膠原蛋白是脊椎動(dòng)物和無脊椎動(dòng)物支持結(jié)構(gòu)的主要組成。在人的身體中這是皮膚,、筋,、軟骨、骨骼及結(jié)締組織的較主要的蛋白質(zhì),。膠原蛋白占人體蛋白質(zhì)總量的三分之一,，不論來源于哪一種動(dòng)物或哪一種組織的膠原都有許多共同特性。氨基酸組成中約有三分之一為甘氨酸,，有脯氨酸和羥脯氨酸,。根據(jù)其遺傳分子結(jié)構(gòu)遺傳基因的差別，膠原蛋白分為20幾個(gè)亞型,。但較為常見的為Ι,、Π、ΙΙΙ型膠原蛋白,，即間質(zhì)膠原蛋白,。其中I型較為豐富且品質(zhì)優(yōu)良。鼠尾膠原蛋白還能用于制備三維膠,。太原正規(guī)鼠尾膠原生產(chǎn)廠家

膠原蛋白的提取方法：酸法提?。核岱ㄌ崛≈饕捎玫碗x子濃度酸性條件浸漬處理原料，從而破壞分子間的鹽鍵和希夫堿,，而引起纖維膨脹,、溶解。作為溶劑使用的酸,，主要有鹽酸或亞硫酸,、磷酸、硫酸,、醋酸,、檸檬酸和甲酸等。酸法是提取膠原蛋白比較常用和有效的方法，用酸法提取的膠原較大程度地保持了其三股螺旋結(jié)構(gòu),。此法處理快速,，所得產(chǎn)品的分子量是連續(xù)的，適用于醫(yī)用生物材料及原料的制備,，但產(chǎn)品得率低,，設(shè)備腐蝕嚴(yán)重，污染重,。趙蒼碧等[2]采用0.3%的醋酸溶液在4℃下從牛腱中提取膠原蛋白,，得到高純度的膠原蛋白溶液。杭州正規(guī)鼠尾膠原直銷廠家建立利用自制的鼠尾膠原培養(yǎng)大鼠耳蝸邊緣細(xì)胞的方法,。

鼠尾膠原醋酸溶解：1．將鼠尾膠原加入到0.1M的醋酸中,，制備成濃度為0.1%的溶液。在室溫中攪拌1-3小時(shí)直到完全溶解,。2．建議將溶液轉(zhuǎn)移到擰口的玻璃瓶中,，并小心的在瓶底鋪上一層氯仿。氯仿的量約為膠原溶液的10%,。不要晃動(dòng)或攪拌,。在2-8度中放置過夜。在無菌條件下轉(zhuǎn)移上層的膠原溶液,。我們不建議用過濾的方法無菌化,。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)該方法會(huì)導(dǎo)致丟失蛋白。3．稀釋一定數(shù)量的膠原溶液,。4．按照6-10ug/cm2的濃度包被培養(yǎng)瓶,。在室溫或37度結(jié)合數(shù)小時(shí)或者2-8度過夜。5．從包被表面除去多余的液體,。過夜干燥,。如果膠原溶液不是無菌的，這時(shí)候可以在無菌細(xì)胞操作室中暴光在紫外線下過夜消毒,。在接種細(xì)胞前用無菌的水漂洗,。

鼠尾膠原使用方法：1、細(xì)胞培養(yǎng)器皿的表面包被以包被濃度為2μg/cm2為例,，用無菌0.006mol/L乙酸將膠原蛋白稀釋到0.012mg/mL,。加到相應(yīng)的培養(yǎng)器皿中，確保膠原蛋白溶液鋪滿器皿的表面,。開蓋在超凈臺(tái)上過夜晾干,，也可以在室溫放置1小時(shí)后，用PBS洗3~4次后直接使用,。包被好的器皿在4~25℃至少可保存三個(gè)月以上的時(shí)間,。三維膠原凝膠的制備：A,、無細(xì)胞三維膠原凝膠的制備（以配制1mg/mL三維膠1mL為例）將200μL本品加到置于冰浴的離心管中，加入690μL雙蒸水,，然后加到12μL0.1mol/LNaOH中（如果反過來把12μL0.1mol/LNaOH加到膠原溶液中,，會(huì)由于NaOH不能迅速混勻而產(chǎn)生局部的膠原凝結(jié)），立即混勻,。再加入100μL10×PBS或10×培養(yǎng)液,，混勻后立即加到培養(yǎng)器皿中（混勻后pH為7左右，如果PBS或培養(yǎng)液中沒有加酚紅,，初次使用時(shí)需要測定pH值）,。將培養(yǎng)器皿在室溫放置20min待膠凝固后，轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)箱內(nèi),。如果配制中使用的是10×PBS,，使用前需要加入適當(dāng)體積的細(xì)胞培養(yǎng)液預(yù)平衡?？梢栽跓o菌細(xì)胞操作室中暴光在紫外線下過夜消毒。在接種細(xì)胞前用無菌的水漂洗,。

除了讓細(xì)胞更好貼上去,，鼠尾膠原蛋白還能用于制備三維膠，這樣可以在培養(yǎng)皿中一定程度上模擬身體內(nèi)部的生長環(huán)境,，讓細(xì)胞在更真實(shí)地條件下進(jìn)行生長,。當(dāng)然，除了這些,，耗子尾汁還能做到很多事情,，只需要打開網(wǎng)站——知網(wǎng)，輸入鼠尾膠原蛋白就能看到,，例如鼠尾膠原蛋白可用于制備防皺保濕或美白產(chǎn)品,，制作止血海綿敷料等各種用途。NO.3鼠尾DNA除了從整條鼠尾中提取的鼠尾膠原蛋白,，老鼠的尾巴尖尖也是制備「耗子尾汁」的好材料,。這類「耗子尾汁」通常用來鑒別耗子的基因型，對于轉(zhuǎn)基因小鼠而言,，如果無法通過毛色來分辨動(dòng)物的基因型,，往往會(huì)選用經(jīng)典的PCR法。開蓋在超凈臺(tái)上過夜晾干,，也可以在室溫放置1小時(shí)后,。長沙鼠尾膠原供應(yīng)商

吸去生理鹽水，將尾腱稱重（0.5-1克）,。太原正規(guī)鼠尾膠原生產(chǎn)廠家

鼠尾膠原備用膠凝程序：1）在冰上放置以下物品：膠原蛋白I,、無菌10×PBS、無菌蒸餾水、無菌1MNaOH,。2）確定膠原蛋白I待使用溶液所需的較終濃度的體積,。3）在冰上放置無菌管以收存膠原蛋白I。4）在無菌條件下執(zhí)行以下步驟,。4.1加入10×PBS（終體積/10）mL4.2計(jì)算要使用的膠原蛋白I的體積（不要添加到管中直到步驟4.6為止）終體積x終膠原蛋白I濃度（mg/mL）,。4.3向10×PBS溶液中加入（要加入的膠原體積×0.023）mL的無菌冰冷1MNaOH。4.4向4.3溶液中加入下述體積的無菌冰冷蒸餾水：添加蒸餾水體積=V（終）—V（膠原蛋白）—V(10×PBS）—V（1MNaOH）4.5混合管中的物質(zhì)并放入冰中,。4.6加入膠原蛋白I并計(jì)算體積,，混勻，冰上備用,。5）膠原蛋白I溶液可立即使用或在冰上放置2-3小時(shí),。6）使用時(shí)，無菌條件下將溶液加入到細(xì)胞培養(yǎng)裝置中37°C凝膠30min,。太原正規(guī)鼠尾膠原生產(chǎn)廠家