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長(zhǎng)沙鼠尾膠原單價(jià)

來源: 發(fā)布時(shí)間:2023-01-09

要準(zhǔn)備的器具:組織剪2把,,有齒鑷1把,,無齒鑷1把,200ml燒杯1個(gè),,培養(yǎng)皿1個(gè),,帶蓋廣口瓶1個(gè),離心管,、小瓶數(shù)個(gè),,滴管若干。以上物品須經(jīng)嚴(yán)格高壓消毒滅菌,。需配制的液體0.1%醋酸溶液,。經(jīng)44.48N10min高壓蒸汽滅菌(或是過濾除菌)后備用。此外還有用消毒雙蒸水配制75%酒精溶液,。取大鼠尾巴,,洗凈,置75%酒精浸泡消毒后,,手持尾巴,,用止血鉗夾住尾巴較高,,折斷尾骨后拉出尾腱,將尾腱剪碎后置消毒的三角燒瓶中,,稱尾腱的重量,,按每克尾腱50ml的比例加入0.1%醋酸溶液,搖晃,,使尾腱分散于醋酸溶液中,,4℃放置48小時(shí),離心,。吸取其上清,,分裝至小瓶,4℃保存,。上述制備過程均在無菌條件下完成,。吸去生理鹽水,將尾腱稱重(0.5-1克),。長(zhǎng)沙鼠尾膠原單價(jià)

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鼠尾膠原簡(jiǎn)介:鼠尾I型膠原蛋白(Collagenfromrattail,TypeI)系采用Birkedal-Hansen方法在無菌下制備,,純度達(dá)到95%以上,可溶于0.006mol/L乙酸,。本品可用于細(xì)胞培養(yǎng)皿的包被,,特別適合普通細(xì)胞培養(yǎng)器皿不易貼壁細(xì)胞的培養(yǎng);也可用于制備三維膠原凝膠,,使細(xì)胞在模擬的三維環(huán)境中生長(zhǎng),。質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn):1、SDS-PAGE分析純度大于95%,。2、無菌檢驗(yàn)結(jié)果為陰性,。3,、本品2μg/cm2包被細(xì)胞培養(yǎng)皿后培養(yǎng)PC-12細(xì)胞,貼壁及生長(zhǎng)正常,。4,、本品濃度1mg/mL,pH7.0時(shí)形成具有一定強(qiáng)度的三維膠原凝膠,,NIH-3T3細(xì)胞在三維凝膠內(nèi)生長(zhǎng)正常,、PC-12細(xì)胞在三維凝膠表面生長(zhǎng)正常。長(zhǎng)沙正規(guī)鼠尾膠原直銷價(jià)將尾腱剪斷置于平皿中,,生理鹽水浸泡,。

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鼠尾膠原使用方法:1、細(xì)胞培養(yǎng)器皿的表面包被以包被濃度為2μg/cm2為例,,用無菌0.006mol/L乙酸將膠原蛋白稀釋到0.012mg/mL,。加到相應(yīng)的培養(yǎng)器皿中,,確保膠原蛋白溶液鋪滿器皿的表面。開蓋在超凈臺(tái)上過夜晾干,,也可以在室溫放置1小時(shí)后,,用PBS洗3~4次后直接使用。包被好的器皿在4~25℃至少可保存三個(gè)月以上的時(shí)間,。三維膠原凝膠的制備:A,、無細(xì)胞三維膠原凝膠的制備(以配制1mg/mL三維膠1mL為例)將200μL本品加到置于冰浴的離心管中,加入690μL雙蒸水,,然后加到12μL0.1mol/LNaOH中(如果反過來把12μL0.1mol/LNaOH加到膠原溶液中,,會(huì)由于NaOH不能迅速混勻而產(chǎn)生局部的膠原凝結(jié)),立即混勻,。再加入100μL10×PBS或10×培養(yǎng)液,,混勻后立即加到培養(yǎng)器皿中(混勻后pH為7左右,如果PBS或培養(yǎng)液中沒有加酚紅,,初次使用時(shí)需要測(cè)定pH值),。將培養(yǎng)器皿在室溫放置20min待膠凝固后,轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)箱內(nèi),。如果配制中使用的是10×PBS,,使用前需要加入適當(dāng)體積的細(xì)胞培養(yǎng)液預(yù)平衡。

膠原蛋白的功效與作用:1,、膠原蛋白中含有大量甘氨酸,,在人體內(nèi)不僅參與合成膠原,而且還是大腦細(xì)胞中是一種克制性遞質(zhì),,以產(chǎn)生對(duì)的安靜作用,,對(duì)焦慮癥、神經(jīng)衰弱等有良好的治好作用膠原蛋白食品,,在胃里可以克制蛋白質(zhì)因胃酸作用引起的凝聚作用,,從而有利于食物的消化,還有克制胃酸和胃原酶分泌的作用,,可減輕胃潰瘍患者疼痛,,促進(jìn)胃潰瘍愈合。2,、膠原蛋白是身體免疫作用中負(fù)責(zé)重要功能的阿米巴細(xì)胞清掃異物的感知器,,因此對(duì)預(yù)防疾病很有幫助??商岣呙庖邫C(jī)能,、克制細(xì)胞、活化細(xì)胞機(jī)能、活化筋骨,、治好關(guān)節(jié)炎及酸痛,。將鼠尾膠原加入到0.1M的醋酸中,制備成濃度為0.1%的溶液,。

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膠原蛋白的提取方法:酶法提?。好阜ㄌ崛∈抢玫鞍酌甘鼓z原溶解,水解條件溫和,,反應(yīng)速率快,,提取的膠原蛋白仍有完整的三股螺旋結(jié)構(gòu),蛋白純度高,,理化性質(zhì)穩(wěn)定,,且無環(huán)境污染。酶法提取常用的蛋白酶有:胃蛋白酶,、胰蛋白酶或者復(fù)合酶,。工藝可選擇一步法,即利用酶液直接提??;二步法,即先用酸或者堿進(jìn)行初步提取,,然后再用酶提取,。Langmaier等[6]用MgO預(yù)處理革屑,然后用堿性蛋白酶提取膠原的水解產(chǎn)物,。CabezaL.F.T等[7]先用胃蛋白酶,,再用堿性蛋白酶提取了2種不同的膠原水解產(chǎn)物。趙蒼碧等[2]采用胃蛋白酶和無花果蛋白酶消化法從牛腱中提取膠原蛋白,,探討了酶和酶的加入量對(duì)提取結(jié)果的影響,,給出了酶對(duì)膠原提取較佳工藝配比,酶與牛腱的質(zhì)量比為0.1時(shí)效果較佳,,而使用無花果蛋白酶時(shí),,0.01的配比較佳??芍苯踊蜷g接參與細(xì)胞的附著。杭州鼠尾膠原價(jià)格

鼠尾膠原,,是一種天然培養(yǎng)基,,它具有促進(jìn)體外培養(yǎng)細(xì)胞(特別是上皮細(xì)胞)貼壁的作用。長(zhǎng)沙鼠尾膠原單價(jià)

鼠尾膠原蛋白Ⅰ型使用方法及注意事項(xiàng):三維膠原的制備鼠尾膠原蛋白型在濃度1mg/ml以上,,pH左右時(shí)可形成具有一定強(qiáng)度三維膠,建議成膠濃度1-2mg/ml,。膠原蛋白溶解于0.006mol/L乙酸中,在成膠過程中需要加入0.06體積的0.1mol/LNaOH來中和。需要的溶液(均需要無菌,、預(yù)冷)10mg/L酚紅用于pH指示)0.1mol/LNaOH,,0.1mol/L乙酸(一般不用),雙蒸水200ul鼠尾膠原蛋白型(5mg/ml)加到置于冰浴的離心管中,,加入690ulH2O12ul0.1mol/LNaOH12ul0.1mol/LNaOH加到膠原溶液中,,會(huì)由于NaOH不能迅速混勻而產(chǎn)生局部的膠原凝結(jié))立即混勻。再加入100ul10PBS10培養(yǎng)液,,混勻后立即加到培養(yǎng)器皿中(混勻后pH左右,,如果PBS或培養(yǎng)液中沒有加酚紅,初次使用時(shí)需要用pH試紙測(cè)試),。論鼠尾膠原能促進(jìn)毛細(xì)胞貼壁,,涂布鼠尾膠原有利于膜片鉗實(shí)驗(yàn)的長(zhǎng)時(shí)程記錄,并且制作簡(jiǎn)便,,成本低廉,。長(zhǎng)沙鼠尾膠原單價(jià)