鼠尾膠原醋酸溶解:1.將鼠尾膠原加入到0.1M的醋酸中,制備成濃度為0.1%的溶液,。在室溫中攪拌1-3小時(shí)直到完全溶解,。2.建議將溶液轉(zhuǎn)移到擰口的玻璃瓶中,并小心的在瓶底鋪上一層氯仿,。氯仿的量約為膠原溶液的10%,。不要晃動(dòng)或攪拌。在2-8度中放置過(guò)夜,。在無(wú)菌條件下轉(zhuǎn)移上層的膠原溶液。我們不建議用過(guò)濾的方法無(wú)菌化,。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)該方法會(huì)導(dǎo)致丟失蛋白,。3.稀釋一定數(shù)量的膠原溶液。4.按照6-10ug/cm2的濃度包被培養(yǎng)瓶,。在室溫或37度結(jié)合數(shù)小時(shí)或者2-8度過(guò)夜,。在操作過(guò)程中要盡量保持低溫。保存條件4℃保存,,切勿凍存,,有效期一年,。天津鼠尾膠原廠家推薦
鼠尾膠原實(shí)驗(yàn)應(yīng)用:鼠尾膠原在原代培養(yǎng)耳蝸血管紋邊緣細(xì)胞中的應(yīng)用。目的:建立利用自制的鼠尾膠原培養(yǎng)大鼠耳蝸邊緣細(xì)胞的方法,。方法:制作鼠尾膠原,并觀察利用自制的鼠尾膠原所培養(yǎng)出大鼠耳蝸邊緣細(xì)胞的效果,。結(jié)果:自制的鼠尾膠原能正常地培養(yǎng)出大鼠耳蝸邊緣細(xì)胞,細(xì)胞角蛋白18表達(dá)陽(yáng)性,,免疫組織化學(xué)結(jié)果和掃描電鏡證實(shí)所培養(yǎng)的細(xì)胞具有典型的分泌上皮細(xì)胞特征,。結(jié)論:成功建立了利用自制鼠尾膠原培養(yǎng)大鼠耳蝸邊緣細(xì)胞的方法,并且制作簡(jiǎn)便,成本低廉,。太原鼠尾膠原進(jìn)貨價(jià)可用于制備三維膠原凝膠,,使細(xì)胞在模擬的三維環(huán)境中生長(zhǎng)。
鼠尾Ⅰ型膠原:組裝液的配置:1.50mmol/L甘氨酸+200mmol/L氯化鉀100mL,,用1mol/L氫氧化鈉調(diào)節(jié)酸堿度至9.2,。2.膠原纖維的重構(gòu)吸取膠原10μL至小培養(yǎng)皿中,倒入0.5mL自組裝液,,室溫放置20min,。予自組裝液自組裝24h。吸取0.05%戊二醛2mL至小培養(yǎng)皿中,,將自組裝24h的膠原浸泡在戊二醛中,。然后將膠原經(jīng)去離子水、50%乙醇,、100%乙醇依次漂洗后進(jìn)行TEM觀察,。3.生物礦化形成仿生骨材料靜滴配置鈣磷礦化液將25mL鈣液(10mmol/L二水氯化鈣+150mmol/L氯化鈉+50mmol/L三羥甲基氨基甲烷+0.02%三氮化鈉)倒入燒杯中,滴入聚丙烯(PAA)至濃度350μg/mL,;滴加1mol/L的氯化氫,,調(diào)節(jié)酸堿度至7.4,然后緩慢滴入25mL磷液(6mmol/L磷酸氫二鈉),,約16滴/min,。論鼠尾膠原能促進(jìn)毛細(xì)胞貼壁,涂布鼠尾膠原有利于膜片鉗實(shí)驗(yàn)的長(zhǎng)時(shí)程記錄,,并且制作簡(jiǎn)便,,成本低廉。
鼠尾膠原蛋白I型,,用那一種膠原酶可以溶解:1.將膠原加入到0.1M的醋酸中,,制備成濃度為0.1%的溶液。在室溫中攪拌1-3小時(shí)直到完全溶解,。2.建議將溶液轉(zhuǎn)移到擰口的玻璃瓶中,,并小心的在瓶底鋪上一層氯仿。氯仿的量約為膠原溶液的10%。不要晃動(dòng)或攪拌,。在2-8度中放置過(guò)夜,。在無(wú)菌條件下轉(zhuǎn)移上層的膠原溶液。我們不建議用過(guò)濾的方法無(wú)菌化,。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)該方法會(huì)導(dǎo)致丟失蛋白,。3.稀釋一定數(shù)量的膠原溶液。4.按照6-10ug/cm2的濃度包被培養(yǎng)瓶,。在室溫或37度結(jié)合數(shù)小時(shí)或者2-8度過(guò)夜,。5.從包被表面除去多余的液體。過(guò)夜干燥,。如果膠原溶液不是無(wú)菌的,,這時(shí)候可以在無(wú)菌細(xì)胞操作室中暴光在紫外線下過(guò)夜消毒。在接種細(xì)胞前用無(wú)菌的水漂洗,。論鼠尾膠原能促進(jìn)毛細(xì)胞貼壁,,涂布鼠尾膠原有利于膜片鉗實(shí)驗(yàn)的長(zhǎng)時(shí)程記錄,并且制作簡(jiǎn)便,,成本低廉,。利用鼠尾Ⅰ型膠原構(gòu)建與人類自體骨組織化學(xué)成分和分子結(jié)構(gòu)相近的仿生骨材料。
膠原蛋白的功效與作用:1,、膠原蛋白中含有大量甘氨酸,,在人體內(nèi)不僅參與合成膠原,而且還是大腦細(xì)胞中是一種克制性遞質(zhì),,以產(chǎn)生對(duì)的安靜作用,,對(duì)焦慮癥、神經(jīng)衰弱等有良好的治好作用膠原蛋白食品,,在胃里可以克制蛋白質(zhì)因胃酸作用引起的凝聚作用,,從而有利于食物的消化,還有克制胃酸和胃原酶分泌的作用,,可減輕胃潰瘍患者疼痛,,促進(jìn)胃潰瘍愈合。2,、膠原蛋白是身體免疫作用中負(fù)責(zé)重要功能的阿米巴細(xì)胞清掃異物的感知器,,因此對(duì)預(yù)防疾病很有幫助??商岣呙庖邫C(jī)能,、克制細(xì)胞、活化細(xì)胞機(jī)能,、活化筋骨、治好關(guān)節(jié)炎及酸痛。建議將溶液轉(zhuǎn)移到擰口的玻璃瓶中,,并小心的在瓶底鋪上一層氯仿,。蕪湖正規(guī)鼠尾膠原廠家現(xiàn)貨
鼠尾膠原蛋白的用途很普遍,可用于化妝品,,工業(yè)和食品生產(chǎn)等領(lǐng)域,。天津鼠尾膠原廠家推薦
鼠尾膠原蛋白I型在濃度1mg/ml以上,pH7左右時(shí)可形成具有一定強(qiáng)度三維膠,建議成膠濃度1-2mg/ml,。膠原蛋白溶解于0.006mol/L乙酸中,,在成膠過(guò)程中需要加入0.06X體積的0.1mol/LNaOH來(lái)中和。需要的溶液(均需要無(wú)菌,、預(yù)冷):10xPBS(可含10mg/L的酚紅用于pH指示)或10x培養(yǎng)液,0.1mol/LNaOH,0.1mol/L乙酸(一般不用),雙蒸水不含細(xì)胞的三維膠原的制備(以配制1毫升,,1mg/ml三維膠為例):將200ul生友鼠尾膠原蛋白I型(5mg/ml)加到置于冰浴的離心管中,加入690ulH2O,。然后加到12ul0.1mol/LNaOH中(如果反過(guò)來(lái)把12ul0.1mol/LNaOH加到膠原溶液中,,會(huì)由于NaOH不能迅速混勻而產(chǎn)生局部的膠原凝結(jié)),立即混勻,。再加入100ul10xPBS或10x培養(yǎng)液,,混勻后立即加到培養(yǎng)器皿中(混勻后pH為7左右,如果PBS或培養(yǎng)液中沒(méi)有加酚紅,,初次使用時(shí)需要用pH試紙測(cè)試),。天津鼠尾膠原廠家推薦