng)瓶,、鉆石筆,、鼠尾膠原。實(shí)驗(yàn)內(nèi)容:1,、制備鼠尾膠原(兩個(gè)同學(xué)一組操作),。2、切割小玻片,。3,、利用鼠尾膠原將小玻片固定于培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)。制備鼠尾膠原:1,、取大鼠尾巴洗凈,,75%酒精浸泡5分鐘;2、手持尾巴,,用止血鉗夾住鼠尾的,,折斷尾骨后拉出尾腱;3,、將尾腱剪斷置于平皿中,,生理鹽水浸泡;4,、重復(fù)步驟2,、3,直至尾腱量夠用,;5,、吸去生理鹽水,將尾腱稱(chēng)重(0.5-1克),;6,、將尾腱置于平皿內(nèi)剪碎,轉(zhuǎn)移至三角燒瓶中,;7...
膠原蛋白的應(yīng)用:1.膠原天然的緊密的纖維結(jié)構(gòu),使膠原材料顯示出很強(qiáng)的韌性和強(qiáng)度,,適用于薄膜材料的制備,;2.大較膠原被用作制造腸衣等可食用包裝材料.其獨(dú)特之處是:在熱處理過(guò)程中.隨著水分和油脂的蒸發(fā)和熔化.膠原幾乎與肉食的收縮率一致。而其他的可食用包裝材料還沒(méi)被發(fā)現(xiàn)具有這品質(zhì),;3.由于膠原分子鏈上含有大量的親水基團(tuán).所以與水結(jié)合的能力很強(qiáng).這一性質(zhì)使膠原在食品中可以用作填充劑和凝膠,;4.膠原在酸性和堿性介質(zhì)中膨脹,這一性質(zhì)也應(yīng)用于制備膠原基材料的處理工藝中,。期間不斷攪拌,,防止凍結(jié)成塊,得到膠原溶脹液,。濟(jì)南正規(guī)鼠尾膠原報(bào)價(jià)酸解提取鼠尾Ⅰ型膠原及相對(duì)分子質(zhì)量和濃度檢測(cè)鼠尾肌腱在醋酸溶液的酸解作用下,,...
鼠尾膠原在心肌細(xì)胞氧化損傷中的保護(hù)作用:原蛋白具有抗氧化作用,但既往在實(shí)驗(yàn)室主要將鼠尾膠原用于促進(jìn)細(xì)胞貼壁和支架構(gòu)建,對(duì)于其抗氧化作用目前尚無(wú)相關(guān)研究。目的:探討鼠尾膠原對(duì)過(guò)氧化氫導(dǎo)致離體心肌細(xì)胞氧化損傷的保護(hù)作用,。方法:將原代培養(yǎng)的SD大鼠乳鼠心肌細(xì)胞隨機(jī)接種到鋪有鼠尾膠原的培養(yǎng)皿(實(shí)驗(yàn)組)和普通培養(yǎng)皿(對(duì)照組)中,并且均用0,10,100μmol/LH2O2誘導(dǎo),。24h后,以電子顯微鏡觀察各組乳鼠心肌細(xì)胞的形態(tài),應(yīng)用MTT比色法檢測(cè)心肌細(xì)胞存活率,TUNEL法檢測(cè)心肌細(xì)胞凋亡形態(tài),流式細(xì)胞技術(shù)檢測(cè)心肌細(xì)胞凋亡率,黃嘌呤氧化酶法檢測(cè)超氧化物歧化酶活力,硫代巴比妥比色法檢測(cè)丙二醛水平,West...