染色的一般原則:1.熒光素產(chǎn)品一般為微量試劑,,取用前請(qǐng)離心集液,,以及避光保存和使用。建議您在收到產(chǎn)品之后,,分裝為小份避光保存于-20℃,,即用即取。2.式細(xì)胞儀只可檢測(cè)單細(xì)胞懸液,,如使用組織樣本,,首先必須制備成單細(xì)胞懸液,細(xì)胞數(shù)量不應(yīng)低于1X106/ml,。3.推薦使用懸浮培養(yǎng)細(xì)胞,。如果是貼壁細(xì)胞,需用不含EDTA的胰酶消化,,如消化不當(dāng),,可能引起假陽性,而用細(xì)胞刮子會(huì)造成細(xì)胞粘連成團(tuán),,而影響檢測(cè)??蓪⒁让赶蠹?xì)胞的保存在含2%BSA的PBS中,,防止進(jìn)一步的損傷。過碘酸氧化時(shí)間不宜過久,,氧化時(shí)的溫度以18~22℃佳,。北京哪家生產(chǎn)糖原染色試劑盒生產(chǎn)廠家
糖原染色試劑盒。含乙二醇基的多糖經(jīng)過碘酸氧化,,產(chǎn)生醛基,,與雪夫(Schiff)試劑中無色品紅結(jié)合,形成紫紅色沉淀物定位于含糖原的胞漿中,。該反應(yīng)稱為碘酸-雪夫(PAS)反應(yīng),。(1)雪夫液配制:堿性品紅1g溶于200ml沸水中,,冷卻60℃時(shí)過濾,加1mmol/L鹽酸20ml,,再冷卻至25℃左右,,加偏重亞硫酸鈉(Na2S2O5)2g,混合后放棕色瓶中,,置暗處24h,,無色即可放冰箱中保存,呈微紅色,,則加活性炭1~2g,,吸附過濾使成無色液體,放冰箱中保存,。若溶液變紅,,即不能再用。(2)10g/L過碘酸水溶液:過碘酸(HIO4·2H2O)1g,加蒸餾水至10ml,。糖原染色試劑盒報(bào)價(jià)糖原累積病診斷和研究 ,,糖尿病的診斷和研究 ,用于某些的診斷等,。
糖原染色臨床意義:1,、急性淋巴細(xì)胞白血病、淋巴組織惡性增生性疾病,、紅白血病,、戈謝病的原始細(xì)胞呈強(qiáng)陽性反應(yīng)或陽性反應(yīng);缺鐵性貧血,、珠蛋白生成障礙,、骨髓增生異常綜合征亦可呈陽性反應(yīng);急性粒細(xì)胞白血病,、急性單核細(xì)胞白血病,、良性淋巴細(xì)胞增多癥、尼曼-皮克細(xì)胞呈陰性反應(yīng)或弱陽性反應(yīng),。巨幼細(xì)胞性貧血,、溶血性貧血、再生障礙性貧血等,,幼紅細(xì)胞為陰性反應(yīng),。偶有個(gè)別幼紅細(xì)胞呈陽性反應(yīng)。2,、幫助鑒別不典型巨核細(xì)胞和霍奇金細(xì)胞,,巨核細(xì)胞呈強(qiáng)陽性反應(yīng);霍奇金細(xì)胞呈弱陽性或陰性反應(yīng),。3,、幫助鑒別白血病細(xì)胞和腺骨髓轉(zhuǎn)移的腺細(xì)胞,,腺細(xì)胞呈陽性反應(yīng)。
糖原染色是病理學(xué)中常規(guī)的染色方法之一,,McManus在1946年較先使用高碘酸-雪夫技術(shù)顯示黏蛋白,,該法常用來顯示糖原和其他多糖,該染色試劑盒不僅能夠顯示糖原,,還能顯示中性黏液性物質(zhì)和某些酸性物質(zhì)以及軟骨,、垂體、霉菌,、色素,、淀粉樣物質(zhì)、基底膜等,。過碘酸(又稱高碘酸)是一種強(qiáng)氧化劑,,它能氧化糖類及有關(guān)物質(zhì)中的1,2-乙二醇基,,使之變?yōu)槎?,醛不Schiff試劑能結(jié)合成一種品紅化合物,產(chǎn)生紫紅色,。由于高碘酸還可氧化細(xì)胞內(nèi)其他物質(zhì),,使用時(shí)應(yīng)注意選擇好高碘酸濃度和氧化時(shí)間,使氧化控制在既能把乙二醇基氧化成醛基又不至于過氧化,,這是很關(guān)鍵的步驟,。PAS技術(shù)是很少可檢測(cè)不同種類的黏液物質(zhì)(如糖原、黏蛋白和糖蛋白)的方法,,但PAS技術(shù)卻不能區(qū)別黏蛋白和糖原,。若要冸確鑒別黏液物質(zhì)(如黏蛋白或糖原),需加入糖原消化步驟,。大多數(shù)情冴下可用α–淀粉酶或麥芽淀粉酶來催化糖原的糖苷鍵水解,,形成水溶性的雙糖-麥芽糖,在應(yīng)用PAS技術(shù)之前將糖原從組織切片上除去,。人類的唾液被認(rèn)為是消化糖原的一種有效手段,,但是出于安全以及缺乏標(biāo)冸唾液的考慮,不主張應(yīng)用唾液擁有日本進(jìn)口的各種染料,,保證切片染色效果。
糖原染色的參考值及臨床意義:1.慢性淋巴細(xì)胞白血病,、淋巴肉瘤等惡性淋巴細(xì)胞增生性疾病,,其淋巴細(xì)胞的PSA染色積分值增高;等淋巴細(xì)胞良性增生時(shí),,淋巴細(xì)胞積分值正常,。醫(yī)|學(xué)教育網(wǎng)搜集整理故該試驗(yàn)可用于鑒別良性與惡性淋巴細(xì)胞增生性疾病,。2.紅白血病時(shí)幼紅細(xì)胞的PAS染色呈強(qiáng)陽性反應(yīng),積分值增高,;溶血性貧血及巨幼細(xì)胞性貧血時(shí),,幼紅細(xì)胞的PAS染色積分值在正常范圍內(nèi),故該試驗(yàn)也可用于紅白血病的診斷及鑒別幼紅細(xì)胞增多的性質(zhì),。3.急性粒細(xì)胞白血病時(shí),,原始及幼稚粒細(xì)胞PAS染色常呈陰性反應(yīng);急性淋巴細(xì)胞白血病時(shí),,原始及幼稚淋巴細(xì)胞常呈陽性反應(yīng),;急性單核細(xì)胞白血病時(shí),原始及幼稚單核細(xì)胞多呈強(qiáng)陽性反應(yīng),。故PAS染色有助于三種急性白血病類型的鑒別,。切取材料時(shí)刀要銳利,避免因擠壓細(xì)胞使其受到損傷,。江西品牌糖原染色試劑盒
素染色液100mlHE染色屬于常規(guī)切片HE染色的明礬蘇木素的一種,。北京哪家生產(chǎn)糖原染色試劑盒生產(chǎn)廠家
糖原及粘液染色法注意事項(xiàng):1、糖原的固定要及時(shí),,而且標(biāo)本要新鮮,。2、如用無水酒精作糖原的固定劑,,有它的弊病,,因無水酒精滲透較慢,而且容易產(chǎn)生極化,,(極化是糖原顆粒趨向于細(xì)胞的一端),。故用Gendre氏固定液效果較佳,其配法如下:苦味酸飽和于95%酒精85ml40%甲醛10ml冰醋酸5ml3,、各種試劑必須化學(xué)純,,亞硫酸鈉須有濃厚氣味,器皿必須潔凈而干燥,,染色缸亦是,。4、如果Schiff氏試劑,,在經(jīng)過活性碳吸附漂白后不顯無色,,首先應(yīng)考慮試劑中的偏重亞硫酸鈉是否失效。如果偏重亞硫酸鈉氣味不濃,,使用時(shí)可考慮適當(dāng)?shù)脑黾佑昧?。其次考慮堿性品紅本身,常常雖屬同一生產(chǎn)廠家,,但不同批號(hào),,其效果就可能不同,,應(yīng)特別引起注意。北京哪家生產(chǎn)糖原染色試劑盒生產(chǎn)廠家