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來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2023-09-07

RNA提取:預(yù)備工作(1)塑料制品:盡量使用一次性無(wú)菌塑料制品。已標(biāo)明RNase-free的塑料制品,如沒(méi)有開(kāi)封使用過(guò),通常不必再處理,。處理的步驟如下:O在玻璃燒杯中注入去離子水,加入DEPC使其終濃度為0.05%~0.1%(DEPC-H2O)。(DEPC二乙基焦碳酸酯為活性很強(qiáng)的劇毒物,,須在通風(fēng)櫥中小心使用)O將待處理的塑料制品放入一個(gè)可以高溫滅菌的容器中,注入DEPC-H2O,,使塑料制品的所有部分都浸泡到溶液中,,在通風(fēng)柜中37℃或室溫下處理過(guò)夜。O將DEPC-H2O小心倒入廢液瓶中,,將裝有DEPC-H2O處理過(guò)的塑料制品的容器以鋁箔封口,,高溫高壓蒸汽滅菌至少30分鐘。O滅菌塑料制品烘烤干燥,,置潔凈處備用,。(2)玻璃和金屬物品250℃烘烤3小時(shí)以上。RNA在水溶液中OD值可能在1.5-1.9之間,,但這并不表示RNA不純,,需電泳檢測(cè)。濟(jì)南RNA提取試劑廠家直銷

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細(xì)胞RNA提取的方法:實(shí)驗(yàn)提取步驟:標(biāo)準(zhǔn)Trizol提取步驟為液氮研磨--加入Trizol裂解--加入氯仿抽提--離心--加入氯丙醇沉淀--離心--酒精洗滌--離心,。將細(xì)胞培養(yǎng)皿置于冰上,,加入Trizol裂解5-10分鐘,用泵頭輕輕吹打后吸取液體放入進(jìn)口EP管中,。加入1/5體積的氯仿,,上下混勻液體,4度靜置10-15分鐘,。(氯仿為有機(jī)溶劑,,有效的使有機(jī)相和無(wú)機(jī)相迅速分離。有機(jī)相中主要是酚和蛋白結(jié)合,,從而使得蛋白和RNA脫離,,RNA進(jìn)入水相)。4度離心15分鐘,一定注意選擇低溫離心,。離心后分成三層,,RNA在上清里,從離心機(jī)輕輕拿出EP管,,以免管內(nèi)物質(zhì)震蕩導(dǎo)致下層沉淀激起,。吸取上清的時(shí)候一定要?jiǎng)幼鬏p柔,切忌吸取太多,,一般吸到400-500ul,,避免吸到下層沉淀,將液體置于新的EP管中,。加入等體積異丙醇,,4度靜置10min,然后12000rpm離心10min,。青島正規(guī)RNA提取試劑廠家推薦細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核RNA提取試劑盒特點(diǎn):試劑盒不含苯酚,,可提取所有RNA,。

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RNA提取試劑的選擇:首先,,要確定材料的可用性。盡管現(xiàn)有的RNA提取試劑都用壓制RNase的成分,,但提取的材料仍需謹(jǐn)慎處理,。提取的材料的新鮮度是獲取完整RNA的關(guān)鍵,但是由于種種原因無(wú)法立即從新鮮材料中提取RNA時(shí),,使用Takara公司的樣品保護(hù)劑SampleProtectorforRNA/DNA可以免去使用液氮或超低溫冰箱的不便,,同時(shí)也可以有效解決組織、細(xì)胞樣品的短時(shí)間保存及運(yùn)輸問(wèn)題,。此外,,如果將不同時(shí)期收集的樣品都預(yù)先存放于本試劑中,可以做到立即終止并固定RNA表達(dá)的時(shí)序變化,,減少實(shí)驗(yàn)組間的誤差

植物RNA快速提取試劑盒:1.固體組織破碎設(shè)備,。可用下列裝置之一:1)玻璃勻漿器,。泡酸清潔,,用高壓滅菌蒸餾水洗滌數(shù)次。2)研缽,。適用于液氮凍存組織的研磨,,清洗方法同玻璃勻漿器。3)高速機(jī)械勻漿器(Polytron,,Tekmar或類似產(chǎn)品),,打開(kāi)開(kāi)關(guān),在蒸餾水中清洗分散器頭數(shù)次。2.高壓蒸汽30分鐘消毒一次性吸頭離心管,。RNA沉淀溶解之后,,應(yīng)嚴(yán)格使用高壓消毒的一次性用品。然而PlantRNAtrip能在RNA酶污染環(huán)境下工作,,在裂解步驟可使用未高壓但潔凈的一次性吸頭和離心管,,但光推薦在緊急情況下這樣做。3.普通雙蒸水,,高壓消毒20分鐘,。用于沖洗器皿,配制瓊脂糖凝膠和電泳用緩沖液,。DEPC處理的雙蒸水,。加DEPC到水中至終濃度為0.01%v/v,室溫過(guò)夜,,高壓消毒30分鐘,。用于溶解RNA,配制TE緩沖液和75%乙醇,。4.濕冰,。在冰上進(jìn)行操作有助于減少RNA降解。5.其它用品,。電泳槽,,雙蒸水沖洗。離心機(jī)和加樣器,,無(wú)需處理,。6.戴手套。注意某些實(shí)驗(yàn)如提取質(zhì)粒DNA如使用極大量RNA酶,,為防污染,,須較全仔細(xì)清洗實(shí)驗(yàn)器具和實(shí)驗(yàn)區(qū)域。RNA提取試劑注意事項(xiàng):溶液需用DEPC水配制,。

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功能的區(qū)別:1,、RNA的功能:mRNA是依據(jù)DNA序列轉(zhuǎn)錄而成的蛋白質(zhì)合成模板;tRNA是mRNA上遺傳密碼的識(shí)別者和氨基酸的轉(zhuǎn)運(yùn)者,;rRNA是組成核糖體的部分,,而核糖體是蛋白質(zhì)合成的機(jī)械。細(xì)胞中還有許多種類和功能不一的小型RNA,,可調(diào)節(jié)基因表達(dá),。而其他如I、II型內(nèi)含子,、RNaseP,、HDV,、核糖體RNA等等都有催化生化反應(yīng)過(guò)程的活性,即具有酶的活性,,這類RNA被稱為核酶,。2、DNA的功能:DNA有傳遞遺傳信息的功能,,而蛋白質(zhì)則是由DNA的指令合成的,。鑒定親子關(guān)系用得較多的是DNA分型鑒定。人的血液,、毛發(fā),、唾液、口腔細(xì)胞等都可以用于用親子鑒定,,十分方便,。DNA是人身體內(nèi)細(xì)胞的原子物質(zhì)。每個(gè)原子有46個(gè)染色體,,另外,,男性的精子細(xì)胞和女性的卵子,各有23個(gè)染色體,,當(dāng)精子和卵子結(jié)合的時(shí)候,。這46個(gè)原子染色體就制造一個(gè)生命,因此,,每人從生父處繼承一半的分子物質(zhì),,而另一半則從生母處獲得,。在提取時(shí),,實(shí)驗(yàn)人員需要佩戴口罩和手套等各種防護(hù)裝備,以防實(shí)驗(yàn)室污染,。北京RNA提取試劑廠家現(xiàn)貨

植物RNA提取試劑產(chǎn)品特點(diǎn):操作安全可靠,,無(wú)需酚抽提。濟(jì)南RNA提取試劑廠家直銷

通用多糖多酚植物RNA提取試劑盒:1,、多糖多酚植物RNA提取試劑盒整合了在提取過(guò)程中去除干擾物的技術(shù),,已成功用于葡萄,中草藥等多糖含量高的樣品,,成功用于棉花等多酚含量高的樣品,。另外華越洋還開(kāi)發(fā)了糖類清理劑,PCR壓制物清理劑,,核酸提取優(yōu)化劑,,樣品核酸穩(wěn)定劑,RNA組織樣品保存液等核酸提取輔助產(chǎn)品,。2,、適用材料普遍:尤其適合解決多醣多酚,色素等次級(jí)代謝物豐富的植物樣本難題。昆蟲(chóng)RNA柱式提取試劑盒特點(diǎn):操作簡(jiǎn)單快速,,處理一個(gè)樣品只需要約十分鐘,。RNA純度高,平均OD260/280一般都在2.0左右,,能夠有效去除大多數(shù)昆蟲(chóng)中的多糖污染,。適用于各種昆蟲(chóng)組織,每100mg組織能提取到20~30μg總RNA,。得到的RNA可直接用于RT-PCR,、Northern雜交、cDNA合成等實(shí)驗(yàn),。濟(jì)南RNA提取試劑廠家直銷