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糖原染色法:染色原理細(xì)胞胞漿中存在糖原或多糖類物質(zhì)(如糖蛋白、粘多糖、糖脂,、粘蛋白等),過(guò)碘酸能使細(xì)胞內(nèi)的多糖乙二醇基氧化為二醛基,其與Schiff試劑中的無(wú)色品紅結(jié)合后呈現(xiàn)紫紅色,,沉積在細(xì)胞內(nèi)多糖所在之處,。染色步驟:1.組織石蠟包埋切片后脫蠟至水,,蒸餾水洗2min(細(xì)胞爬片4%多聚甲醛固定后水洗),;2.滴加過(guò)碘酸溶液,氧化5min,;3.蒸餾水洗10min;4.滴加Schiff試劑,,侵染10-20min,;5.傾去Schiff試劑,,流水沖洗10min,;6.滴加蘇木素染色液,,染核1-2min,;7.流水沖洗5min,;8.酸性乙醇分化液分化,。在滴加染液時(shí),,務(wù)必使染液完全覆蓋組織,,但不能溢出圈外,,避免浪費(fèi)試劑。江西口碑好的糖原染色試劑盒哪家便宜
糖原染色試劑盒,。含乙二醇基的多糖經(jīng)過(guò)碘酸氧化,產(chǎn)生醛基,,與雪夫(Schiff)試劑中無(wú)色品紅結(jié)合,形成紫紅色沉淀物定位于含糖原的胞漿中,。該反應(yīng)稱為碘酸-雪夫(PAS)反應(yīng)。(1)雪夫液配制:堿性品紅1g溶于200ml沸水中,,冷卻60℃時(shí)過(guò)濾,,加1mmol/L鹽酸20ml,,再冷卻至25℃左右,,加偏重亞硫酸鈉(Na2S2O5)2g,混合后放棕色瓶中,,置暗處24h,,無(wú)色即可放冰箱中保存,呈微紅色,,則加活性炭1~2g,,吸附過(guò)濾使成無(wú)色液體,,放冰箱中保存。若溶液變紅,,即不能再用。(2)10g/L過(guò)碘酸水溶液:過(guò)碘酸(HIO4·2H2O)1g,加蒸餾水至10ml,。溶解后蓋緊放冰箱備用,一般可用3個(gè)月,,變黃則失效。安徽哪家生產(chǎn)糖原染色試劑盒產(chǎn)品介紹多糖主要指糖原,,它是一種膠樣液態(tài)存在于肝細(xì)胞,、骨骼肌,、心肌等處。
糖原及粘液染色法注意事項(xiàng):1,、糖原的固定要及時(shí),,而且標(biāo)本要新鮮,。2、如用無(wú)水酒精作糖原的固定劑,,有它的弊病,,因無(wú)水酒精滲透較慢,,而且容易產(chǎn)生極化,(極化是糖原顆粒趨向于細(xì)胞的一端),。故用Gendre氏固定液效果較佳,,其配法如下:苦味酸飽和于95%酒精85ml40%甲醛10ml冰醋酸5ml3,、各種試劑必須化學(xué)純,亞硫酸鈉須有濃厚氣味,,器皿必須潔凈而干燥,染色缸亦是,。4,、如果Schiff氏試劑,在經(jīng)過(guò)活性碳吸附漂白后不顯無(wú)色,,首先應(yīng)考慮試劑中的偏重亞硫酸鈉是否失效,。如果偏重亞硫酸鈉氣味不濃,,使用時(shí)可考慮適當(dāng)?shù)脑黾佑昧?。其次考慮堿性品紅本身,,常常雖屬同一生產(chǎn)廠家,,但不同批號(hào),,其效果就可能不同,,應(yīng)特別引起注意
網(wǎng)狀纖維的變化,反映了疾病的發(fā)生和發(fā)展的不同過(guò)程,,對(duì)疾病的診斷有極大意義,。網(wǎng)狀纖維的多少、粗細(xì)緊密,、疏松或斷裂,都是病理檢驗(yàn)的重要指標(biāo),,尤其是在臨床病理診斷中,可根據(jù)其存在和分布來(lái)鑒別與肉瘤,。而在HE染色標(biāo)本上,,網(wǎng)狀纖維不易顯色。所以網(wǎng)狀纖維的組織化學(xué)染色,,在臨床病理診斷上占著相當(dāng)重要的位置,。網(wǎng)狀纖維染色:網(wǎng)狀纖維是非常細(xì)而短的纖維,,大量堆積時(shí)則形成致密的網(wǎng)狀,故有網(wǎng)狀纖維之稱,。疏松組織中網(wǎng)狀纖維比較少,,它多分布在結(jié)締組織與其它組織交界處,如在上皮組織與結(jié)締組織交界處的基膜內(nèi),,血管周圍以及造血部位,內(nèi)分泌腺的腺細(xì)胞團(tuán)索和外分泌腺的腺末房周圍等處均有豐富的網(wǎng)狀纖維,。主要用來(lái)顯示糖原和其他多糖物質(zhì),,因此也稱作糖原染色。
特染的應(yīng)用價(jià)值:現(xiàn)代病理學(xué)中免疫組織化學(xué)技術(shù),、電子顯微鏡技術(shù)以及其它細(xì)胞及分子生物學(xué)技術(shù)應(yīng)用日益普遍,但由于這些技術(shù)要求一定的實(shí)驗(yàn)條件以及所需的試劑價(jià)格較為昂貴,,對(duì)于一部分病人以及某一些基層醫(yī)院是比較難以接受的,。而組織化學(xué)技術(shù)則具有無(wú)需復(fù)雜的實(shí)驗(yàn)條件以及較為昂貴的試劑操作又比較簡(jiǎn)單的優(yōu)勢(shì),,在臨床病理學(xué)診斷中具有重要的應(yīng)用價(jià)值。比如,,當(dāng)細(xì)胞中出現(xiàn)色素,,是黑色素還是含鐵血黃素以及當(dāng)組織中出現(xiàn)均一化學(xué)物質(zhì)是否為淀粉樣變性等,,用組織化學(xué)技術(shù)區(qū)別起來(lái)很簡(jiǎn)單,,所以組織化學(xué)技術(shù),雖然已有幾十年到幾百年的歷史,,仍是一個(gè)很有實(shí)用價(jià)值的技術(shù)~在染色過(guò)程中較好不要在玻片上貼標(biāo)簽紙,。安徽口碑好的糖原染色試劑盒推薦廠家
為了您的安全和健康,,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作,。江西口碑好的糖原染色試劑盒哪家便宜
PAS染色試劑配制及染色方法:1.材料與方1.1 實(shí)驗(yàn)材料新鮮小白鼠肝臟,、腎臟標(biāo)本各30例,,均來(lái)自我室實(shí)驗(yàn)材料,。1.2 主要試劑1.2.1 AAF固定液又稱酒精醋酸福爾馬林混合固定液,其配方:無(wú)水乙醇80mL,,冰醋酸5mL,、甲醛10mL。1.2.2 Carnoy固定液 氯仿300mL,,冰醋酸100mL,,95%酒精600mL。1.2.3 過(guò)碘酸溶液 0.5g過(guò)碘酸(HIO)溶于100mL蒸餾水或者70%酒精溶液中,,或者按如下配方配制:過(guò)碘酸0.8g,,95%乙醇70mL,醋酸鈉0.27g,,水20mL,。待溶解后置于4℃冰箱避光保存。1.2.4 無(wú)色品紅液(Schiff氏液) 在三角燒內(nèi)加入蒸餾水500mL,,煮沸后,,在保持微沸的情況下,加入堿性品紅2.5g,,并不斷搖動(dòng)約5min(勿使之沸騰),,使堿性品紅徹底溶解(溶解液為深紅色)。冷卻到50℃時(shí),,過(guò)濾,,加入1N鹽酸50mL,再待冷卻至25℃時(shí)加入偏重亞硫酸鈉2.5g,,塞住瓶口,,搖動(dòng)容器以充分混合(此時(shí)顏色明顯變淡),然后避光放置或冰箱內(nèi)24h江西口碑好的糖原染色試劑盒哪家便宜