鼠尾膠原的生物礦化和TEM觀察：果凍樣Ⅰ型膠原蛋白膠體初始浸泡在礦化液中時(shí)呈微白色,；礦化2d后,，膠體的顏色逐漸加深至乳白色,；礦化6d后，隨著羥基磷灰石晶體礦化長入膠原纖維內(nèi)部,，膠體顏色加深至純白色,，并在膠體表面沉積了一層薄薄的羥基磷灰石鈣晶體，予鑷子夾起,，其表層羥基磷灰石鈣晶體破碎散落。TEM表征顯示：礦化2d后,，Ⅰ型膠原纖維的明暗相隔周期性條紋結(jié)構(gòu)逐漸模糊,，羥基磷灰石鈣前體滲入膠原纖維內(nèi)部，膠原纖維部分礦化,，沿著膠原纖維生長,，忖度變深；礦化6d后,，Ⅰ型膠原纖維的明暗相隔D-Band結(jié)構(gòu)完全消失,，膠原纖維內(nèi)部可以看到黑色羥基磷灰石晶體，嵌入膠原纖維縱向生長,。當(dāng)鼠尾Ⅰ型膠原纖維完全礦化時(shí),，由于整條膠原纖維都被羥基磷灰石鈣晶體占據(jù)，膠原纖維呈現(xiàn)黑色,，選區(qū)衍射斑圖符合羥基磷灰石表征,。前庭毛細(xì)胞貼附于培養(yǎng)皿底壁，易于封接和長時(shí)間（約8h)的觀察和記錄,。唐山鼠尾膠原廠家現(xiàn)貨

鼠尾膠原凝膠體在皮膚細(xì)胞原代培養(yǎng)中的應(yīng)用：在國外的藥理,毒理和皮膚病學(xué)的研究領(lǐng)域中已得到的限翩,否則培養(yǎng)成功率極低.本文采用鼠尾膠原凝膠體作為滋養(yǎng)層,提高了培養(yǎng)細(xì)胞的材料和方法r1]實(shí)驗(yàn)材料:培養(yǎng)液DEIdE(G皿}ao),表皮細(xì)胞生長因子(EGFSigma),小牛血清(上海祟明生物制品廠),氫化可的松,胰島素(Sigm,青,鏈霉素,胰蛋白酶,]~DTA,細(xì)胞培養(yǎng)皿~35mill(00rningrSA).(2)皮膚基底細(xì)胞的分離和細(xì)胞懸液的制備:2～3d的新生大鼠(wisr),以75%酒精消毒背部皮膚,剪下皮膚后.以消化12h.輕刷表皮面,收集細(xì)胞懸液,加入細(xì)胞培養(yǎng)液.用梯度離心收集細(xì)胞,以3xi0/m]濃度接種平皿.(3)鼠尾膠原凝膠體的制備:具體方法參見文獻(xiàn)c13o(4)培養(yǎng)皿的膠原鋪制:i.0ml的酸溶解膠原滴入~35mm培養(yǎng)皿中,鋪滿平皿底部;將平皿暴露于氨氣中30min,然后置空氣中30rain,散盡剩余氨氣,。溫州重慶鼠尾膠原放上小玻片，自然干燥后小玻片就固定于培養(yǎng)瓶之中,。

膠原蛋白是脊椎動(dòng)物和無脊椎動(dòng)物支持結(jié)構(gòu)的主要組成,。在人的身體中這是皮膚、筋,、軟骨,、骨骼及結(jié)締組織的較主要的蛋白質(zhì)。膠原蛋白占人體蛋白質(zhì)總量的三分之一,，不論來源于哪一種動(dòng)物或哪一種組織的膠原都有許多共同特性,。氨基酸組成中約有三分之一為甘氨酸，有脯氨酸和羥脯氨酸,。根據(jù)其遺傳分子結(jié)構(gòu)遺傳基因的差別,，膠原蛋白分為20幾個(gè)亞型。但較為常見的為Ι,、Π,、ΙΙΙ型膠原蛋白，即間質(zhì)膠原蛋白,。其中I型較為豐富且品質(zhì)優(yōu)良,。

鼠尾膠原蛋白Ⅰ型使用方法及注意事項(xiàng)：將培養(yǎng)器皿在室溫(25度左右)下放置20分鐘待膠凝固后,，轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)箱內(nèi)。如果配制中使用的是10PBS,，使用前需要加入適當(dāng)體積的細(xì)胞培養(yǎng)液預(yù)平衡,。B．含細(xì)胞的三維膠原的制備（以配制200ul鼠尾膠原蛋白(5mg/ml)加到（如果反過來把12ul0.1mol/LNaOH加到膠原溶液中，會(huì)由于NaOH不能迅速混勻而產(chǎn)生局部的膠原凝結(jié)）,，立即混勻,。再加入23ul10PBS10培養(yǎng)液，混勻(混勻后pH左右,，如果PBS或培養(yǎng)液中沒有加酚紅,，初次使用時(shí)需要用pH試紙測試)。加入760ul的細(xì)胞懸浮液,，混勻后立即加到培養(yǎng)器皿中,。將培養(yǎng)器皿在室溫下放20分鐘待膠凝固后，加入適當(dāng)體積的細(xì)胞培養(yǎng)液,，轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)箱中培養(yǎng),。注意事項(xiàng)型在室溫下pH中性時(shí)可迅速成膠，在操作過程中要盡量保持低溫,。鼠尾肌腱膠原蛋白I（rattailtendoncollagentypeI）根據(jù)Birkedal-Hansen方法,，經(jīng)過醋酸（HAc）抽提、氯化鈉沉淀,、磷酸氫二鈉沉淀等步驟制備所得,。鼠尾膠原蛋白用于培養(yǎng)容器等實(shí)驗(yàn)室設(shè)備的內(nèi)部涂層。

膠原蛋白的適用征狀：1,、由于工作勞累,，睡眠不足形成的皮膚晦暗無光、發(fā)黃,、皮膚彈性差等皮膚衰老的不良癥狀,。2、由于年齡,、太陽輻射因素引起的皮膚松弛,、下垂、皺紋,、干燥等皮膚衰老現(xiàn)象,。3、由于體內(nèi)異常黑色素分泌旺盛,，大量沉積皮膚表面,，肌膚不能及時(shí)代謝出異常黑色素，形成各種色斑。4,、由于長期戶外活動(dòng)及皮膚保養(yǎng)不當(dāng)使膚質(zhì)受到損傷,，過早出現(xiàn)細(xì)紋,皮膚干燥、脫皮,、,、毛孔粗大等不良癥狀。5,、由于內(nèi)分泌功能紊亂,，皮膚膚質(zhì)差、皮膚發(fā)油,、發(fā)暗，易長青春痘留下的色印,、色素沉著等,。6、由于生活無規(guī)律,吸煙等因素,造成的黑眼圈,眼袋等問題,。7.長期電腦旁工作,，電腦輻射造成脫發(fā)，內(nèi)分泌紊亂問題,。鼠尾膠原蛋白的用途是什么：顧名思義,，鼠尾膠原蛋白是從老鼠尾巴提取出來的物質(zhì)。無錫正規(guī)鼠尾膠原生產(chǎn)廠家

鼠尾膠原蛋白I型在濃度1mg/ml以上,，pH 7左右時(shí)可形成具有一定強(qiáng)度三維膠,。唐山鼠尾膠原廠家現(xiàn)貨

I型鼠尾膠原是借鑒NavneetaRajan,JasonHabermehl法，經(jīng)過乙酸抽提,、離心,、滅菌、透析等步驟制備得到的高純度,、高活性膠原蛋白,，屬于醫(yī)藥級(jí)別產(chǎn)品，可用于包被細(xì)胞培養(yǎng)器皿（單分子層包被）,，適合多種類型細(xì)胞的貼壁如肝臟細(xì)胞,、神經(jīng)節(jié)細(xì)胞、胚胎細(xì)胞,、肌細(xì)胞,、肺細(xì)胞、神經(jīng)鞘細(xì)胞等,。I型膠原蛋白包被細(xì)胞培養(yǎng)板,，規(guī)格為6/24孔板，表面經(jīng)I型膠原蛋白包被，可以很好的降低蛋白質(zhì)的吸附,。使用這種細(xì)胞培養(yǎng)板培養(yǎng)細(xì)胞,，可以獲得良好的細(xì)胞貼壁率，細(xì)胞增殖速度快,，形態(tài)均一,，細(xì)胞培養(yǎng)成功率高。唐山鼠尾膠原廠家現(xiàn)貨

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