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鼠尾Ⅰ型膠原：選擇適當(dāng)?shù)墓切迯?fù)材料是治好骨缺損的中心環(huán)節(jié)。目前，臨床上常用的有人工骨移植,、自體骨移植和同種異體骨移植,。其中，人工骨材料多為磷酸三鈣,、半水硫酸鈣等含有鈣和磷的無(wú)機(jī)礦物材料[1-2],，由于不含自體骨組織中的有機(jī)大分子Ⅰ型膠原蛋白，其臨床療效遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于自體骨組織,。但是,，自體骨移植和同種異體骨移植均來(lái)源于人類自身骨組織，數(shù)量有限,，難以滿足臨床需要,。因此，研發(fā)與人類自體骨組織化學(xué)成分和分子結(jié)構(gòu)相近的仿生骨材料,，成為全世界骨組織工程學(xué)者孜孜以求的目標(biāo),。由于天然骨組織是Ⅰ型膠原蛋白和羥基磷灰石鈣生物礦化的產(chǎn)物，在分子結(jié)構(gòu)上,，羥基磷灰石鈣晶體是以Ⅰ型膠原纖維為模板,，呈片狀鑲嵌在膠原纖維分子間隙，...

膠原蛋白的提取方法：酶法提?。好阜ㄌ崛∈抢玫鞍酌甘鼓z原溶解,，水解條件溫和，反應(yīng)速率快,，提取的膠原蛋白仍有完整的三股螺旋結(jié)構(gòu),，蛋白純度高，理化性質(zhì)穩(wěn)定,，且無(wú)環(huán)境污染,。酶法提取常用的蛋白酶有：胃蛋白酶、胰蛋白酶或者復(fù)合酶,。工藝可選擇一步法,，即利用酶液直接提取,；二步法,，即先用酸或者堿進(jìn)行初步提取，然后再用酶提取。Langmaier等[6]用MgO預(yù)處理革屑,，然后用堿性蛋白酶提取膠原的水解產(chǎn)物,。CabezaL.F.T等[7]先用胃蛋白酶，再用堿性蛋白酶提取了2種不同的膠原水解產(chǎn)物,。趙蒼碧等[2]采用胃蛋白酶和無(wú)花果蛋白酶消化法從牛腱中提取膠原蛋白,，探討了酶和酶的加入量對(duì)提取結(jié)果的影響，給出了酶對(duì)膠原...

一種基于鼠尾膠原蛋白制備的可吸收止血材料及其制備方法：膠原蛋白是脊椎動(dòng)物和無(wú)脊椎動(dòng)物支持結(jié)構(gòu)的主要組成,。在人的身體中這是皮膚,、筋、軟骨,、骨骼及結(jié)締組織的較主要的蛋白質(zhì),。膠原蛋白占人體蛋白質(zhì)總量的三分之一，不論來(lái)源于哪一種動(dòng)物或哪一種組織的膠原都有許多共同特性,。氨基酸組成中約有三分之一為甘氨酸,，有脯氨酸和羥脯氨酸。根據(jù)其遺傳分子結(jié)構(gòu)遺傳基因的差別,，膠原蛋白分為20幾個(gè)亞型,。但較為常見(jiàn)的為Ι、Π,、ΙΙΙ型膠原蛋白,，即間質(zhì)膠原蛋白。其中I型較為豐富且品質(zhì)優(yōu)良,。I型膠原蛋白分布非常普遍,，是主纖維束的主要成分，給結(jié)締組織以強(qiáng)度,；是較豐富的膠原蛋白類型,，尤其是在皮膚真皮、骨,、筋和腱中,。期間不斷攪拌，防止凍...

鼠尾膠原蛋白Ⅰ型使用說(shuō)明：不含細(xì)胞的三維膠原的制備（以配制1毫升,，1mg/ml三維膠為例）：將200ul鼠尾膠原蛋白I型(5mg/ml)加到置于冰浴的離心管中,，加入690ulH2O。然后加到12ul0.1mol/LNaOH中（如果反過(guò)來(lái)把12ul0.1mol/LNaOH加到膠原溶液中,，會(huì)由于NaOH不能迅速混勻而產(chǎn)生局部的膠原凝結(jié)），立即混勻,。再加入100ul10×PBS或10×培養(yǎng)液,，混勻后立即加到培養(yǎng)器皿中(混勻后pH為7左右，如果PBS或培養(yǎng)液中沒(méi)有加酚紅，初次使用時(shí)需要用pH試紙測(cè)試),。將培養(yǎng)器皿在室溫(25度左右)下放置20分鐘待膠凝固后,，轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)箱內(nèi)。如果配制中使用的是10×PB...

鼠尾Ⅰ型膠原：組裝液的配置：1.50mmol/L甘氨酸+200mmol/L氯化鉀100mL,，用1mol/L氫氧化鈉調(diào)節(jié)酸堿度至9.2,。2.膠原纖維的重構(gòu)吸取膠原10μL至小培養(yǎng)皿中，倒入0.5mL自組裝液,，室溫放置20min,。予自組裝液自組裝24h。吸取0.05%戊二醛2mL至小培養(yǎng)皿中,，將自組裝24h的膠原浸泡在戊二醛中,。然后將膠原經(jīng)去離子水、50%乙醇,、100%乙醇依次漂洗后進(jìn)行TEM觀察,。3.生物礦化形成仿生骨材料靜滴配置鈣磷礦化液將25mL鈣液(10mmol/L二水氯化鈣+150mmol/L氯化鈉+50mmol/L三羥甲基氨基甲烷+0.02%三氮化鈉)倒入燒杯中，滴入聚丙烯(PAA)至...

鼠尾Ⅰ型膠原：選擇適當(dāng)?shù)墓切迯?fù)材料是治好骨缺損的中心環(huán)節(jié),。目前,，臨床上常用的有人工骨移植、自體骨移植和同種異體骨移植,。其中,，人工骨材料多為磷酸三鈣、半水硫酸鈣等含有鈣和磷的無(wú)機(jī)礦物材料[1-2],，由于不含自體骨組織中的有機(jī)大分子Ⅰ型膠原蛋白,，其臨床療效遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于自體骨組織。但是,，自體骨移植和同種異體骨移植均來(lái)源于人類自身骨組織,，數(shù)量有限，難以滿足臨床需要,。因此,，研發(fā)與人類自體骨組織化學(xué)成分和分子結(jié)構(gòu)相近的仿生骨材料，成為全世界骨組織工程學(xué)者孜孜以求的目標(biāo),。由于天然骨組織是Ⅰ型膠原蛋白和羥基磷灰石鈣生物礦化的產(chǎn)物,，在分子結(jié)構(gòu)上，羥基磷灰石鈣晶體是以Ⅰ型膠原纖維為模板,，呈片狀鑲嵌在膠原纖維分子間隙,，...

鼠尾膠原在心肌細(xì)胞氧化損傷中的保護(hù)作用：兩組培養(yǎng)皿中，隨著過(guò)氧化氫濃度的增高,，均可見(jiàn)細(xì)胞凋亡狀態(tài)明顯加重,，細(xì)胞存活率及細(xì)胞內(nèi)過(guò)氧化氫活力明顯下降,，細(xì)胞凋亡率及細(xì)胞內(nèi)丙二醛水平明顯增高，Bcl-2/Bax比值明顯降低,，呈劑量依賴性,。而在相同濃度過(guò)氧化氫誘導(dǎo)下，與對(duì)照組相比,，實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞凋亡狀態(tài)明顯減弱,，細(xì)胞存活率、超氧化物歧化酶活力及Bcl-2/Bax比值增高,，細(xì)胞凋亡率和丙二醛水平明顯減低,。表明鼠尾膠原對(duì)過(guò)氧化氫所致的心肌細(xì)胞氧化損傷具有保護(hù)作用，其機(jī)制可能與提高超氧化物歧化酶活力,，減少丙二醛產(chǎn)生及提高Bcl-2的表達(dá)有關(guān),。在室溫中攪拌1-3小時(shí)直到完全溶解。昆明正規(guī)鼠尾膠原哪里買膠原蛋白的功效...

一種基于鼠尾膠原蛋白制備的可吸收止血材料及其制備方法：膠原蛋白是脊椎動(dòng)物和無(wú)脊椎動(dòng)物支持結(jié)構(gòu)的主要組成,。在人的身體中這是皮膚,、筋、軟骨,、骨骼及結(jié)締組織的較主要的蛋白質(zhì),。膠原蛋白占人體蛋白質(zhì)總量的三分之一，不論來(lái)源于哪一種動(dòng)物或哪一種組織的膠原都有許多共同特性,。氨基酸組成中約有三分之一為甘氨酸,，有脯氨酸和羥脯氨酸。根據(jù)其遺傳分子結(jié)構(gòu)遺傳基因的差別,，膠原蛋白分為20幾個(gè)亞型,。但較為常見(jiàn)的為Ι、Π,、ΙΙΙ型膠原蛋白,，即間質(zhì)膠原蛋白。其中I型較為豐富且品質(zhì)優(yōu)良,。I型膠原蛋白分布非常普遍,，是主纖維束的主要成分，給結(jié)締組織以強(qiáng)度,；是較豐富的膠原蛋白類型,，尤其是在皮膚真皮、骨,、筋和腱中,。注意事項(xiàng)：在室溫下p...

酸解提取鼠尾Ⅰ型膠原及相對(duì)分子質(zhì)量和濃度檢測(cè)鼠尾肌腱在醋酸溶液的酸解作用下，其腱性組織被水解成膠凍狀溶液,，從而分解成鼠尾Ⅰ型膠原蛋白分子,。抽取鼠尾Ⅰ型膠原150μL滴在薄膜上,，可形成液滴狀膠原蛋白凝膠(,，其生物力學(xué)強(qiáng)度極差,，一碰即散。將鼠尾膠原蛋白進(jìn)行SDS-PAGE,，結(jié)果顯示：Ⅰ型膠原蛋白原液在相對(duì)分子質(zhì)量130000附近有明顯條帶,，另一條帶的相對(duì)分子質(zhì)量大于170000(圖2)。膠原蛋白濃度為1.8mg/mL,。吸取礦化液倒入小培養(yǎng)皿中,，將鼠尾Ⅰ型膠原纖維浸泡在礦化液中。礦化2,、6d后,，分別將礦化后的Ⅰ型膠原纖維進(jìn)行TEM和電子衍射觀察。從包被表面除去多余的液體,。過(guò)夜干燥,。杭州成都鼠尾膠原鼠...

三維膠原的制備：鼠尾膠原蛋白I型在濃度1mg/ml以上，pH7左右時(shí)可形成具有一定強(qiáng)度三維膠,建議成膠濃度1-2mg/ml,。膠原蛋白溶解于0.006mol/L乙酸中,，在成膠過(guò)程中需要加入0.06X體積的0.1mol/LNaOH來(lái)中和。需要的溶液(均需要無(wú)菌,、預(yù)冷):10xPBS(可含10mg/L的酚紅用于pH指示)或10x培養(yǎng)液,0.1mol/LNaOH,0.1mol/L乙酸(一般不用),雙蒸水A．不含細(xì)胞的三維膠原的制備（以配制1毫升,，1mg/ml三維膠為例）：將200ul鼠尾膠原蛋白I型(5mg/ml)加到置于冰浴的離心管中，加入690ulH2O,。然后加到12ul0.1mol/LNaOH中...

利用鼠尾Ⅰ型膠原構(gòu)建與人類自體骨組織化學(xué)成分和分子結(jié)構(gòu)相近的仿生骨材料,。方法通過(guò)醋酸酸解提取鼠尾Ⅰ型膠原蛋白,，并重構(gòu)成膠原纖維。然后，將重構(gòu)后的膠原纖維放置在礦化液中模仿骨生物礦化2～6d,，通過(guò)透射電子顯微鏡和電子衍射觀察骨生物礦化。結(jié)果酸解提取的鼠尾Ⅰ型膠原蛋白能夠重構(gòu)成膠原纖維,，并且具有特征性的D-Band結(jié)構(gòu),。透射電子顯微鏡和電子衍射顯示：礦化2d后，羥基磷灰石鈣前體滲入膠原纖維,，膠原纖維部分礦化,；礦化6d后，膠原纖維內(nèi)部完全礦化,，形成Ⅰ型膠原蛋白/羥基磷灰石鈣的仿生骨材料,。結(jié)論利用酸解法提取的鼠尾Ⅰ型膠原蛋白可以重構(gòu)成膠原纖維，經(jīng)礦化可形成與人類自體骨組織化學(xué)成分和分子結(jié)構(gòu)一致的仿生骨...

鼠尾膠原醋酸溶解：1．將鼠尾膠原加入到0.1M的醋酸中,，制備成濃度為0.1%的溶液,。在室溫中攪拌1-3小時(shí)直到完全溶解,。2．建議將溶液轉(zhuǎn)移到擰口的玻璃瓶中，并小心的在瓶底鋪上一層氯仿,。氯仿的量約為膠原溶液的10%,。不要晃動(dòng)或攪拌。在2-8度中放置過(guò)夜,。在無(wú)菌條件下轉(zhuǎn)移上層的膠原溶液,。我們不建議用過(guò)濾的方法無(wú)菌化。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)該方法會(huì)導(dǎo)致丟失蛋白,。3．稀釋一定數(shù)量的膠原溶液,。4．按照6-10ug/cm2的濃度包被培養(yǎng)瓶。在室溫或37度結(jié)合數(shù)小時(shí)或者2-8度過(guò)夜,。凍干鼠尾腱經(jīng)低溫凍干粉碎至目,。重慶正規(guī)鼠尾膠原廠家批發(fā)價(jià)實(shí)驗(yàn)應(yīng)用：探討應(yīng)用鼠尾膠原在豚鼠前庭毛細(xì)胞膜片鉗實(shí)驗(yàn)中的促進(jìn)毛細(xì)胞貼壁效果。方法制作...

要準(zhǔn)備的器具：組織剪2把,，有齒鑷1把,，無(wú)齒鑷1把，200ml燒杯1個(gè),，培養(yǎng)皿1個(gè),，帶蓋廣口瓶1個(gè)，離心管,、小瓶數(shù)個(gè),，滴管若干。以上物品須經(jīng)嚴(yán)格高壓消毒滅菌,。需配制的液體0.1％醋酸溶液,。經(jīng)44.48N10min高壓蒸汽滅菌(或是過(guò)濾除菌)后備用。此外還有用消毒雙蒸水配制75％酒精溶液,。取大鼠尾巴,，洗凈，置75%酒精浸泡消毒后,，手持尾巴,，用止血鉗夾住尾巴較高，折斷尾骨后拉出尾腱,，將尾腱剪碎后置消毒的三角燒瓶中,，稱尾腱的重量，按每克尾腱50ml的比例加入0.1%醋酸溶液,，搖晃,，使尾腱分散于醋酸溶液中，4℃放置48小時(shí),，離心,。吸取其上清,，分裝至小瓶，4℃保存,。上述制備過(guò)程均在無(wú)菌條件下完成,。涂布鼠尾...

鼠尾膠原蛋白的用途是什么：將尾巴從動(dòng)物身體切除后，會(huì)冷凍起來(lái),，并提取尾巴里的筋腱,。然后，將筋腱切成小塊,，并在離心處理之前添加到由醋酸和水勾兌而成的混合物中。用這種方法,，能將膠原蛋白從動(dòng)物材料中分離出來(lái),。在食品加工領(lǐng)域，鼠尾膠原蛋白用于生產(chǎn)明膠并添加到布丁和棉花糖中,。它還可以當(dāng)作酸奶,，冰淇淋，果醬和奶油芝士等食品的增稠劑使用,。在一些低脂肪食品中,，它用于模仿全脂食品的感覺(jué)和質(zhì)地。它還用于生產(chǎn)膳食保健品,，據(jù)說(shuō)能讓手指甲和皮膚看起來(lái)更好,。此外，還有基于膠原蛋白的保健品,，可用于促進(jìn)關(guān)節(jié)健康,。方法制作鼠尾膠原，觀察全細(xì)胞膜片鉗實(shí)驗(yàn)中,，自制的鼠尾膠原對(duì)前庭毛細(xì)胞的貼壁黏附作用,。珠海鼠尾膠原產(chǎn)品介紹鼠尾膠原在...

實(shí)驗(yàn)應(yīng)用：探討應(yīng)用鼠尾膠原在豚鼠前庭毛細(xì)胞膜片鉗實(shí)驗(yàn)中的促進(jìn)毛細(xì)胞貼壁效果。方法制作鼠尾膠原,，觀察全細(xì)胞膜片鉗實(shí)驗(yàn)中,，自制的鼠尾膠原對(duì)前庭毛細(xì)胞的貼壁黏附作用。結(jié)果無(wú)鼠尾膠原時(shí),，前庭毛細(xì)胞懸浮于外液,，不宜封接；有鼠尾膠原時(shí),，前庭毛細(xì)胞貼附于培養(yǎng)皿底壁,，易于封接和長(zhǎng)時(shí)間(約8h)的觀察和記錄。鼠尾膠原對(duì)前庭毛細(xì)胞具有良好的貼壁黏附促進(jìn)作用,。結(jié)論鼠尾膠原能促進(jìn)毛細(xì)胞貼壁,，涂布鼠尾膠原有利于膜片鉗實(shí)驗(yàn)的長(zhǎng)時(shí)程記錄,，并且制作簡(jiǎn)便，成本低廉,。將培養(yǎng)器皿在室溫放置20min待膠凝固后,，轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)箱內(nèi)。廈門正規(guī)鼠尾膠原單價(jià)一種基于鼠尾膠原蛋白制備的可吸收止血材料及其制備方法：膠原蛋白是脊椎動(dòng)物和無(wú)脊椎動(dòng)物支...

鼠尾Ⅰ型膠原：組裝液的配置：1.50mmol/L甘氨酸+200mmol/L氯化鉀100mL,，用1mol/L氫氧化鈉調(diào)節(jié)酸堿度至9.2,。2.膠原纖維的重構(gòu)吸取膠原10μL至小培養(yǎng)皿中，倒入0.5mL自組裝液,，室溫放置20min,。予自組裝液自組裝24h。吸取0.05%戊二醛2mL至小培養(yǎng)皿中,，將自組裝24h的膠原浸泡在戊二醛中,。然后將膠原經(jīng)去離子水、50%乙醇,、100%乙醇依次漂洗后進(jìn)行TEM觀察,。3.生物礦化形成仿生骨材料靜滴配置鈣磷礦化液將25mL鈣液(10mmol/L二水氯化鈣+150mmol/L氯化鈉+50mmol/L三羥甲基氨基甲烷+0.02%三氮化鈉)倒入燒杯中，滴入聚丙烯(PAA)至...

鼠尾膠原是一種天然培養(yǎng)基和一種天然的黏附劑,，可用于細(xì)胞培養(yǎng)皿的包被,，特別適合普通細(xì)胞培養(yǎng)器皿不易貼壁細(xì)胞的培養(yǎng)；也可用于制備三維膠原凝膠,，使細(xì)胞在模擬的三維環(huán)境中生長(zhǎng),。制備鼠尾膠原方法：1、取大鼠尾巴洗凈,，75%酒精浸泡5分鐘,；2、手持尾巴,，用止血鉗夾住鼠尾的較高,，折斷尾骨后拉出尾腱；3,、將尾腱剪斷置于平皿中,，生理鹽水浸泡；4,、重復(fù)步驟2,、3，直至尾腱量夠用,；5,、吸去生理鹽水，將尾腱稱重（0.5-1克）；6,、將尾腱置于平皿內(nèi)剪碎,，轉(zhuǎn)移至三角燒瓶中；7,、按每克尾腱50ml的比例,，加入0.1%醋酸溶液；8,、搖晃,，使尾腱分散于醋酸溶液中，4℃放置一星期,；9,、離心，4000轉(zhuǎn)/分,，10-15分鐘,；10...

含細(xì)胞的三維膠原的制備（以配制1毫升，1mg/ml三維膠為例）：準(zhǔn)備好懸浮于培養(yǎng)液的細(xì)胞,，并放置于冰浴中。將200ul鼠尾膠原蛋白I型(5mg/ml)加到12ul0.1mol/LNaOH中（如果反過(guò)來(lái)把12ul0.1mol/LNaOH加到膠原溶液中,，會(huì)由于NaOH不能迅速混勻而產(chǎn)生局部的膠原凝結(jié)）,，立即混勻。再加入23ul10xPBS或10x培養(yǎng)液,，混勻(混勻后pH為7左右,，如果PBS或培養(yǎng)液中沒(méi)有加酚紅，初次使用時(shí)需要用pH試紙測(cè)試),。加入760ul的細(xì)胞懸浮液,，混勻后立即加到培養(yǎng)器皿中。將培養(yǎng)器皿在室溫下放置20分鐘待膠凝固后,，加入適當(dāng)體積的細(xì)胞培養(yǎng)液,，轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。鼠尾膠原,、多聚賴...

鼠尾膠原在心肌細(xì)胞氧化損傷中的保護(hù)作用：原蛋白具有抗氧化作用,但既往在實(shí)驗(yàn)室主要將鼠尾膠原用于促進(jìn)細(xì)胞貼壁和支架構(gòu)建,對(duì)于其抗氧化作用目前尚無(wú)相關(guān)研究,。目的:探討鼠尾膠原對(duì)過(guò)氧化氫導(dǎo)致離體心肌細(xì)胞氧化損傷的保護(hù)作用。方法:將原代培養(yǎng)的SD大鼠乳鼠心肌細(xì)胞隨機(jī)接種到鋪有鼠尾膠原的培養(yǎng)皿(實(shí)驗(yàn)組)和普通培養(yǎng)皿(對(duì)照組)中,并且均用0,10,100μmol/LH2O2誘導(dǎo),。24h后,以電子顯微鏡觀察各組乳鼠心肌細(xì)胞的形態(tài),應(yīng)用MTT比色法檢測(cè)心肌細(xì)胞存活率,TUNEL法檢測(cè)心肌細(xì)胞凋亡形態(tài),流式細(xì)胞技術(shù)檢測(cè)心肌細(xì)胞凋亡率,黃嘌呤氧化酶法檢測(cè)超氧化物歧化酶活力,硫代巴比妥比色法檢測(cè)丙二醛水平,West...

鼠尾膠原實(shí)驗(yàn)應(yīng)用：鼠尾膠原為底物的人鼻腔纖毛上皮細(xì)胞培養(yǎng)模式的建立目的建立以鼠尾膠原為貼附底物的人鼻腔纖毛上皮細(xì)胞的體外培養(yǎng)模式,，為人鼻腔黏液纖毛運(yùn)輸系統(tǒng)的研究提供科學(xué)有效的方法.方法制備鼠尾膠原并鋪片，以鼠尾膠原為貼附底物組織塊培養(yǎng)法培養(yǎng)人鼻腔纖毛上皮細(xì)胞,，培養(yǎng)7天時(shí)進(jìn)行HE染色及掃描電鏡和透射電鏡觀察細(xì)胞形態(tài)和結(jié)構(gòu),，應(yīng)用高速攝像技術(shù)測(cè)量纖毛擺動(dòng)頻率.結(jié)果鼠尾膠原要平坦均勻，平均厚度約為1mm；HE染色可見(jiàn)上皮細(xì)胞呈單層向周圍爬開(kāi),；掃描電鏡下見(jiàn)纖毛上皮細(xì)胞呈不規(guī)則多角形,，纖毛周圍可見(jiàn)微絨毛;透射電鏡下可見(jiàn)纖毛上皮細(xì)胞間為緊密連接；同一細(xì)胞任意兩點(diǎn)纖毛擺動(dòng)頻率是相同的,；同一來(lái)源體外培養(yǎng)的鉤突和...

鼠尾膠原蛋白Ⅰ型使用方法及注意事項(xiàng)：將培養(yǎng)器皿在室溫(25度左右)下放置20分鐘待膠凝固后,，轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)箱內(nèi)。如果配制中使用的是10PBS,，使用前需要加入適當(dāng)體積的細(xì)胞培養(yǎng)液預(yù)平衡,。B．含細(xì)胞的三維膠原的制備（以配制200ul鼠尾膠原蛋白(5mg/ml)加到（如果反過(guò)來(lái)把12ul0.1mol/LNaOH加到膠原溶液中，會(huì)由于NaOH不能迅速混勻而產(chǎn)生局部的膠原凝結(jié)）,，立即混勻,。再加入23ul10PBS10培養(yǎng)液，混勻(混勻后pH左右,，如果PBS或培養(yǎng)液中沒(méi)有加酚紅,，初次使用時(shí)需要用pH試紙測(cè)試)。加入760ul的細(xì)胞懸浮液,，混勻后立即加到培養(yǎng)器皿中,。將培養(yǎng)器皿在室溫下放20分鐘待膠凝固后，加入適...

鼠尾膠原蛋白的用途是什么：在工業(yè)應(yīng)用方面,，鼠尾膠原蛋白用于培養(yǎng)容器等實(shí)驗(yàn)室設(shè)備的內(nèi)部涂層,。設(shè)備上的膠原蛋白薄層通常被允許干燥。它還可以用來(lái)制造一種凝膠,，可當(dāng)作懸浮細(xì)胞的培養(yǎng)基,。此外，還可以把它當(dāng)膠水使用,。在化妝品行業(yè),，鼠尾膠原蛋白可當(dāng)作沐浴液和肥皂中的凝膠。它還用于生產(chǎn)能減少皺紋和改善皮膚質(zhì)量的面霜或護(hù)膚霜,。不過(guò),，用于撫紋，或使嘴唇顯得更大更飽滿的注射用膠原蛋白通常是從?；蜇i提取,。不過(guò)，用于撫紋,，或使嘴唇顯得更大更飽滿的注射用膠原蛋白通常是從?；蜇i提取。膠原蛋白是一種蛋白質(zhì),，能幫助連接皮膚,，骨頭和肌腱等身體組織。長(zhǎng)沙鼠尾膠原直銷廠家實(shí)驗(yàn)應(yīng)用：鼠尾膠原在原代培養(yǎng)耳蝸血管紋邊緣細(xì)胞中的應(yīng)用。目的：...

膠原蛋白分離提純實(shí)驗(yàn)方案：提取鼠尾膠原蛋白的實(shí)驗(yàn)步驟：1,、使用溶解有一定比例胃蛋白酶的酸溶液對(duì)初步處理的鼠尾腱進(jìn)行酶解,，持續(xù)一段時(shí)間待混合物變成無(wú)色、透明,、粘稠液體后即可在4℃,，5000g的離心力下離心20min，收集上清即為粗制鼠尾膠原蛋白原液,。2,、將一定濃度的氯化鈉溶液加入其中，持續(xù)攪拌直至白色絮狀沉淀從溶液中析出,，繼續(xù)加入氯化銨直至沉淀不在析出為止,，4℃，5000g的離心力下離心20min后獲得白色沉淀,。沉淀物加入一定濃度的醋酸溶液中溶解,。3、將溶解后的鼠尾膠原蛋白溶液繼續(xù)反復(fù)進(jìn)行鹽析處理,，重復(fù)步驟2的過(guò)程2~4次,。_x005f_x000c_鼠尾膠原蛋白經(jīng)SDS-PAGE蛋白質(zhì)電泳。論鼠...

鼠尾膠原蛋白Ⅰ型使用方法及注意事項(xiàng)：將培養(yǎng)器皿在室溫(25度左右)下放置20分鐘待膠凝固后,，轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)箱內(nèi),。如果配制中使用的是10PBS，使用前需要加入適當(dāng)體積的細(xì)胞培養(yǎng)液預(yù)平衡,。B．含細(xì)胞的三維膠原的制備（以配制200ul鼠尾膠原蛋白(5mg/ml)加到（如果反過(guò)來(lái)把12ul0.1mol/LNaOH加到膠原溶液中，會(huì)由于NaOH不能迅速混勻而產(chǎn)生局部的膠原凝結(jié)）,，立即混勻,。再加入23ul10PBS10培養(yǎng)液，混勻(混勻后pH左右,，如果PBS或培養(yǎng)液中沒(méi)有加酚紅,，初次使用時(shí)需要用pH試紙測(cè)試)。加入760ul的細(xì)胞懸浮液,，混勻后立即加到培養(yǎng)器皿中,。將培養(yǎng)器皿在室溫下放20分鐘待膠凝固后，加入適...

鼠尾Ⅰ型膠原：選擇適當(dāng)?shù)墓切迯?fù)材料是治好骨缺損的中心環(huán)節(jié),。目前,，臨床上常用的有人工骨移植、自體骨移植和同種異體骨移植,。其中,，人工骨材料多為磷酸三鈣、半水硫酸鈣等含有鈣和磷的無(wú)機(jī)礦物材料[1-2]，由于不含自體骨組織中的有機(jī)大分子Ⅰ型膠原蛋白,，其臨床療效遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于自體骨組織,。但是，自體骨移植和同種異體骨移植均來(lái)源于人類自身骨組織,，數(shù)量有限,，難以滿足臨床需要。因此,，研發(fā)與人類自體骨組織化學(xué)成分和分子結(jié)構(gòu)相近的仿生骨材料,，成為全世界骨組織工程學(xué)者孜孜以求的目標(biāo)。由于天然骨組織是Ⅰ型膠原蛋白和羥基磷灰石鈣生物礦化的產(chǎn)物,，在分子結(jié)構(gòu)上,，羥基磷灰石鈣晶體是以Ⅰ型膠原纖維為模板，呈片狀鑲嵌在膠原纖維分子間隙,，...

鼠尾Ⅰ型膠原：材料與方法：1.主要材料,、試劑和儀器鼠尾、鹽酸,、等滲氯化鈉溶液,、鈣液、磷液均購(gòu)自上海晶純生化科技股份有限公司,。日立高新TEMHT770(日本日立公司),；多功能粉末X射線衍射儀。2.酸解提取鼠尾Ⅰ型膠原蛋白取大鼠尾巴洗凈,，用75%的乙醇浸泡5min,。將尾巴剪開(kāi)，去掉皮毛,，并剪成小段,，抽出銀色的肌腱。將肌鍵剪斷置于平皿中,，用無(wú)菌等滲氯化鈉溶液浸泡,。吸去等滲氯化鈉溶液，將肌鍵置于平皿中剪碎,，按每克肌鍵50mL的比例加入0.1%的醋酸溶液,。搖晃，將肌鍵分散于醋酸溶液中,，4℃放置一周,，然后以2186×g離心20min。在醋酸溶液的酸解下,，肌腱水解成膠凍狀凝膠,，置于冰箱4℃保存,。論鼠尾膠原能...

膠原蛋白的提取方法：酸法提取：酸法提取主要采用低離子濃度酸性條件浸漬處理原料,，從而破壞分子間的鹽鍵和希夫堿,，而引起纖維膨脹、溶解,。作為溶劑使用的酸,，主要有鹽酸或亞硫酸、磷酸,、硫酸,、醋酸、檸檬酸和甲酸等,。酸法是提取膠原蛋白比較常用和有效的方法,，用酸法提取的膠原較大程度地保持了其三股螺旋結(jié)構(gòu)。此法處理快速,，所得產(chǎn)品的分子量是連續(xù)的,，適用于醫(yī)用生物材料及原料的制備，但產(chǎn)品得率低,，設(shè)備腐蝕嚴(yán)重,，污染重。趙蒼碧等[2]采用0.3%的醋酸溶液在4℃下從牛腱中提取膠原蛋白,，得到高純度的膠原蛋白溶液,。通常情況下骨質(zhì)總量中的鈣、鎂,、磷等無(wú)機(jī)物質(zhì)光占總量的百分之幾而膠原蛋白等有機(jī)物質(zhì)卻要占超過(guò)80%,。青島鼠尾膠原...

鼠尾Ⅰ型膠原：材料與方法：1.主要材料、試劑和儀器鼠尾,、鹽酸,、等滲氯化鈉溶液、鈣液,、磷液均購(gòu)自上海晶純生化科技股份有限公司。日立高新TEMHT770(日本日立公司),；多功能粉末X射線衍射儀,。2.酸解提取鼠尾Ⅰ型膠原蛋白取大鼠尾巴洗凈，用75%的乙醇浸泡5min,。將尾巴剪開(kāi),，去掉皮毛，并剪成小段,，抽出銀色的肌腱,。將肌鍵剪斷置于平皿中,，用無(wú)菌等滲氯化鈉溶液浸泡。吸去等滲氯化鈉溶液,，將肌鍵置于平皿中剪碎,，按每克肌鍵50mL的比例加入0.1%的醋酸溶液。搖晃,，將肌鍵分散于醋酸溶液中,，4℃放置一周，然后以2186×g離心20min,。在醋酸溶液的酸解下,，肌腱水解成膠凍狀凝膠，置于冰箱4℃保存,。論鼠尾膠原能...

含細(xì)胞三維膠原凝膠的制備（以配制1mg/mL三維膠1mL為例）準(zhǔn)備好懸浮于培養(yǎng)液的細(xì)胞,，并放置于冰浴中。將200μL本品加到12μL0.1mol/LNaOH中（如果反過(guò)來(lái)把12μL0.1mol/LNaOH加到膠原溶液中,，會(huì)由于NaOH不能迅速混勻而產(chǎn)生局部的膠原凝結(jié)）,，立即混勻。再加入23μL10×PBS或10×培養(yǎng)液,，混勻后立即加到培養(yǎng)器皿中（混勻后pH為7左右,，如果PBS或培養(yǎng)液中沒(méi)有加酚紅，初次使用時(shí)需要測(cè)定pH值）,。加入760μL的細(xì)胞懸浮液,，混勻后立即加到培養(yǎng)器皿中。將培養(yǎng)器皿在室溫放置20min待膠凝固后,，加入適當(dāng)體積的細(xì)胞培養(yǎng)液,，轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。本品在室溫下pH中性時(shí)可迅速成...

鼠尾Ⅰ型膠原：選擇適當(dāng)?shù)墓切迯?fù)材料是治好骨缺損的中心環(huán)節(jié),。目前,，臨床上常用的有人工骨移植、自體骨移植和同種異體骨移植,。其中,，人工骨材料多為磷酸三鈣、半水硫酸鈣等含有鈣和磷的無(wú)機(jī)礦物材料[1-2],，由于不含自體骨組織中的有機(jī)大分子Ⅰ型膠原蛋白,，其臨床療效遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于自體骨組織。但是,，自體骨移植和同種異體骨移植均來(lái)源于人類自身骨組織,，數(shù)量有限，難以滿足臨床需要,。因此,，研發(fā)與人類自體骨組織化學(xué)成分和分子結(jié)構(gòu)相近的仿生骨材料,，成為全世界骨組織工程學(xué)者孜孜以求的目標(biāo)。由于天然骨組織是Ⅰ型膠原蛋白和羥基磷灰石鈣生物礦化的產(chǎn)物,，在分子結(jié)構(gòu)上,，羥基磷灰石鈣晶體是以Ⅰ型膠原纖維為模板，呈片狀鑲嵌在膠原纖維分子間隙,，...