糖原pas染色液配制及使用方法:1,、常規(guī)固定,,常采用10%的福爾馬林,常規(guī)脫水包埋,。2,、石蠟切片脫蠟入蒸餾水;冰凍切片直接入蒸餾水,。3,、自來(lái)水沖洗2~3min,再用蒸餾水浸洗2次,。4,、入過(guò)碘酸溶液,室溫放置,,一般不宜超過(guò)10min,。5、自來(lái)水沖洗1次,,再用蒸餾水浸洗2次,。6、入SchiffReagent,,置于室溫陰暗處浸染,。7、自來(lái)水沖洗10min,。8,、入蘇木素染色液,染細(xì)胞核,。9,、酸性乙醇分化液分化。_x005f_x000c_10,、自來(lái)水沖洗10~15min,,更換蒸餾水清洗,使其返藍(lán),。11,、逐級(jí)常規(guī)乙醇脫水。二甲苯透明,,中性樹(shù)膠封固,。生物膜與細(xì)胞器的研究,。江蘇如何使用糖原染色試劑盒廠家直銷(xiāo)
PAS染色試劑配制及染色方法:1.材料與方1.1實(shí)驗(yàn)材料新鮮小白鼠肝臟、腎臟標(biāo)本各30例,,均來(lái)自我室實(shí)驗(yàn)材料,。1.2主要試劑1.2.1AAF固定液又稱酒精醋酸福爾馬林混合固定液,其配方:無(wú)水乙醇80mL,,冰醋酸5mL,、甲醛10mL。1.2.2Carnoy固定液氯仿300mL,,冰醋酸100mL,,95%酒精600mL。1.2.3過(guò)碘酸溶液0.5g過(guò)碘酸(HIO)溶于100mL蒸餾水或者70%酒精溶液中,,或者按如下配方配制:過(guò)碘酸0.8g,,95%乙醇70mL,醋酸鈉0.27g,,水20mL,。待溶解后置于4℃冰箱避光保存,。1.2.4無(wú)色品紅液(Schiff氏液)在三角燒內(nèi)加入蒸餾水500mL,,煮沸后,在保持微沸的情況下,,加入堿性品紅2.5g,,并不斷搖動(dòng)約5min(勿使之沸騰),使堿性品紅徹底溶解(溶解液為深紅色),。冷卻到50℃時(shí),,過(guò)濾,加入1N鹽酸50mL,,再待冷卻至25℃時(shí)加入偏重亞硫酸鈉2.5g,,塞住瓶口,搖動(dòng)容器以充分混合(此時(shí)顏色明顯變淡),,然后避光放置或冰箱內(nèi)24h,。浙江提供糖原染色試劑盒量大從優(yōu)該依據(jù)切片厚薄、組織的類(lèi)別等決定,。
注意事項(xiàng):染色前:①切出的石蠟切片要好,,不能有皺褶或者刀痕,切片不能太厚,。②撈片時(shí),,較好一張玻片撈一個(gè)組織,組織較好位于玻片的中間,,美觀的同時(shí)也利于脫蠟(有時(shí)二甲苯的液面低于組織片的時(shí)候,,達(dá)不到脫蠟的目的),。③石蠟切片脫蠟到水時(shí),一定要注意組織切片脫蠟務(wù)必要徹底(脫蠟時(shí)間不能太少)以使脫蠟后的組織達(dá)到真正的“干凈”,。否則剩余的未脫干凈的石蠟粘附在組織表面,,在染色時(shí)染色液未能充分與組織接觸,較終導(dǎo)致染色效果不佳,,甚至染不上顏色,。④在染色過(guò)程中較好不要在玻片上貼標(biāo)簽紙,以避免脫蠟時(shí)把標(biāo)簽紙也浸沒(méi),,致使標(biāo)簽紙上的膠黏到玻片上,,造成染色不佳。
醫(yī)院檢驗(yàn)中心糖原染色操作規(guī)程:1.雪夫氏試劑:400m1蒸餾水煮沸除去C02,,逐漸加堿性品紅2.08溶解后,,待冷卻至60℃,加1mm01兒HCl40ml,,再加偏重亞硫酸鈉(NaHSO:)4g,,次日加活性碳1.5g,放置半天后過(guò)濾,。配好后液體為無(wú)色透明,,保存于4℃冰箱中。2.過(guò)碘酸作用液:過(guò)碘酸1g溶于蒸餾水100ml中,,或取過(guò)碘酸鉀(1tI04)0,。698加蒸餾水100ml,微加熱使溶解,,再加濃硝酸0.3m1,,置冰箱中保存。3.固定液:95%乙醇90ml與甲醛10m1混勻,。4.20g/l甲基綠:甲基綠2g溶于100m1蒸餾水,。[操作]_x005f_x000c_(1)新鮮或陳舊血片、骨髓片于固定液內(nèi)10分鐘,。(2)水洗數(shù)次后,,對(duì)照片先用唾液消化30分鐘,也可在同一片,,在其中間用蠟筆劃界,,一半做對(duì)照,另一半做測(cè)定,。(3)水洗后,,滴加過(guò)碘酸數(shù)滴于涂片上,作用10分鐘后,,再水洗數(shù)次,。常需要分別選用相應(yīng)的顯示這些成分的染色方法進(jìn)行特殊染色,。
糖原染色生物技術(shù)優(yōu)勢(shì):(1)擁有針對(duì)不同組織的特殊固定液;(2)擁有日本進(jìn)口的各種染料,,保證切片染色效果,;(3)擁有千錘百煉的專(zhuān)業(yè)人才隊(duì)伍,保證實(shí)驗(yàn)快速,、有效的完成,。實(shí)驗(yàn)樣本要求:(1)植物材料在選擇時(shí)須盡可能不損傷植物體或所需要的部分;(2)動(dòng)物材料取用時(shí)需對(duì)動(dòng)物施以麻醉,,常用的麻醉劑有氯仿和,,或?qū)?dòng)物殺死后迅速取出所需要的組織;(3)取材必須新鮮,,這一點(diǎn)對(duì)于從事細(xì)胞生物學(xué)研究尤為重要,,應(yīng)該盡可能割取生活著的組織塊,并隨即投入固定液,,固定液與組織塊的體積比應(yīng)在10:1,;(4)切取材料時(shí)刀要銳利,避免因擠壓細(xì)胞使其受到損傷,;(5)切取的材料應(yīng)小而薄,,便于固定液迅速滲入內(nèi)部。一般厚度不超過(guò)3mm,,大小不超過(guò)5×5m㎡,??蓪⒁让赶蠹?xì)胞的保存在含2%BSA的PBS中,,防止進(jìn)一步的損傷。上海品質(zhì)好的糖原染色試劑盒
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糖原染色的參考值及臨床意義:1.慢性淋巴細(xì)胞白血病,、淋巴肉瘤等惡性淋巴細(xì)胞增生性疾病,,其淋巴細(xì)胞的PSA染色積分值增高;等淋巴細(xì)胞良性增生時(shí),,淋巴細(xì)胞積分值正常,。醫(yī)|學(xué)教育網(wǎng)搜集整理故該試驗(yàn)可用于鑒別良性與惡性淋巴細(xì)胞增生性疾病。2.紅白血病時(shí)幼紅細(xì)胞的PAS染色呈強(qiáng)陽(yáng)性反應(yīng),,積分值增高,;溶血性貧血及巨幼細(xì)胞性貧血時(shí),幼紅細(xì)胞的PAS染色積分值在正常范圍內(nèi),,故該試驗(yàn)也可用于紅白血病的診斷及鑒別幼紅細(xì)胞增多的性質(zhì),。3.急性粒細(xì)胞白血病時(shí),,原始及幼稚粒細(xì)胞PAS染色常呈陰性反應(yīng);急性淋巴細(xì)胞白血病時(shí),,原始及幼稚淋巴細(xì)胞常呈陽(yáng)性反應(yīng),;急性單核細(xì)胞白血病時(shí),原始及幼稚單核細(xì)胞多呈強(qiáng)陽(yáng)性反應(yīng),。故PAS染色有助于三種急性白血病類(lèi)型的鑒別,。江蘇如何使用糖原染色試劑盒廠家直銷(xiāo)