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酵母總RNA快速提取試劑盒(離心柱型):一、原理簡(jiǎn)介,。改進(jìn)的異硫氰酸胍/酚一步法裂解細(xì)胞和滅活RNA酶,,然后總RNA在高離序鹽狀態(tài)下選擇性吸附于離心柱內(nèi)硅基質(zhì)膜,再通過一系列快速的漂洗-離心的步驟,去蛋白液和漂洗液將細(xì)胞代謝物,、蛋白等雜質(zhì)去除,,較后低鹽的RNasefreewater將純凈RNA從硅基質(zhì)膜上洗脫。二,、試劑盒特點(diǎn):1,、離心吸附柱內(nèi)硅基質(zhì)膜全部采用進(jìn)口世界有名公司特制吸附膜,柱與柱之間吸附量差異極小,,可重復(fù)性好,。克服了國(guó)產(chǎn)試劑盒膜質(zhì)量不穩(wěn)定的弊端,。2,、結(jié)合了異硫氰酸胍/酚一步法試劑穩(wěn)定性好,純度高和離心柱方便快捷的優(yōu)點(diǎn),,不需要異丙醇沉淀和乙醇洗滌過程,,RNA可以直接從離心柱上洗脫避免了過度干燥不易溶解問題。3,、獨(dú)有的RL裂解液配方,,可以有效的消除基因組污染。植物RNA提取試劑產(chǎn)品特點(diǎn):配有CS過濾柱,,可有效去除其它雜質(zhì),。長(zhǎng)沙RNA提取試劑哪家好
RNA提取:預(yù)備工作RNA酶(Rnase)是導(dǎo)致RNA降解較主要的物質(zhì),。此酶非常穩(wěn)定,,在一些極端的條件下只可暫時(shí)失活,但限制因素去除后又迅速恢復(fù)活性,。常規(guī)高溫高壓滅菌方法和蛋白壓制劑不能使所有的Rnase完全失活,。1.它普遍存在于人的皮膚上,,因此制備RNA時(shí)必須戴手套。2.RNase的又一污染源是取液器,。根據(jù)取液器制造商的要求對(duì)取液器進(jìn)行處理,。一般情況下采用以DEPC配制的70%乙醇擦洗取液器的內(nèi)部和外部,可基本達(dá)到要求,。3.塑料制品,、玻璃和金屬物品的處理。長(zhǎng)沙正規(guī)RNA提取試劑廠家推薦植物RNA提取試劑產(chǎn)品特點(diǎn):配有高效的DNaseⅠ,,可有效去除DNA污染,。
眾所周知,RNA提取是一項(xiàng)困難的工作,。常見的挑戰(zhàn)包括RNA降解,、低產(chǎn)率和/或純度以及DNA污染。此外,,不同的樣品類型有自己獨(dú)特的特性,,需要特別注意。例如,,微生物(如革蘭氏陽(yáng)性/陰性細(xì)菌,、菌類、古生菌等)的細(xì)胞壁堅(jiān)硬,,不易被化學(xué)和酶解,。其他樣本類型,如糞便和植物含有壓制劑(如多酚類,、腐殖酸/黃腐酸,、單寧酸等),可與RNA共沉淀,,并可壓制下游分析,,如RT-qPCR。RNA是不穩(wěn)定的,,極易降解,。許多樣品含有高水平的RNase,會(huì)快速降解RNA,。為了使之較小化,,較好在采集時(shí)穩(wěn)定樣本中的RNA。常用的樣品穩(wěn)定方法包括液氮快速冷凍,、干冰乙醇浴或-80°C冷凍室,。然而,這些方法也有缺點(diǎn),如核酸的凍融損傷,,并不是所有的研究人員在采集樣品時(shí)都能立即使用這些方法,。
植物RNA提取:植物組織中,,富含酚類化合物,,或富含多糖,或含有某些尚無法確定的次級(jí)代謝產(chǎn)物,,或RNase的活性較高,。這些物質(zhì)在細(xì)胞裂解后與RNA緊密結(jié)合形成難溶復(fù)合物或者膠狀沉淀,很難將其去除,。所以我們?cè)谔崛≈参锝M織時(shí),要選取針對(duì)植物的試劑盒,,試劑盒里的裂解液能有效解決多酚易氧化,、多糖化合物與核酸分離等難題。1,、植物的果皮,、果肉、種子,、葉片等要在研缽中充分研磨,,研磨過程中液氮要及時(shí)補(bǔ)充,避免樣品融化,,研磨后的樣品應(yīng)迅速加入裂解液中震蕩混勻,,避免RNA降解。2,、像水稻及小麥葉片等富含纖維的樣本,,則應(yīng)適當(dāng)減少提取用量,否則組織研磨及裂解不徹底,,會(huì)使提取的RNA產(chǎn)量較低,。3、含水分較多的植物組織例如石榴果實(shí),、西瓜果實(shí),、桃子果實(shí)等則應(yīng)當(dāng)適當(dāng)提高樣本量(可選100~200mg)。4,、植物組織,,如植物葉片、根莖,、堅(jiān)硬的果實(shí)等材料一般建議使用液氮在研缽中徹底研缽成份,,再繼續(xù)進(jìn)行提取步驟。常規(guī)的組織勻漿機(jī)對(duì)植物組織的勻漿效果可能不佳,一般不建議使用,。拭子RNA提取試劑的選擇,?如果離心柱硅膠膜吸附能力不好,裂解液和洗脫液沒有經(jīng)過很好的優(yōu)化,。
細(xì)胞外RNA(exRNA)已成為研究界的新寵,。近年來,人們?cè)谘獫{或血清樣本中成功檢測(cè)到疾病相關(guān)的exRNA,,使其有望成為非侵入性的生物標(biāo)志物,。然而,從血漿或血清中分離exRNA仍頗具挑戰(zhàn)性,,這一方面是因?yàn)閑xRNA豐度低,,另一方面是因?yàn)檠褐械奈廴疚飼?huì)壓制PCR。商品化的試劑盒能簡(jiǎn)化和加速exRNA提取過程,,已成為循環(huán)exRNA研究不可缺少的工具,。然而,這些試劑盒的提取效率如何,,是否能去除血漿中的污染物,,是否會(huì)偏向特定的RNA,都沒有經(jīng)過評(píng)估,,而這類評(píng)估對(duì)于結(jié)果解釋和實(shí)驗(yàn)之間的比較都很關(guān)鍵,。植物RNA提取試劑產(chǎn)品特點(diǎn):針對(duì)植物材料獨(dú)特配置,操作更簡(jiǎn)單,、流程更優(yōu)化,。成都RNA提取試劑報(bào)價(jià)
RNA提取試劑注意事項(xiàng):必須戴一次性手套操作。長(zhǎng)沙RNA提取試劑哪家好
總RNA快速提取試劑盒背景資料;EpiQuik?總RNA分離快速試劑盒為從哺乳動(dòng)物細(xì)胞和組織中分離總RNA提供了一種快速,、簡(jiǎn)單和經(jīng)濟(jì)有效的方法,。洗滌劑用于溶解細(xì)胞和滅活核糖核酸酶。特殊的高鹽緩沖系統(tǒng)允許蛋白質(zhì)/DNA被去除,,RNA結(jié)合到自旋柱的玻璃纖維基質(zhì)上,,同時(shí)污染物通過柱。雜質(zhì)被有效地沖洗掉,,純凈的RNA被洗脫,。該試劑盒純化的RNA適用于多種常規(guī)應(yīng)用,包括RT-PCR,、cDNA合成,、northernblotting、差異顯示,、引物延伸和mRNA選擇,??俁NA快速提取試劑盒描述:本試劑盒包含了直接從培養(yǎng)細(xì)胞或組織中成功分離RNA所需的所有試劑。經(jīng)過裂解,、結(jié)合和洗滌后,,使用特殊設(shè)計(jì)的柱可以很容易地回收高達(dá)10個(gè)氧化格的RNA。然后,,總RNA準(zhǔn)備用于各種下游應(yīng)用,。長(zhǎng)沙RNA提取試劑哪家好