一種生物醫(yī)用鼠尾膠原蛋白的提取方法,，采用酸法與酶法相結(jié)合的工藝,，保持恒低溫?zé)o菌的環(huán)境，利用同樣濃度的鹽溶液進行兩次鹽析與離心,，簡化了提純步驟,。所用酸為低濃度酸溶液，并采用檸檬酸替代醋酸進行提純,。從提取原料到樣品生成過程中,，進行多次真空冷凍干燥，并經(jīng)進一步處理獲得含水率在3％以下的膠原蛋白微粉,；較后由滅菌,、無菌包裝,，成品膠原蛋白粉末的純度在98％以上。本發(fā)明獲得的膠原蛋白降低了蛋白的免疫原性,，提高了產(chǎn)率和生物相容性,，降低了成本，適用于生物醫(yī)用材料,。鼠尾膠原對前庭毛細胞具有良好的貼壁黏附促進作用,。合肥鼠尾膠原單價

鼠尾膠原蛋白Ⅰ型使用說明：不含細胞的三維膠原的制備（以配制1毫升，1mg/ml三維膠為例）：將200ul鼠尾膠原蛋白I型(5mg/ml)加到置于冰浴的離心管中,，加入690ulH2O,。然后加到12ul0.1mol/LNaOH中（如果反過來把12ul0.1mol/LNaOH加到膠原溶液中，會由于NaOH不能迅速混勻而產(chǎn)生局部的膠原凝結(jié)）,，立即混勻,。再加入100ul10×PBS或10×培養(yǎng)液，混勻后立即加到培養(yǎng)器皿中(混勻后pH為7左右,，如果PBS或培養(yǎng)液中沒有加酚紅，初次使用時需要用pH試紙測試),。將培養(yǎng)器皿在室溫(25度左右)下放置20分鐘待膠凝固后,，轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)箱內(nèi)。如果配制中使用的是10×PBS,，使用前需要加入適當(dāng)體積的細胞培養(yǎng)液預(yù)平衡,。昆明正規(guī)鼠尾膠原直銷廠家使用前需要加入適當(dāng)體積的細胞培養(yǎng)液預(yù)平衡。

三維膠原的制備：鼠尾膠原蛋白I型在濃度1mg/ml以上,，pH7左右時可形成具有一定強度三維膠,建議成膠濃度1-2mg/ml,。膠原蛋白溶解于0.006mol/L乙酸中，在成膠過程中需要加入0.06X體積的0.1mol/LNaOH來中和,。需要的溶液(均需要無菌,、預(yù)冷):10xPBS(可含10mg/L的酚紅用于pH指示)或10x培養(yǎng)液,0.1mol/LNaOH,0.1mol/L乙酸(一般不用),雙蒸水A．不含細胞的三維膠原的制備（以配制1毫升，1mg/ml三維膠為例）：將200ul鼠尾膠原蛋白I型(5mg/ml)加到置于冰浴的離心管中,，加入690ulH2O,。然后加到12ul0.1mol/LNaOH中（如果反過來把12ul0.1mol/LNaOH加到膠原溶液中，會由于NaOH不能迅速混勻而產(chǎn)生局部的膠原凝結(jié)）,，立即混勻,。

酸解提取鼠尾Ⅰ型膠原及相對分子質(zhì)量和濃度檢測鼠尾肌腱在醋酸溶液的酸解作用下，其腱性組織被水解成膠凍狀溶液,，從而分解成鼠尾Ⅰ型膠原蛋白分子,。抽取鼠尾Ⅰ型膠原150μL滴在薄膜上，可形成液滴狀膠原蛋白凝膠(,，其生物力學(xué)強度極差,，一碰即散,。將鼠尾膠原蛋白進行SDS-PAGE，結(jié)果顯示：Ⅰ型膠原蛋白原液在相對分子質(zhì)量130000附近有明顯條帶,，另一條帶的相對分子質(zhì)量大于170000(圖2),。膠原蛋白濃度為1.8mg/mL。吸取礦化液倒入小培養(yǎng)皿中,，將鼠尾Ⅰ型膠原纖維浸泡在礦化液中,。礦化2、6d后,，分別將礦化后的Ⅰ型膠原纖維進行TEM和電子衍射觀察,。堿法提取膠原蛋白常用的處理劑為石灰、氫氧化鈉,、碳酸鈉等,。

鼠尾膠原蛋白I型，用那一種膠原酶可以溶解：1．將膠原加入到0.1M的醋酸中,，制備成濃度為0.1%的溶液,。在室溫中攪拌1-3小時直到完全溶解。2．建議將溶液轉(zhuǎn)移到擰口的玻璃瓶中,，并小心的在瓶底鋪上一層氯仿,。氯仿的量約為膠原溶液的10%。不要晃動或攪拌,。在2-8度中放置過夜,。在無菌條件下轉(zhuǎn)移上層的膠原溶液。我們不建議用過濾的方法無菌化,。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)該方法會導(dǎo)致丟失蛋白,。3．稀釋一定數(shù)量的膠原溶液。4．按照6-10ug/cm2的濃度包被培養(yǎng)瓶,。在室溫或37度結(jié)合數(shù)小時或者2-8度過夜,。5．從包被表面除去多余的液體。過夜干燥,。如果膠原溶液不是無菌的,，這時候可以在無菌細胞操作室中暴光在紫外線下過夜消毒。在接種細胞前用無菌的水漂洗,。將鼠尾膠原加入到0.1M的醋酸中,，制備成濃度為0.1%的溶液。合肥鼠尾膠原服務(wù)電話

制備鼠尾膠原：吸去生理鹽水,，將尾腱稱重（0.5-1克）,。合肥鼠尾膠原單價

鼠尾Ⅰ型膠原：材料與方法：1.主要材料、試劑和儀器鼠尾,、鹽酸,、等滲氯化鈉溶液,、鈣液、磷液均購自上海晶純生化科技股份有限公司,。日立高新TEMHT770(日本日立公司),；多功能粉末X射線衍射儀。2.酸解提取鼠尾Ⅰ型膠原蛋白取大鼠尾巴洗凈,，用75%的乙醇浸泡5min,。將尾巴剪開，去掉皮毛,，并剪成小段,，抽出銀色的肌腱。將肌鍵剪斷置于平皿中,，用無菌等滲氯化鈉溶液浸泡,。吸去等滲氯化鈉溶液，將肌鍵置于平皿中剪碎,，按每克肌鍵50mL的比例加入0.1%的醋酸溶液,。搖晃，將肌鍵分散于醋酸溶液中,，4℃放置一周,，然后以2186×g離心20min。在醋酸溶液的酸解下,，肌腱水解成膠凍狀凝膠,，置于冰箱4℃保存,。論鼠尾膠原能促進毛細胞貼壁,，涂布鼠尾膠原有利于膜片鉗實驗的長時程記錄，并且制作簡便,，成本低廉,。合肥鼠尾膠原單價

蘇州君欣生物科技有限公司是一家有著雄厚實力背景、信譽可靠,、勵精圖治,、展望未來、有夢想有目標(biāo),，有組織有體系的公司,，堅持于帶領(lǐng)員工在未來的道路上大放光明，攜手共畫藍圖,，在江蘇省等地區(qū)的精細化學(xué)品行業(yè)中積累了大批忠誠的客戶粉絲源,，也收獲了良好的用戶口碑，為公司的發(fā)展奠定的良好的行業(yè)基礎(chǔ),，也希望未來公司能成為*****,，努力為行業(yè)領(lǐng)域的發(fā)展奉獻出自己的一份力量,，我們相信精益求精的工作態(tài)度和不斷的完善創(chuàng)新理念以及自強不息，斗志昂揚的的企業(yè)精神將**蘇州君欣生物科技供應(yīng)和您一起攜手步入輝煌,，共創(chuàng)佳績,，一直以來，公司貫徹執(zhí)行科學(xué)管理,、創(chuàng)新發(fā)展,、誠實守信的方針，員工精誠努力,，協(xié)同奮取,，以品質(zhì)、服務(wù)來贏得市場,，我們一直在路上,！